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动物实验基本操作技术 (2)

动物实验基本操作 技术
本章主要内容
实验动物的抓取与固定
性别鉴定
பைடு நூலகம்
常规采血方法
年龄的大致判断 给药途径与方法
妊娠检查
麻醉方法
分组与编号
处死方法
第一节 实验动物的抓取与固定
一、大、小鼠的抓取固定
小 鼠 固 定 盒 固 定
大鼠固定盒固定
二、豚鼠的抓取固定法
三、家兔的抓取固定法
第二节 性别鉴定
年龄 2个月以下 2~4个月 4~6个月 6~10个月 1岁 2岁 3岁 4~5岁 6~8岁 9~10岁 10岁以上
犬齿更换和磨损情况 仅有乳齿(白、细、尖) 更换门齿 更换犬齿(白,牙尖圆钝) 更换臼齿 牙长齐,洁白光亮。门齿有尖突 下门齿尖突部分磨乎 上、下门齿尖突大部分磨平 上、下门齿开始磨损呈微斜面,并发黄 门齿磨成齿根,犬齿发黄、磨损 唇部、胡须发白 门齿磨损,犬齿不齐全,牙根黄,唇边胡须全白
第四节 妊娠检查
雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为 了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊 娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况,采用临 床和实验室的方法进行检查,称为妊娠检查,又 称妊娠诊断(pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查, 可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种,以 保护母体和胎儿的正常发育,避免胎儿早期死亡 和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要 求准确,且及早确诊更为重要。
全身被白毛,门齿长出 眼皮张开,能跳跃,能抓取东西
能自行采食,独立生活
2. 根据体重鉴定日龄 ⑴ 小鼠日龄与体重的对应
日龄/d 初生 5 10 15 20 25 30 体重/g 1.8 4.0 6.0 11.0 15.0 21.0 21.0
⑵ 大鼠日龄与体重的对应
日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g
妊娠检查方法有
① 外部检查法 ② 摸胎法 ③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法 ⑦ 青蛙试验
第五节 分组与编号
动物实验之前,必须对实验动物进行随机分组 和编号标记,这是做好实验和实验记录的前提。
一、随机分组 (一) 当分为二组时 例:设有雄性Wistar大鼠12只,按体重大小依 次编为1,2,3,…,12号,试用完全随机的方法, 分为甲、乙两组。 分组方法:假设所产生的点是随机数字表上第 21行第31列的78,则从78开始,由上向下抄12个 随机数字,如下:
组 别: B C A B C B C C A A C A
调整组别:B
如果甲组多两个,则接下去抄两个数。分别 以8,7除之,余数即指要调入乙组的第几个甲, 余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后 各组鼠的编号为:
组别
鼠的编号
甲组 3 4 5 7 8 12
乙组 1 2 6 9 10 11
(二)当分为三组时
例:设有雄性的SD大鼠12只,按体重大小依次 编为1,2,3,…,12号,试用完全随机的方法, 分为A、B、C三组。
分组方法:假设所定的点是随机数字表第40行17 列的08,则从08开始,自左到右抄12个随机数字:
动物编号: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字:08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10
除 3 余数: 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1
动物编号: 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12
随机数字:78 38 69 57 91 0 37 45 66 82 65 41
组 别:乙 乙 甲 甲 甲 乙 甲 甲 乙 乙 甲 甲
现在以随机数字的奇数代表甲组,偶数代表乙 组,则编号为3、4、5、7、8、11、12号分入甲 组,而1、2、6、9、10号分人乙组。因两组数字 不等,继续用随机方法将甲组多余的一只调整给 乙组,从上面最后一随机数字41,接下去抄一个 数为62,以7除之(因甲组原分配7只)得6,即把原 分配在甲组的第6个甲(即11号大鼠)调入乙组。
一、大、小鼠的性别鉴定
二、兔的性别鉴定
Female
Male
第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄(大、小情况基本一样)
日龄/d 1 3 4 5 8
外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落
能翻身 能爬行
日龄/d 10
9~11 13~15 18以后
外观形态特征 能听到声音
日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g
初生 7
20
30
60
60~80 100~120 150~200 170~220 240~300
90
120
180
330~400 400~470 520~600
三、家兔
家兔的门齿和爪随年龄增长而增长,是年龄鉴 别的重要标志。青年兔门齿洁白,短小,排列整 齐;老年兔门齿暗黄,厚而长,排列不整齐,有 时破损。白色家兔趾小基本呈红色,尖端呈白色。 1岁家兔红色与白色长度相等;1岁以下,红多于 白;1岁以上,白多于红。还可根据趾爪的长度与 弯曲度来区别。青年兔趾爪较短,直平,隐在脚 毛中,随年龄的增长,趾爪露出于脚毛之外,而 且爪尖钩曲。另外,家兔皮薄而紧,眼神明亮, 行动活泼的为青年兔;皮厚而松,眼神颓废,行 动迟缓的为老年兔。
五、犬
犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、
外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天 即开始生出乳齿,2个月以后开始由门齿→犬齿→ 臼齿顺序逐渐更换为恒齿,8~l0个月齿换齐。但 犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品 种犬,可以根据记录,明确了解年龄,而收购的 杂种犬就无法知道确切年龄。实际中,可根据犬 齿更换和磨损情况,估计犬的年龄。
初生 10 20 30
40
6~7 17~25 35~50 55~90 100~150
50
60
70
80
150~210 170~240 210~270 240~320
二、豚鼠
一般老年豚鼠牙齿和趾爪长,被毛稀疏无光泽, 眼神呆滞,行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白,爪短 软,眼睛圆亮,行动敏捷,被毛有光泽,且紧贴身 体。同样,也可根据体重来推断大致年龄。同日龄 豚鼠,雌性体重略高于雄性。与大鼠一样,其体重 受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时, 必须由卡片记录提供准确年龄。
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