研究目的
1. 输尿管部分梗阻动物模型梗阻前、后、以及解除梗阻后的肾血管形态 变化规律；
2. 对输尿管部分梗阻动物模型的血管灌注技术进行探索，以实现模型三 维可视化；
3. 输尿管部分梗阻动物模型血管形态变化与肾血管内皮细胞凋亡的关系， 为临床肾积水的防治提供理论依据。
研究方法、可行性分析
研究方法
铸型： 肾小球铸型：肾动脉插管，采用聚甲基丙烯酸填充剂灌注； 肾盂肾盏铸型：输尿管插管，采用过氯乙烯和自凝牙托材料的混合填充剂 灌注； 肾集合管铸型：输尿管插管，采用过氯乙烯填充剂灌注 扫描电镜：分别对梗阻前后肾小球和集合系统进行观察，比较。 三维重建：首先采用羧甲基纤维素/氧化铅水凝胶经肾动脉插管灌注，使 用螺旋CT扫描，利用Mimics软件重建。 凋亡检测：石蜡切片采用TUNEL法原位检测血管内皮细胞凋亡，免疫组 化检测Bcl-2 、bax 。
可行性分析
技术路线的设计合理可行； 在铸型技术上拟请一名经验丰富的技术员指导灌注； （图1） 人员组成齐备 输尿管部分梗阻模型已制备 本实验采用输尿管部分梗阻模型，输尿管 部分梗阻模型报道的方法很多，各有优缺点，选择何种模型呢？通过预实验 对输尿管套管法和输尿管不全结扎法两种造模方法的对比，发现输尿管套管 法由于套管的刺激作用，粘连较重，解除梗阻较困难，输尿管不全结扎法对 输尿管周围组织粘连轻，梗阻易解除，解除梗阻后尿流通畅； （图2） 实验所需的药品试剂、仪器设备已具备：
过氯乙烯[11,12,13]
溶剂挥发后凝固成型法 ABS [14.15] 铸 型 填 充 剂 塑料填充剂 化学反应成型法 自凝牙托材料[16,17] 聚甲基丙烯酸甲酯 [18,19]
合金填充剂
铅、铋、锡、镉
环氧树脂[20]
X 线填充剂
明胶氧化铅：
20 世纪30 年代, 法国解剖学家Salmon 曾通过整尸灌注氧化铅进行血管
药品试剂（图3）压力灌注器 （图4）
日本大耳白兔100只 建模
梗阻观察组（O）48只
假手术组 （SO）4只 梗阻解除组 36只 正常对照组 （N）12只
O1组 O2组
O4组
O8组
1周 2周 4周
大体标本解剖 大体标本观测
肾盂、肾盏、 肾血管铸型
扫描电镜
三维重建 血管形态
凋亡
TUNEL法 Bcl-2 、bax Hoechst
[16] 李忠华.人体铸型标本的设计和制作[M] .广州:华南理工大学出版社,1992 :419 [17] 李泽宇,吴坤成,刘畅等.过氯乙烯和牙托材料的混合填充剂在铸型标本中的应 用. 解剖学杂志,2008,31(2):282-283 [18] 钟 世 镇 , 韩 震 . 有 机 玻 璃 及 其 单 体 在 解 剖 技 术 学 上 的 应 用 . 解 剖 学 研 究,1980(01):114-117 [19] 李培.聚甲基丙烯酸甲酯、过氯乙烯在头颈部血管铸型标本制作中的应用.中 外健康文摘.2007,4(9):1156 [20] 黄海龙.改良环氧树脂的几点改进. 解剖学杂志,2006,29(3):23 [21]Salmon M. Artè res de la peau:é tude anatomique etchirurgicale[M].Paris:Masson,1936 [22]Salmon M.Artè res des muscles de la te te et du cou [M].Paris:Masson,1936 [23] Rees MJ, Taylor GI. A simplified lead oxide cadaver injection technique[J]. Plast Reconstr Surg, 1986, 77(1): 141-145 [24] Tang M, Geddes CR, Yang D. et al. Modified lead oxide-gelatin injection technique for vascular studies[J]. J Clin Anat, 2002, SRI. 1: 73-78. [25] 楼新法, 梅劲, Geddes CR,等.明胶- 氧化铅血管造影术的优化[J].中国临床解 剖学杂志,2006.24(3): 259-262
立题依据
输尿管部分梗阻是一种常见的临床现象，可由多种因素引
起，梗阻如不能及时解除，将导致肾积水，肾积水使肾盂内压力 逐渐升高，压迫肾小管，肾小球及其附近的血管，造成肾组织缺 血缺氧，肾实质逐渐萎缩变薄，肾容积增大，最后全肾成为一个 无功能的巨大水囊。梗
目前国内外对于正常人、动物肾动脉及分支、肾小球的形态分布 [14,15,30,31] 作了研究，对于动物模型肾动脉及分支、肾小球的研究报道少 见，尤其是肾积水模型方面尚未见报道，肾血管三维重建的研究亦未见 报道。 梗阻性肾病的特征性病理学变化主要表现为肾小管萎缩和间质纤维 化, 而肾小管上皮细胞凋亡是肾小管萎缩和肾实质丧失的重要原因[32,33]。 在肾积水的过程中，肾动脉及其分支、毛细血管内皮细胞是否有凋 亡？凋亡的程度如何？凋亡与血管形态的改变有着怎样的关联？血管形 态的改变在肾积水的病理演变过程中起着怎样的作用？未见相关报道。 因此，基于上述研究现状，得出研究题目： 输尿管部分梗阻血管重塑的形态学改变及机制
技 术 路 线 图
肾动脉分支、分段、 肾小球形态 血供及管径测量 观察
统计分析
创新和特色
1.采用铸型技术对输尿管部分梗阻动物模型肾血管，肾盂肾盏、 肾集合管进行灌注，对今后此类动物模型的铸型制作提供参考；
2.采用铸型技术对输尿管部分梗阻的肾血管形态变化进行探讨， 直接观测肾血管的变化过程，从形态学方面解释肾积水后肾功能 损害的机制；
0.1
0.4 3.2
参考文献
[1] Murphy GP,Scott WW.The renal hemodynamic response to acute and chronic ureteral occlusions[J].Urol,1966;95(5):636-657. [2] Moody TE,Vaughn ED Jr,Gillenwater parsion of the renal hemodynamic response to unilateral and bilateral occlusion[J].Invest Urol,1977;14(6):455-459. [3] cheng EY,Maizels M,Chou P,et al.Response of the newborn ureteropelvic junction complex to induced and later reversed partial ureteral obstruction in the rabbit model[J].Urol,1993;150(2pt2):782-789 [4] Bartrum RJ Jr,smith EH,D`Orsi CJ,et al.The ultrasonic determination of renal transplant volume[J]. Clin Ultra,1974;2(4):281-285 [5] 吴阶平.泌尿外科[M].济南:山东科学技术出版社,2001:272-287 [6] 曾甫清,鲁功成,刘博,等.一种新的可复性慢性不全梗阻性肾积水动物模型的 建立[J].临床泌尿外科杂志,1996,11(5):299-301 [7] Chevalier RL,Thornhill BA,Wolstenholme JT et al.Unilateral ureteral obstruction in early development alters growth:dependence on the duration of obstruction[J]. Urol,1999;161(1):309-313
3.使用数字人虚拟技术对输尿管部分梗阻的肾血管进行三维重建； 为数字化虚拟泌尿道血管及模拟临床手术入路方式提供有益的经 验。
实验进展安排
2009.5-2009.6 完成肾血管、肾盂肾盏、集合管铸型及X线填 充剂的配置，探索最佳的灌注浓度，进行小样本的预实验；
2009.6-2009.12 完成梗阻前后及梗阻解除组肾血管铸型、肾 盂肾盏、集合管铸型，CT扫描，凋亡实验指标的检测；
[8] 马胜利,叶章群,陈志强,等.输尿管部分梗阻后肾小球滤过率的时相性变化研究 [J].武汉大学学报(医学版),2006,27(3):299-405 [9] Ulm AH,Miller F.An operation to produce experimental reversible hydronephrosis in dogs[J]. Urol,1962;88(3):337-341 [10] Wen JG,Chen Y,Frokier J,et al.Experimental partial unilateral ureter obstruction,Pressure flow relationship in a rat model with mild and severe acute ureter obstruction[J]. Urol,1998;160(4):1567-1571. [11] 李富德;,张德元.铸型标本填充剂的研制.吉林大学学报(医学 版),1992(01) :55 [12] 王兴海,王起云,刘牧之等.过氯乙烯铸型标本在电镜扫描技术上的应用.解剖 学研究,1981(01) :121-122 [13] 李忠华,王起云,钟世镇.用过氯乙烯制备肾集合管扫描铸型的方法.解剖学研 究,1981(01) :123-124. [14] 张朝佑,魏宝林,侯广棋.成人肾小球铸型的扫描电子显微镜观察.解剖学 报,1980,11(1):1-4 [15] 袁发焕,史景泉,光丽霞.不同溶剂ABS液用于大鼠肾血管铸型的对比研究.中 华物理医学杂志,1995,17(3):139-141