微生物工程上游技术总结
代谢活性强 生长旺盛 细胞繁殖快 生命力强
筛 选
要求:适量增加SO2生成量, 但不能过多改变该菌种的其它 特征 剂量确定:低剂量,致死剂量 的75%,15s
初筛:醋酸铅显色法
SO3 _ 二氧 化硫 还 原酶 H2S 2 CH3COOH + PbS
H2S+ Pb(CH3COO2)
复 筛:仅二氧化硫 还原酶活减弱,其 它酶活不影响,表 现为对亚硫酸盐利 用受阻(菌落小),对 硫化钠等硫源不变 (菌落仍大) 生产性能 突变株确定 啤酒发酵试验 遗传物质分析 稳定性
7L发酵罐优化
单因子件确定
出发菌株的生理生化特征
未知 已知
鉴定种属
培养基组分单因子优化
碳 源
氮 源
CaCO3
响应面优化
4因子5水平 27组实验
适量高产SO2菌株选育与啤酒 风味稳定性研究 优秀博士论文
出发菌株
诱 变 (生长曲线→诱 变剂致死量→剂 量确定)
微生物工程上游技术
原理部分总结
原始野生的出发菌株
调节机制 调节方法
理解产物 的代谢途 径和调节 方法 采用适当 的育种方 法
原理 方法
优良的高产菌株
L-乳酸高产菌的菌种选育 优秀硕士论文
菌株采集
乳制品工厂,泡菜,厌氧颗粒污泥 富集培养基,45℃,培养20h 稀释,碳酸钙溴甲酚紫固体平板培养, 45℃,透明圈和变色圈大的菌落 发酵,测定产L-乳酸的产量和总量, 测其 光学纯度 L-乳酸产量高,光学纯度高
富 集
初 筛
复
筛
确定为出发 菌株
斜面保藏
初 筛
复 筛
形态:菌落、显微镜形态
出发菌株
生理生化:C,N源的利用、16srRNA的种属鉴定 生长特性:温度、pH,培养时间
摇瓶发酵培养基 组分优化
单因子:C源,N源,CaCO3,金属离子,生长因子, 温度、接种量和摇床转速 响应面:4因子5水平,27组,响应面分析 组分确定