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氧电极：是一个通过测定电解电流来测定溶液中氧含量的电解池。
工作时，在铂阴极和Ag阳极之间施加0.6V的 电压。当E=-0.2V时电极开始电解，产生还原 电流，其还原反应式为：
O2 2H2O 4e 4OH
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使用最多的是封闭式的Clark氧电极
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自然界中的胆固醇主要存在于动物性食物之中，植物中没有胆固醇。 兽肉的胆固醇含量高于禽肉，肥肉高于瘦肉，贝壳类和软体类高于一般鱼类，蛋黄、鱼 子、动物内脏的胆固醇含量非常高。
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降低胆固醇的食物： § 含膳食纤维丰富的食物 § VC 与 VE § 饮酒可能使血中的高密度脂蛋白升高，加强防治高胆固醇血症的作用。葡萄酒较合适，
透气膜上固定葡萄糖氧化酶。
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当葡萄糖溶液与酶膜接触时，发生如下反应：
C6H12O6 2H2O O2 葡萄糖氧化酶C6H12O7 2H2O2
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C6H12O6 2H2O O2 葡萄糖氧化酶C6H12O7 2H2O2
故葡萄糖浓度测试方法有三种： 生成的葡萄糖酸 消耗的氧 生成的H影响
凡能降低酶的活性甚至使酶完全失活的物质称为抑制剂，抑制剂的种类很多，包 括药物、抗生素、毒物、抗代谢物以及酶促反应产物等。
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凡能激活酶活性的物质，均称激活剂。某些酶必须有激活剂存在，才能进行酶促反 应。激活剂大部分为某些无机离子，也有一些有机分子。
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⑶温度对酶促反应速度的影响 每一种酶的催化反应都有适宜的温度范围和最适温度。
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⑷pH对酶促反应速度的影响
每一种酶都有适宜的pH值范围和最适pH值。在一定的pH下，酶促反应具有最 高的反应速度，此pH称为该酶的最适pH。
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● 酶的高度特异性
酶不仅具有一般催化剂加快反应速度的作用，而且具有高度的特异性。 绝对特异性 相对特异性 立体异构特异性
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㈢酶促反应动力学
酶促反应动力学是研究酶反应速度及各种因素对酶反应速度影响的科学。 主要影响因素包括有：底物浓度、酶浓度、 pH值、温度、抑制剂与激活剂等。
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可用氨气敏电极、二氧化碳电极等作为基 础电极测定尿素的含量。
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（2）草酸电极
生物体内草酸的来源：
草酸（乙二酸）结构式 2020/12/8
♫ 维生素C代谢 ♫ 甘氨酸代谢 ♫ 草酰乙酸水解 ♫ 异柠檬酸降解 ♫ 食物摄入：菠菜、茶叶
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草酸
草酸脱羧酶
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(2)乳酸电极 血液中乳酸的浓度是反映人体体力消耗程度的重要指标。在体育运动训练中乳酸
的检验是极为必要，国际上乳酸传感器已经有成熟的商品仪器。
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还可采用介体修饰的方法制备乳酸传感器。 在电极上滴介体四硫富瓦烯(TTF) 浆液，晾干后，将乳酸氧化酶固定在该电极表面修饰层上面，即构成乳酸传感器。
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(4）肌酸和肌酸酐电极
脱水
肌酸 2020/12/8
肌酸酐 49
血清肌酸肝含量测定是衡量肾功能的一个很好的基准。 血清肌酸酐浓度不会因食物的种类而受影响，所以做为判断肾脏机能的依据较血清尿 素可靠。 血清肌酸酐浓度与肌肉的量有关，因此肌肉多的排放的尿肌酸酐浓度会比肌肉少的多。
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肌酸酐 H2O 肌酸酐水解酶 肌酸 肌酸 H2O 脒基肌酸水解酶 肌氨酸 脲 肌氨酸 H2O O2 肌氨酸氧化酶甘氨酸+HCHO H2O2
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肌酸和肌酸酐微传感器
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（5）磷酸盐电极 2020/12/8
佝偻病 软骨病
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葡萄糖-6-磷酸盐 葡萄糖 + O2
阴极反应
H2O2 O2 2H 2e
2e
2H
1 2
O2
H
2O
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1.葡萄糖传感器 葡萄糖传感器是研究最早、开发最成熟并已市场化的生物传感器，即血糖仪。
各种型号的血糖仪产品
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（1）早期的葡萄糖传感器 早期的葡萄糖传感器是由葡萄糖氧化酶膜和电化学电极组成的。在电化学电极的
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（2）改进的葡萄糖传感器
为消除环境中氧对测定的干扰，用四硫富瓦烯、二茂铁等容易在电极上氧化 还原的介体来代替氧的电子传递作用。电子介体是酶氧化还原活性中心与电极表面 之间的电子传递中介物，在电流型酶电极中起着关键性作用。
各种电子传递介体的使用，使得电流型酶传感器的响应速度、检测灵敏度和选 择性都得到了很大的提高。
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酶动力学测定的是初速度，是指酶在反应过程中底物初始浓度被消耗在5% 以内的速度。目的是排除酶反应过程中出现的各种干扰因素，以便测得准确的 酶反应速度。
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⑴底物浓度对酶促反应速度的影响
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⑵酶浓度对酶促反应速度的影响 若底物初始浓度固定时，酶反应速度与酶浓度呈线性关系。
但必须严格限制摄入量。
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胆固醇电极是一种用于临床测定血清胆固醇含量的电流型酶传感器。
胆固醇 H2O 胆固醇脂酶游离胆固醇 RCOOH 游离胆固醇 O2 胆固醇氧化酶胆甾烯酮 H2O2
结合型酶电极
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根据反应过程中消耗的氧，产生的过氧化氢，用相应的电极组成胆固醇传感器测 定电流的变化量，在一定条件下，电流变化量与胆固醇浓度呈线性相关。
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酒后驾驶
饮酒驾车：指驾驶员血液中的酒精含量大于或等于20 mg/100 mL小于80 mg/100 mL的驾驶行 为。
350 mL(约相称于1小瓶)啤酒或半两白酒(20 mL)
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醉酒驾车：指驾驶员血液中的酒精含量大于或等于80 mg/100 mL的驾驶行为。 1400 mL(约相称于3瓶500 mL)啤酒或一两半白酒(80mL)
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电位型酶电极所用的基础电极是对 某种离子有选择性或对气体有选择性的电极
离子选择性电极 2020/12/8
气敏电极 61
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⑴尿素电极
1773年，伊莱尔·罗埃尔（Hilaire Rouelle）发现 尿素。
1828年，德国化学家弗里德里希·维勒首次使用无 机物质氰酸氨（由氯化铵和氯酸银反应制得）与硫酸 铵人工合成了尿素。
流作为测量信号，在一定条件下，利用测得的电流信号与被测物活度或浓度的函数 关系，来测定样品中某一生物组分的活度或浓度。
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制作生物传感器最常用的是氧化酶：
底物+O2
产物+H2O2
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基础电极可采用氧、过氧化氢电极，还可采用近年开发的介体修饰的炭、铂、钯和 金等固体电极或介体修饰电极。
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二、酶传感器
酶传感器是应用固定化酶作为敏感元件与各种信号转换器组合而成的 生物传感器。
依据信号转换器的类型，酶传感器大致可分为酶电极、酶场效应管传感器、酶 热敏电阻传感器、酶压电晶体型、光纤光学型等。
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传感器的类型
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4.1 酶电极传感器 Enzyme electrode sensor
酸性磷酸酯酶 葡萄糖氧化酶
葡萄糖 + 磷酸 葡萄糖酸 + H2O2
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（6）淀粉电极 淀粉
淀粉酶
葡萄糖 + O2
葡萄糖氧化酶
葡萄糖 葡萄糖酸 + H2O2
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（7）乙醇电极 CH3CH2OH
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♫ 可用乙醇来制造醋酸、饮料、香精、染料、 燃料等。 ♫ 医疗上也常用体积分数为70-75%的乙醇作 消毒剂等。
GOD
GOX
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介体传感器的特点： • 仅用较低的电压就能使介体氧化。 • 传感器对氧不敏感，能在缺氧和氧浓度 变化的条件下使用。 • 二茂铁离子与还原GOD之间的电子传递 快，电极响应迅速。
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采用场效应晶体管和微电极做换能器，以缩小传感器的体积； 利用电子技术、改善信号放大和显示方法，使其易于商品化； 改善采样方法，使患者使用方便或更易于临床应用。 最重要的改进是使用化学电子传递中间介体代替作为自然电子受体的氧，使酶催化反 应不再受到溶解氧含量的制约。
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方法：将葡萄糖氧化酶和电子介体同时包埋于聚合物膜中，或直接修饰于电极的表面构 成葡萄糖酶传感器。
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G O X 在葡萄糖氧化酶（ ）的催化下，葡萄糖被氧化为葡萄糖酸，再由二茂铁离
子将还原型葡萄糖氧化酶（ ）氧化为氧化型葡萄糖氧化酶（ ），然后二茂 铁在电极上氧化成二茂铁离子，通过二茂铁在电极上产生的氧化电流来实现葡萄糖 含量的检测。
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C2H5OH + NAD+ NADH + [Fe(CN)6]4-
醇脱氢酶