医蓓舒高危HPV多克隆抗体的制备与应用
医蓓舒多克隆卵黄抗体（Immunoglobulin of yolk，IgY）
一、IgY的发现； 二、IgY的结构； 三、IgY的特征； 四、IgY的制备； 五、IgY的应用； 六、参考文献。
IgY的发现
1893年Klemperer 用试验首次证明特异 性抗原免疫鸡后，产 生的其中一种抗体会 转移到卵黄中。 鸟类的血液循环 里有三种免疫球蛋白 (IgY、IgA与IgM)，其 中IgA与IgM会在输卵 管中与其他的蛋白质 结合而构成鸡蛋蛋白 的部分，而IgY会经由 蛋黄薄膜转移到蛋黄 中。
医蓓舒HPV多克隆抗体的制备
IgY的其它应用
抗胃肠道感染
轮状病毒(Rotavirus)是最主要造成婴孩传染性肠胃炎的病原 菌，且是目前导致婴幼孩童严重腹泻的主因，在开发中国家，每 天造成2000名左右的新生儿死亡，目前尚无有效的疫苗被发展出 来。许多研究者证明给予口服抗-rotavirus的IgG或IgY，即能有效 控制因轮状病毒感染而引起的腹泻。
IgY的特征
无需采血，只需收集免疫母鸡产下的鸡蛋即可获得抗体; 使用少量抗原免疫禽类既可获得大量的质量均一的特异性IgY; 由于种系发生距离相差很大，禽类IgY与哺乳动物免疫球蛋白 之间不会发生交叉血清学反应; 4. 不激活哺乳动物的补体系统，不与类风湿因子或Fc受体相结合， 避免在免疫检测过程中产生假阴性或价阳性结果; 5. 耐酸，耐碱，巴氏灭菌温度下也不会失活并且在pH值小于3时 仍能保持稳定活性 ； 6. 比起从哺乳类动物提取的抗体更加安全卫生； 7. 对哺乳动物抗原的反应度(sensitivity)高，即输入同等抗原情况 下，免疫反应产生抗体的速度、数量、效价高于哺乳动物； 8. 特殊抗体形成率高； 9. 注射方法比接种疫苗量更多也更安全； 10. 起到预防及补助治疗的作用； 11. 能够迅速应对爆发性疾病。 1. 2. 3.
IgY的发现
IgY普遍存在于鸟类、 爬行动物和两栖类，在 功能上等价于哺乳动物 IgG，但其许多生物学 性质仍未被发现。近来 许多研究者分析了IgY的 基因组成和生物学功能， 而且证实其为哺乳动物 IgG和IgE的直接起源。
IgY的结构
IgY，由两条重链（H） 和轻链（L）组成，重 链（H）由一个可变区 （V）和4个恒定区（C） 组成，没有铰链结构。 完整分子量为180KDa （7.8S），重链为 67－ 70KDa，轻链为25KDa
参考文献
• IgY能在HPV病毒阳性细胞中特异性定位E7蛋白（Arthritis rheum,2003,49(3):328-334.） • 段琳,赵文峰,丁建坤, 等 . 卵黄抗体开发现状及应用进展 . 中国生化 药物杂志,2010,31(3):212~215 • 张绍兰 .鸡卵黄抗体研究进展 .西南军医,2008,(10)3:120~121 • 那红,杨暇中,欧伶.鸡卵黄免疫球蛋白Y的性质.华东理工人学 报,1998,24(2):172~180 • 张明娟,杨军,葛祷,等.抗哇巴因鸡蛋黄I gY与兔抗体I gG在酶联免疫检 测中的比较.中国应用生理学杂志,2007,23(4):505~508 • 史继静,韩莉,刘朝奇,等. HIV- 1 NCp15基因的克隆、蛋白表达及鸡卵 黄抗体的制备.食品科技,2009,34(3):28~31 • 林芳,黄建新,陈超,等.鸡卵黄抗体的制备以及金磁微粒为载体去除人 血浆部分高丰度蛋白的研究. ISSN1007- 8738细晌与分子免疫学杂 志,2008,24(7):706~709
参考文献
• 吴玉龙,张炜明,刘文琪,等.抗SEA鸡卵黄抗体用于血吸虫循环抗原检测 的初步研究.现代生物医学进展,2008,8(12):2416~2418 • Rüdiger Schade,Christian Staak,Coenraad Hendriksen,etc.The Production of Avian (Egg Yolk) Antibodies:IgY.ATLA 24: 925-934 • Kazuyuki Hirai, Hideyuki Arimitsu, Koji Umeda,etc. Passive Oral Immunization by Egg Yolk Immunoglobulin (IgY) to Vibrio cholerae Effectively Prevents Cholera. Acta Med Okayama,2010,64(3):163~170 • Linda W. Chui, Robin King, Jeong Sim. Development of an immunocapturepolymerise chain reaction assay using IgY to detect Mycobacterium avium subsp. Paratuberculosis. The Canadian Journal of Veterinary Research, 2010,74:102~107
200mg IgG per bleed (40 ml 50-100mg IgY per egg (5-7 blood) eggs per week) 200 mg ~ 1500 mg 2-10% no no no no
IgY的特征
IgY的制备
IgY的制备
医蓓舒HPV多克隆抗体的制备
多克隆组合抗体制备
Iห้องสมุดไป่ตู้Y的其它应用
中国上海第三医科大学细菌粘附试验
变形链球菌经特异性IgY不同时间处理后培养，细菌的粘附率与普通 牙膏组和细菌组二项对照组相比，有相当明显的下降(由35.2%大幅度 下降至14.8%)，差异十分显着。
IgY的其它应用
预防龋齿
宝宝康IgY儿童安全牙膏
IgY其它应用
免疫检测
• 抗哇巴因鸡蛋黄IgY检测内源性哇巴因(EO) • 抗HIV-1 NCp15蛋白IgY检测血清中HIV • 抗人血浆白蛋白(HSA)和IgG的IgY去除人血浆部 分高丰度蛋白 • 抗可溶性虫卵抗原(SEA)IgY用于血吸虫循环抗 原检测 • 抗霍乱毒素B亚基IgY(anti-CTB IgY)防止霍乱 • immunocapture - polymerise链反应检测方法开 发利用IgY抗体检测结核分枝杆菌亚种
谢谢！
IgY的特征
Mammalian IgG Avian IgY
Antibody sampling
Antibody amount
invasive
non-invasive
Amount of antibody per month Amount of specific antibody ~ 5% Protein-A/G binding Interference with mammalian IgG Interference with rheumatoid factor Activation of mammalian complement yes yes yes yes
工程菌DNA 扩增技术表达组合抗原 抗体蛋白修饰和 洁净工程技术 推入患处喷洒直接 中和与清除HPV病毒
筛选高危HPV病毒及 妇科炎症组合病原体
注入禽类激发产生多克隆卵黄 免疫球蛋白组合抗体
医蓓舒高活性抗 HPV及妇科炎症复合免疫球蛋白
医蓓舒通过抗体特异性识别，清除涵盖HPV16、HPV18型在内的高危病毒；同时，有效清除白色念珠菌、金黄色葡萄球菌、毛滴虫 、阴道嗜血杆菌、霉菌。维护女性宫颈及阴道健康。