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二、基本原理
当吸收光谱重叠的a、b两组分共 存时，若要消除a组分的干扰测定b组 分，可在a组分的吸收光谱上选择两 个吸收度相等的两波长λ1和λ2，测定 混合物的吸光度差值。然后根据ΔA 值计算b的含量。
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磺胺甲噁唑（SMZ）在257nm波长 处有最大吸收；甲氧苄啶（TMP）在此 波长吸收最小并在 3 0 4 nm 波 长 附 近 有 一 等吸收点，故选定257nm为SMZ的测定 波长（λ2），在 3 0 4 nm波长附近选择参 比波长（λ1）。
(λ1)，要求ΔA＝Aλ2－Aλ1＝0。
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再在λ2与λ1两波长处分别测定供试品 溶液的稀释液与对照品溶液(1)稀释液
的吸收度，求出各自的吸收度差值
(ΔA)，计算，即得。
.15四、操作注意事项测定之前应先检查仪器波长是否 准确。
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五、思考题
1．双波长分光光度法测定复方制剂有 何优点?
2．应用双波长分光光度法应如何选择 测定波长和参比波长?
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A257＝AS，257＋AT,257
A304＝AS，304＋AT,304 ΔA＝ A257－ A304 ∵AT,257＝AT,304
＝AS，257－AS，304
＝ΔEC SMZl ΔA与CSMZ有线性关 系。
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在λ2与λ1两波长处分别测定供试 品 溶 液 与 SMZ对照品溶液的吸收度，
求出供试品溶液吸收度差值 ( ΔAx) 、 SMZ对照品溶液的吸收度差值
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三、实验内容
1、供试品溶液的制备（教师准备）
取本品10片，精密称定，研细，精密 称取适量(约相当于磺胺甲噁唑50mg 与甲氧苄啶 1 0 mg)，置于 1 0 0 mL量瓶 中，加乙醇适量，振摇 1 5 分 钟 使 磺 胺 甲噁唑与氧苄啶溶解，加乙醇至刻度， 摇匀，滤过，取续滤液作为供试品溶 液。
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精密量取供试品溶液与对照 品 溶 液 ( 1 ) ， ( 2 ) 各 2 mL，分别置 于 1 0 0 mL量瓶中，各加 0 . 4 ％ 氧 化钠溶液稀释至刻度，摇匀。
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取对照品溶液(2)的稀释液，以257nm
为测定波长（λ2），在304nm波长附近(每 间隔0.5nm)选择等吸收点波长为参比波长
(ΔAs) ，计算，即得。
AxCx As Cs
Cx A Ax sCs
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每片中含SMZ的毫克数
mSMZ
Cs
Ax 100W As W称1000
Cs = 0.505mg/ml
W称=0.06960g
W=552.64mg
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由于参比波长对测定影响较大， 故采用对照品溶液来确定。此波长 可因仪器不同而异，测定时应仔细 选择。
实验六 双波长分光光度法测定 复方磺胺甲噁唑片中磺胺甲恶 唑的含量
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一、实验目的 1．掌握双波长分光光度法测定原理。 2．学习双波长分光光度法在复方制 剂分析中的应用。
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复方磺胺甲噁唑片的处方为： 磺胺甲噁唑（SMZ） 400g 甲氧苄啶 （TMP） 80g 制成1000片 每片含SMZ：360~440mg(Chp 2000)
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二、对照品溶液的制备（教师准备）
精密称取在105℃干燥至恒重的磺 胺 甲 噁 唑 对 照 品 5 0 mg与甲氧苄啶对 照品 1 0 mg，分别置于 1 0 0 mL瓶中， 各加乙醇溶解并稀释至刻度，摇匀， 分别作为对照品溶液 ( 1 ) 与 对 照 品 溶 液(2)。
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三、磺胺甲噁唑的测定