实验三外周血单个核细胞分离
人血液中各种细胞的密度如下: 红细胞:1.093 白细胞:1.092 淋巴细胞和单核细胞:1.075-1.090 血小板:1.030-1.035
F/H= 1.077±0.001
实验步骤
1.用抗凝管抽取外周血2ml; 2.将装有2ml分离液的试管微微倾斜,用吸管 将抽取的抗凝外周血缓缓加入到分离液上 层,保持液面分层清晰; 3.水平离心机中离心,2000rpm,20min; 4.将离心好的试管轻轻拿出,用毛细吸管吸取 PBMC层细胞涂片; 5.将涂片进行瑞氏染色。
实验三 外周血单个核细胞分离
实验目的
掌握外周血单个核细胞分离的原理与操作 掌握外周血单个核细胞的概念
实验原理
人外周血单个核细胞 (peripheral blood mononuclear cell, PBMC)包括淋巴细胞 和单核细胞。
单个核细胞的体积、形态和比重与外周 血其他细胞不同。因此利用一种介于 1.075-1.090之间的聚蔗糖-泛影葡胺 (ficoll-hypaque)分离液作密度梯度 离心,离心后不同比重的血细胞在分离 液中呈梯度分布,从而分离出PBMC。