大蒜茎尖离体培养实验设计
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实验目的
试验目的
本试验以贵州麻江红蒜为材料,以B5培养基为 基础培养基,通过不同的激素配比,以期筛选出 适合茎尖组织形成芽及后续生长的培养基。
试验材料及方法
• 试验材料 麻江红蒜 选取质量2g左右,大小均匀一致,饱满匀整的麻 江红蒜。
• 试验方法
培养基及培养条件 不定芽诱导培养基:以B5为基础培养基,附加6BA(1.0、2.0、3.0 mg/L),NAA(0.10、0.20mg/L), 附加蔗糖30 g/L;上述培养基用6.5g/L的琼脂粉固 化,pH 5.8~6.0,分装于瓶中,在121℃湿热灭菌 30 min,冷却备用。培养温度(25±1)℃,光照强 度1 500~2 000 lx,光照时间12 h/d。
• 芽组织的诱导
取红蒜鳞茎,剥去蒜瓣外层苞膜叶,先用洗涤剂浸 泡15 min后洗净,再用自来水冲洗 30min,后用 70%的酒精浸泡1 min,再用2%的次氯酸钠消毒 5~8 min,然后用无菌水反复冲洗数次,直至干净 为止。去除底部木栓化组织,往芽端移动2-3mm, 切下备用,在超净工作台上,在解剖镜下剥取1mm 长的茎尖,接种在芽组织诱导培养基上,每个处理 接种15瓶,每瓶接种2个茎尖,观察记录试验过程, 20 d后统计分析试验结果。
• 数据分析 20天后开始统计出芽数,第30天时确定出芽数。 根据接种外植体数计算出芽率,再通过比较出 芽质量,增值系数筛选出最适宜诱导出芽的培 养基。 • 继代培养:选取上面筛选出的最适培养基作 为继代培养基,继代培养,为后续成苗做准 备。
参考文献
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诱导芽分化培养基的具体处理
处理号 1 2 3 4 5 6 激素组合 A(6-BA,mg/L) 1.00 1.00 2.00 2.00 3.00 3.00 接种外植体数 B(NAA,Amg/L) 0.10 0.20 0.10 0.20 0.10 0.20 30 30 30 30 30 30
大蒜茎尖离体培养实验设计
组员:孙敏涛 李静 邢晓东 2016,11,29
试验背景
大蒜为百合科葱属植物,内含丰富的硒、锰、锗 等元素,有独特的杀菌和保健功能,是一种经济价 值很高的蔬菜,但大蒜在生产上采用鳞茎无性繁殖, 长期以来由于病毒病的危害,鳞茎退化现象严重, 导致产量下降,品质变劣,不少学者对大蒜进行过 组织培养研究,目前,国内外许多研究者认为,通 过对大蒜茎尖分生组织的培养,可有效脱去大蒜体 内的病毒。
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