( 一)
常用动物外科手术器械
（二）手术器械的消毒
手术器械常用的消毒方法有： 手术器械常用的消毒方法有 ： 煮沸灭菌法 高压蒸气灭菌法和化学药品灭菌法。 、高压蒸气灭菌法和化学药品灭菌法。 敷料、手术巾、手术衣、 （三）敷料、手术巾、手术衣、帽、口罩的消 毒.
四. 手术人员的准备 为了保证无菌手术的进行, 为了保证无菌手术的进行,手术人员应作一系 列的无菌的准备。 列的无菌的准备 。虽然实验动物有不同的微生物 控制等级， 控制等级 ，但手术人员不管做什么等级动物的手 都应该遵循无菌手术的基本原则。 术 ，都应该遵循无菌手术的基本原则 。因此手术 人员在术前应作下列准备 。 （一）手术所需人数 （二） 更衣 （三） 手、臂的清洁和消毒
(三）SPF级以上动物实验观察室环境设施 SPF级以上动物实验观察室环境设施 条件要求
SPF级以上的动物观察饲养在屏障系统或隔离系统 1.SPF级以上的动物观察饲养在屏障系统或隔离系统 中 其特点是： 其特点是 空气、饲料、 垫料和实验器具均应无菌. ①空气、饲料、水、垫料和实验器具均应无菌. 实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。 ② 实验人员要严格按隔离系统操作规程操作。 2．隔离环境观察室内的基本设备 必需设备： 必需设备：超净工作台
第二节实验动物的分组和标记
在实验前对动物进行随机分组和编号标记。 在实验前对动物进行随机分组和编号标记。
分 组 方 法 随机化分组方法 单纯随机抽样 均衡随机抽样 随机化方法 抽签法：用带数字的卡片（如纸牌）随机抽取。 抽签法：用带数字的卡片（如纸牌）随机抽取。 若分两组，可用奇偶数为代表；若分四组，可用4 若分两组，可用奇偶数为代表；若分四组，可用4 种花色为代表随机分组
动物的标记
良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用， 良好的标记方法应保证号码清楚，简便易认、耐久适用，对 动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。 动物无毒性，操作简便且长时间能够识别。 染色法： 小鼠、豚鼠常用3.5 3.5苦味酸溶液涂成黄色； 染色法：大、小鼠、豚鼠常用3.5-5％苦味酸溶液涂成黄色； 犬用2 硝酸银溶液涂成咖啡色。 兔、猫、犬用2％硝酸银溶液涂成咖啡色。 烙印法： 烙印法：大、中型动物 针刺法： 针刺法：兔 号牌法： 号牌法：犬、猴、猫等大动物 穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠 穿耳孔法（耳缘剪孔）：小鼠 ）： 断趾编号： 断趾编号：小鼠 剪尾编号： 小鼠， 剪尾编号：大、小鼠，仅限与两组动物区分 被毛剪号： 被毛剪号：大动物 笼子标号： 笼子标号：
第七章 动物实验基本技术 及方法
• 第一节 动物实验前的准备 • 第二节实验动物的分组和标记 • 第三节 实验动物的抓取与固定 • 第四节 实验动物麻醉方法
• 第五节 实验动物的给药、采血方法 实验动物的给药、
第一节 动物实验前的准备
动物实验前要进行一系列的准备工作， 动物实验前要进行一系列的准备工作，包括理论准 条件准备、预备实验。 备、条件准备、预备实验。 理论准备主要指了解动物实验的基础理论知识， 理论准备主要指了解动物实验的基础理论知识，选 题立项和设定假设、研究计划和方案的制定、 题立项和设定假设、研究计划和方案的制定、实验 方法及实验动物的选择、参考文献的查阅等。 方法及实验动物的选择、参考文献的查阅等。 条件准备指仪器设备的备置和校准、药品的配制、 条件准备指仪器设备的备置和校准、药品的配制、 器械的准备、实验动物的购入、 器械的准备、实验动物的购入、实验场所消毒与器 具配套等。 具配套等。 预备实验是正式实验的预演。 预备实验是正式实验的预演。
IVC系统的操作规程 IVC系统的操作规程
IVC系统的安装和消毒 1、 IVC系统的安装和消毒 IVC系统上的动物饲养盒必须在超 2、IVC系统上的动物饲养盒必须在超 内打开， 净工作台 内打开，无菌 操 作。 实验完毕， 3、实验完毕，动物饲养盒必须在超净 工作台内盖 好上盖 后，方能离开超净工作台，放在IVC系统 方能离开超净工作台，放在IVC系统 IVC 上。 4、检查进气孔和排气孔是否成功对接
购入动物时应注意以下几个方面的问题: 购入动物时应注意以下几个方面的问题:
1.购买动物时应向供应部门索取动物的相关资料， 1.购买动物时应向供应部门索取动物的相关资料， 购买动物时应向供应部门索取动物的相关资料 如动物的遗传背景和微生物资料（ 如动物的遗传背景和微生物资料（动物质量合格 ），以及动物品系 年龄、体重、胎次等。 以及动物品系、 证），以及动物品系、年龄、体重、胎次等。 2.购买动物时应仔细观察动物的状态 购买动物时应仔细观察动物的状态， 2.购买动物时应仔细观察动物的状态，对动物进 行外观的健康检查：皮毛是否有光泽、 行外观的健康检查：皮毛是否有光泽、眼有没有眼 四肢有无肿胀溃烂、肛门周围有无脏物等。 屎、四肢有无肿胀溃烂、肛门周围有无脏物等。同 时要核对动物的数量等是否符合实验要求。 时要核对动物的数量等是否符合实验要求。 3.根据试验观察时间长短的需要 根据试验观察时间长短的需要， 3.根据试验观察时间长短的需要，同时购入或领取 相应数量的饲料和垫料。 相应数量的饲料和垫料。
空气层流架的操作规程
• 使用前， 清洁层流架的内环境，消毒，灭 使用前， 清洁层流架的内环境，消毒， 菌。 • 进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。 进入层流架的一切物品必须经过灭菌处理。 • 打开层流架门之前，应加大层流架内的送风 打开层流架门之前， 以避免架内环境污染。 量，以避免架内环境污染。 • 实验操作时，须在超净工作台内进行。 实验操作时，须在超净工作台内进行。
ቤተ መጻሕፍቲ ባይዱ
动物设施的防护水平： 动物设施的防护水平：实验操作和安全设备汇总 危险度等级 防护水平 实验操作和安全设备 ABSL限制出入， 1级 ABSL-1 限制出入，穿戴防护服和手套 2级 ABSLABSL-2 ABSL- 的操作加：危险警告标志。 ABSL-1的操作加：危险警告标志。 可产生气溶胶的操作应使用Ⅰ级或Ⅱ 可产生气溶胶的操作应使用Ⅰ级或Ⅱ BSC。 级BSC。废物和饲养笼舍在清洗前先 清除污染。 清除污染。 ABSL- 的操作加：准入控制。 ABSL-2的操作加：准入控制。所有 操作均在BSC内进行， BSC内进行 操作均在BSC内进行，并穿着特殊防 护服。 护服。 ABSL- 的操作加：严格限制出入。 ABSL-3的操作加：严格限制出入。进 入前更衣。配备Ⅲ BSC或正压服所 入前更衣。配备Ⅲ级BSC或正压服所 有废物在清除设施前需先清除污染。 有废物在清除设施前需先清除污染。
二.实验药品、试剂的准备 实验药品、 三.实验器械的准备 实验器械准备得充分、适当， 实验器械准备得充分、适当，有助于实验的顺 利完成。 利完成。 不同类型、部位的实验使用的实验器械种类、 不同类型、部位的实验使用的实验器械种类、数 量不尽一致。 量不尽一致。 实验器械包括完成实验所需要的检测仪器、 实验器械包括完成实验所需要的检测仪器、实验 时动物的固定器械、动物外科手术器械。 时动物的固定器械、动物外科手术器械。
3级
ABSLABSL-3
4级
ABSLABSL-4
ABSL：动物生物安全水平；BSC：生物安全柜。 ：动物生物安全水平； ：生物安全柜。
动物的引进
在动物实验的各项准备工作中， 在动物实验的各项准备工作中，动物的引进是一个 重要的环节。在引进动物前，应确定引进动物的种 重要的环节。 在引进动物前， 品系、规格、数量及动物微生物控制等级等。 类、品系、规格、数量及动物微生物控制等级等。 引进动物前，应检查各项准备工作是否就绪， 引进动物前，应检查各项准备工作是否就绪，如饲 养动物的器具、器材是否准备好， 养动物的器具、器材是否准备好，饲养室的卫生和 消毒情况；此外，还应检查动物的笼卡、 消毒情况；此外，还应检查动物的笼卡、实验记录 垫料、饲料、秤等实验必须品是否准备好。 本、垫料、饲料、秤等实验必须品是否准备好。
（一）普通动物实验观察室环境设施 条件要求
1． 环境特点 ①普通环境设施符合动物饲养的基本要求，不 普通环境设施符合动物饲养的基本要求， 能完全控制传染因子；②没有进行严格的环境 能完全控制传染因子； 控制和微生物控制， 控制和微生物控制，但也应达到普通动物环境 条件的基本要求； 条件的基本要求；③普通环境室内空气与外界 直接相通； 直接相通；④适用于普通动物实验的饲养观察 2．饲养观察室内需要的基本设备
动物实验室及相关设施
动物实验设施是指以研究、试验、教学、生物制品和药 动物实验设施是指以研究、试验、教学、 品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、 品生产等为目的，进行实验动物饲养、试验的建筑物、设 备以及运营管理在内的总和，包括： 备以及运营管理在内的总和，包括：一般动物实验环境设 特殊动物实验设施、实验仪器设备。 施、特殊动物实验设施、实验仪器设备。 用于一般动物实验的环境根据对饲养动物的微生物控制程 度和空气净化程度，分为： 度和空气净化程度，分为： • 普通环境（Conventional condition）普通级动物实验 普通环境（ condition） • 屏障环境（Barrier Condition）SPF级动物实验 屏障环境（ Condition）SPF级动物实验 • 隔离环境（Isolation condition) 悉生和无菌动物实验 隔离环境（
抽卡片法随机分组
随机分组 15 抽卡数字 8 6 4 7 10 13 7 7 6 2 11 4 2 12 9 除以3 除以3的余数 2 0 1 1 1 2 1 1 0 2 2 1 2 0 0 初步分组 c a b b b c b b a c c b c a a 表中b组为6 组为4 需再调整。 表中 b 组为 6 只 ， a 组为 4 只 ， 需再调整 。 再重新抽一 卡片， 将其数字除以6 卡片 ， 将其数字除以 6 得余数为几即挑第几只放入第 三组。 三组。 随机数字表法： 随机数字表法：基本同上 动物编号 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 13 14