• 1、 观察前的准备
（1）显微镜的搬运
显微镜从显微镜柜或镜箱内拿出时，要用右手紧握镜臂， 左手托住镜座，平稳地将显微镜搬运到实验桌上。
（2）显微镜的放置
将显微镜放在自己身体的左前方，离桌子边缘约10cm左右 ，右侧可放记录本或绘图纸。
（3）调节光的强度
接通电源，可利用灯光通过反光镜来调节光强度。
2、观察
•
•罗伯特·虎克观察 •到的细胞 •罗伯特·虎克制造的680）
•1680荷兰人A. van Leeuwenhoek成为皇家学会会员，一生中制作了 200多台显微镜和500多个镜头。他是第一个看到活细胞的人，观察 过原生动物、人类精子、鲑鱼的红细胞、牙垢中的细菌等等。
•整个过程，油镜都 不能离开香柏油！
（2）用过油浸镜的，先用擦镜纸将镜头上的油擦去，再用擦镜纸
蘸着二甲苯擦拭2—3次，再用擦镜纸将二甲苯擦去。
（3）转动物镜转换器，将目镜呈现八字放置与载物台错开。
（4）将载物台下降到最低位置。
•
四、评分细则及说明
•
•
第二套 细菌革兰氏染色技术
一、 起源 革兰氏染色是用来鉴辨细菌的一种方法，细菌 细胞壁上的主要成份不同，利用这种染色法，可 将细菌分成两大类。这种染色法是由一位丹麦医 生汉斯•克里斯蒂安•革兰(1853年-1938年)于1884 年所发明，最初是用来鉴别肺炎球菌与克雷白氏 肺炎菌之间的关系。
食品检验工国家职业技 能鉴定专业培训
2020年4月30日星期四
食品检验工（高级） 国家职业技能鉴定
理论培训
主 讲：张 滨 长沙环境保护职业技术学院环境科学系
•
食品检验工（高级）技能考核 （第一套）
• 一、显微镜的发展
•【图片说明】 •1590年代荷兰眼镜制造商J.Janssen和Z.Janssen父子制作了第一台 复式显微镜，尽管其放大倍数不超过10倍，但具有划时代的意义 。
年代德国物理学家泽尼克首先设计并于1942年制造了第一台相差显微镜，能
将这种看不见的相位变化转变为看得见的振幅变化，由于此项发明，泽尼克
于1953年获诺贝尔奖。相差显微镜主要用于观察活细胞，不染色的组织切片
或缺少反差的染色标本。
•
•解剖显微镜
•此种显微镜放大倍率为4X至40X或更高，其倍率虽然不高，但是可以观察 不透明的物体，因为光线是物体表面反射入镜，与复式显微镜不同，使用时 用两眼观察，可观察到立体物像，且可边观察边解剖。
（3）油镜观察
•注意！
先用粗调节旋钮将载物台下降，并将高倍镜转出；在玻片标本的
镜检部位滴上一滴香柏油；用调节旋钮将载物台缓缓地上升，使 油镜浸入香柏油中；用调节旋钮调至最清晰为止；观察完毕，下 降载物台，将油镜头转出，先用擦镜纸擦去镜头上的油。
3、显微镜的保养 （1）观察完后，移去观察的•香载柏玻油片标本。
革兰氏染色的对象是细菌的细胞壁。染色后 的细菌可在显微镜下更好的观察，以便于区分。
该染色法是以丹麦医生和细菌学家汉斯•克里斯蒂 安•格兰的名字命名的，他在19世纪末发展出这 一方法。
•
二、特别提醒 不同的细菌在该染色法的作用底下反应不 同，借以区分成为两类： 格兰氏阳性细菌, 胞壁染色后呈蓝紫色 格兰氏阴性细菌, 染色后呈红色。
•
•普通光学显微镜
•
•相位差显微镜
•位相差显微镜相差显微镜是能将光通过物体时产生的相位差（或光程差）转
变为振幅（光强度）变化的显微镜。人的眼睛只能鉴别可见光的波长（颜色
）和振幅的变化，不能鉴别相位的变化。但是大多数生物标本高度透明，光
波通过后振幅基本不变，却存在相位的变化，人的眼睛感觉不到。19世纪30
• 二、显微镜基本构造
•
普通光学显微镜的构造可分为两大部分：一为机械装置， 一为光学系统。
机械装置 •
显微镜的机械装置包括镜座、镜筒、物镜转换器、载 物台、推动器、粗动螺旋、微动螺旋等部件 （1）镜座 镜座是显微镜的基本支架，它由底座和镜臂两部分组成 。在它上面连接有载物台和镜筒，它是用来安装光学放大 系 统部件的基础。
（1）低倍镜观察
将标本片放置在载物台上，用标本夹夹住，移动推动器， 使被观察的标本处在物镜正下方，转动粗调节旋钮，使物 镜调至接近标本处，用调节旋钮慢慢下降载物台，直至物 像出现直到物像清晰为止。用推动器移动标本片，找到合 适的目的像并将它移到视野中央进行观察。
•
（2）高倍镜观察
•调节时，要
在低倍物镜观察的基础上转换高倍物侧镜视。显微镜
•
•扫描式电子显微镜SEM •透射式电子显微镜
•1、透射式电子显微镜1932年，德国科学家用电子替代可见光制成，其解像力是 人眼的10000倍，放大倍率达250000倍或更多。使用穿透式电子显微镜的标本需要 非常薄，(7.5-15nm)。 •2、扫描式电子显微镜扫描式电子显微镜的电子束不穿过标本，所以标本无需切 片处理，而代之在标本表面涂上一层铂金，当电子撞击标本表面各点时，便产生 次及电子，呈现立体状态，可观察标本的形状及表面的特• 征。
•
（6）粗动螺旋 是移动镜筒调节物镜和标本间距离的机件 （7）微动螺旋 用粗动螺旋只可以粗放的调节焦距，要得到最 清晰的物象，需要用微动螺旋做进一步调节。 微动螺旋每转一圈镜筒移动0.1毫米。
光学系统
由反光镜、聚光器、物镜、目镜等组成， 光学系统使物体放大，形成物体放大像 。
•
• 三、显微镜基本操作
（2）镜筒 镜筒上接接目镜，下接转换器，形成接目镜与物镜（装 在转换器下）间的暗室。
•
（3）物镜转换器 物镜转换器上可安装3—4个接物镜，一般是三个接物 镜（低倍、高倍、油镜）。转动转换器，可以按需要 将其中的任何一个接物镜和镜筒接通，与镜筒上面的 接目镜构成一个放大系统。
（4）载物台 载物台中央有一孔，为光线通路。在台上装有弹簧标 本夹和推动器，其作用为固定或移动标本的位置，使 得镜检对象恰好位于视野中心。 （5）推动器 是移动标本的机械装置，它是由一横一纵两个推进齿 轴的金属架构成的，在纵横架杆上刻有刻度标尺。
•
•无菌 水
•三、革兰氏染色操作步骤
•请注意：如果是新的玻片，先在火焰上灼烧一下！
（1）涂片：取干净载玻片一块，在载玻片的中央滴 一滴蒸馏水，按无菌操作法取菌涂片做成菌液。