(1)仪器装置
铂丝: 1mm; 2/3 瓶: 硬质玻璃(石英玻璃) 10-20mg——500ml 200mg——1000-2000ml
2. 氧瓶燃烧法
(2)燃烧产物与吸收液
氟——HF:
水
氯——HCl:
水-氢氧化钠
溴——Br2+HBr: 过氧化氢-氢氧化钠
碘——I2(+HIO): 氢氧化钠-硫酸肼饱和溶液
定义
同一均匀供试品多次取样测定所得 结果之间的接近程度
标准偏差(s,SD);相对标准偏差(RSD) 数据要求同“准确度”
三、专属性
定义 与应用
在其他成分(杂质,降解产物,辅料等)可能 存在下,方法能正确测定出被测物的特性
鉴别,杂质检查和含量测定方法
(一) 鉴别反应 空白, 结构相
似物或有关物质呈 负反应
(4) 应用范围: 含有氨基或酰氨(胺)结构
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1. 凯氏定氮法
(5) 示例与讨论
O H3C
H N
NH
扑米酮的含量测定
O
C12H14N2O2 = 218.26
取本品约0.2g, 精密称定, 照氮测定法测定; 每1ml 硫酸滴定液(0.05mol/L)相当于10.91mg的扑米 酮(C12H14N2O2)
碘他拉酸测定: 氢氧化钠试液 与锌粉回流后, 用硝酸银滴定
回流
碱性溶液中加 锌粉回流, 使碳碘键还原转化 为无机碘化物
碘番酸 胆影酸 胆影葡胺注射液 泛影酸 泛影酸钠 泛影葡胺注射液
(二) 适用于: 结合牢固的含碘有机药物
还原法
(直接与芳环连接)
二、经有机破坏的方法
适用于: 含金属, 卤素, 氮, 硫, 磷等 有机药物
鉴别的显色法;杂质检查的TLC
适用于能直观显示信号与基线噪声 水平的分析方法, 如HPLC法
信噪比S/N=3(2)时的相应浓度或量
适用于不能直观比较信噪比的仪器
分析方法, 如UV-Vis法

LOD
f
3S空

C样 A样
3S空
五、定量限
定量限(limit of ห้องสมุดไป่ตู้uantitation, LOQ )是指试样 中被测物能被定量测定的最低量; 反映方法的灵敏度
用最小二乘法进行线性回归; 或经数学转换后 再进行线性回归
范围系指方法适用的高低限浓度或量的区间 在试验研究开始前确定验证的范围和方法 在范围内应能达到一定精密度,准确度和线性
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六、线性与范围
涉及定量测定的项目均需对范围进行验证 如: 含量测定, 含量均匀度, 溶出度或释放度, 特殊元素或特殊杂质的定量检查
(2) 消解剂与助剂: 硫酸-硫酸钾-硫酸铜
(3) 操作法
供试品: 常量法含氮25~30mg; 半微量法: 1.0~2.0mg 消解: 溶液成澄明的绿色, 继续加热30min 蒸馏与接收: 40%氢氧化钠碱化, 水蒸气蒸馏, 2%硼酸溶液吸收 滴定: 甲基红-溴甲酚绿指示液, 硫酸滴定液(0.05mol/L), 灰紫色
硫——SO3(+SO2):
水-过氧化氢
磷——P2O5→H4P2O7,(HPO3)n: 水-硝酸(煮沸)
2. 氧瓶燃烧法
药物含量测定方法验证
需验证的项目
•鉴别试验 •杂质检查 •含量测定 •防腐剂 •溶出度,释放度
验证的内容
准确度
精密度
重复性 中间精密度 重现性
专属性
检测限 定量限 线性 范围 耐用性
关键步骤: 消解 试剂作用: 硫酸-消解剂; 硫酸钾-提高沸点;
硫酸铜-催化剂; 硼酸-固氮(NH3·H3BO3)
2. 氧瓶燃烧法
含待测元素的有机药物在充满氧气的燃烧瓶中充分燃烧 有机结构: 彻底分解为CO2和H2O 待测元素: 转化为不同价态的氧化物(或无氧酸) 被吸收于适当的吸收液中(多以酸根离子形式存在)
加入已知量杂质进行测试
每个浓度各3份
二、精密度
1.重复性
同一分析人员 连续测定所得结 果的精密度; 也称批内精密 度或日内精密度
2.中间精密度
不同时间不同 分析人员用不同 设备测定结果之 间的精密度 批/日间精密度
3.重现性
在不同实验室 不同人员测定结 果之间的精密度
法定标准采用的 分析方法进行
一、准确度
定义
准确度系指用该方法测定的结果与 真实值或参考值接近的程度
一般用回收率(%)表示
(一) 含量测定方法
回收率（%）
测得量 加入量
100（%）
(三) 数据要求 9个测定结果
回收率（%）
测得量 本底量 加入量

100（%）
(二) 杂质定量测定
3个不同浓度 (80,100,120％)
测定结果应具有一定准确度和精密度
杂质和降解产物用定量方法研究时, 应确定LOQ
LOQ的测定方法与LOD相同 相应的系数(倍数)不同, 如信噪比S/N=10
六、线性与范围
线性系指在设计的“范围”内, 响应值(y)与 被测物浓度(x)直接呈正比关系的程度 y = ax +b
系列(n≥5)供试样品测定,以响应信号作为被测 物浓度的函数作图
一、不经有机破坏的方法
1.酸水解法
水难溶性含金属 有机药物与矿酸 (盐酸)共热: 十一烯酸锌测定
回流
有机结合的待 测元素原子离 解, 转化为无机 盐(离子)
2. 碱水解法
含卤素有机药物 (脂肪碳链)与氢氧 化钠溶液回流: 三氯叔丁醇测定
(一) 适用于: 结合不牢固的
水解法
含金属或含卤素有机药物
一、不经有机破坏的方法
(三) 含量与杂质测定 含杂质或降解产
物的试样中各峰能 获得分离
四、检测限
检测限(limit of detection, LOD)是指试样中被 测物能被检测出的最低浓度或量 LOD是一种限度检验效能指标,反映方法灵敏度
1.目视法
2.信噪比法
3.标准偏差 法
适用于可用目视法直接评价结果的 分析方法, 非仪器分析法
原料药/制剂含量测定: 80%~120%
制剂含量均匀度检查: 70%~130%
溶出度或释放度检查: 下限-20%~上限+20%
特殊元素含量测定: 下限-20%~上限+20%
(待测原子与碳原子结合牢固者)
(一) 湿法破坏
适用于含氮有机药物分 析的前处理 硫酸作为分解剂, 氧化剂 (硝酸,高氯酸)辅助分解剂 凯氏定氮法
(二) 干法破坏
1. 高温炽灼法
用于含卤素药物的鉴别 无水碳酸钠,硝酸镁,氢氧 化钙,氧化锌等辅助灰化
2. 氧瓶燃烧法
1. 凯氏定氮法
(1) 仪器装置