当前位置:
文档之家› 显微镜的结构及使用方法、动物细胞形态结构的观察
显微镜的结构及使用方法、动物细胞形态结构的观察
目镜(5×、6 × 、8 × 、10 × 、12 × 、15 × ) 物镜侧面符号的含义
10/0.30 表示放大10倍,数值口径为0.30 40/0.65 表示放大40倍,数值口径为0.65 100/1.25 oil 表示放大100倍,数值口径为1.25,为油镜 160/0.17 表示镜筒长度和所需盖玻片的厚度(mm) WD 表示工作距离
光学显微镜成像原理
光学显微镜是利用目镜和物
观察点
镜两组透镜系统来放大成像的。 A″B″和眼睛的距离为显微镜的明 视距离,标本AB的向经过物镜 (L1)后到A′B′处称谓一个放大
目镜L2
倒立的实像,F1为L1的后焦点, 当光线传到目镜(L2)时,在
中间所成的实像A′B′
A″B″处A′B′被放大成一个直立的
医学细胞生物学实验
林 刚
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
第一次实验内容
实验一 显微镜的结构及使用方法 实验二 动物细胞形态结构观察
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
实验一 显微镜的结构及使用方法 普通光学显微镜结构
• 机械部分 • 光学部分
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
机械部分主要结构
度增强,提高分辨率,使物象明亮清晰。
在油镜观察结束后,切记将镜头和其他沾有油污的部件清擦净。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜的维护
一 、必须熟练掌握并严格执行使用规程。
二、取送显微镜时一定要一手握住弯臂,另一手托住底座。显微镜不能
倾斜,以免目镜从镜筒上端滑出。取送显微镜时要轻拿轻放。 三、观察时,不能随便移动显微镜的位置。
虚像,然后传递到视网膜上,标 本AB就被放大了。人眼看到的是 AB被放大后的虚像,其与原样品 的方向相反。
物镜 L1 观察的物体A B 放大的虚像A″B″
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜成像原理
数值孔径(NA,镜口率):是指光线经过盖玻片引起 折射后成光锥底面的口径数值。即光线投射到物镜 上的最大开口角度一半的正弦乘上标本与物镜间介 质的折射率的乘积。 NA=n•sinα/2 n为介质的折射率, α为镜口角。 分辨率:能分辨被检物体细微结构最小间隔的能力。 D=0.61λ/NA λ为波长。数值孔径越高,分辨率越高。 放大率:最终成像大小与原物体大小的比值。 总放大倍数=物镜的放大倍数×目镜的放大倍数 物镜的镜口角=AOB
是适用范围非常广泛的常规显镜。不
仅可作生物解,作观察分析,由于本 显微镜具有较高的分辨率及大视场范 围的清晰,因此还可作电子工业和精 密机械工业零件装配和检验,农业上 的种子检查等。
MODEL-Z45E体视显微镜
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
其它光学显微镜
荧光显微镜是荧光显微术的基本装 置。荧光显微术是利用一定波长的光 (通常是波长短的紫外光和蓝紫光)照 射被检样品,激发荧光物质发出可见的 荧光。通过物镜和目镜的成像、放大,
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
其它光学显微镜
倒置显微镜(invertcd m1Lfoscope) 是普通光学显微镜的一个类型,倒置显微镜有 几个特点不同于普通生物显微镜。 1) 透射光倒置显微镜的光源和聚光器位于载物 台的上方,照明光源自上方向下照射; 2) 物镜安装在载物台的下方,向上对焦;
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
鸡血细胞
鸡血细胞低倍镜下观察
鸡血细胞油镜下观察 鸡血细胞高倍镜下观察
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
动物神经细胞脊髓涂片
先用低倍镜观察,再用
高倍镜和油镜观察脊髓涂
片中的神经元(即神经细 胞),可找到染色深且具
有多个突起的脊髓前角运
动神经元。在其胞体内有 染色较浅的圆形的细胞核,
3) 物镜、聚光镜以及其他光学具组均适用于长 焦距观察;
4) 在医学、生物学领域中适合于观察培养瓶中 贴壁生长的细胞或浮游于培养液中的细胞。
XDS倒置生物显微镜
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
其它光学显微镜
体视显微镜又称实体显微镜。它 在观察物体时能产生正立的三维空间 影像。立体感强,成像清晰和宽阔, 又具有长工作距离,并可根据观察物 的特点选用不同的反射和透射光照明,
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
不同物镜的数值孔径与工作距离(10倍目镜)
物镜放大倍数 (×) 4 10 40
总放大倍数(×) 40 100 400
数值口径 0.10 0.25 0.65
工作距离(mm) 25 5.6 0.6
100
1000
1.25
0.14
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
• 镜座、镜柱 • 粗调节螺旋和细调节螺旋 • 载物台、推进器和玻片夹
• 物镜转换器
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学部分主要构件
光学部分包括照明系统和成像系统
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学部分主要构件
物镜
低倍镜(1 × ~6 × ,常用的4 × 、10 × ) 高倍镜(25 × ~63 × ,常用的40 × ) 油 镜(90 × 、95 × 、100 × )
光器的高度,把孔径光阑调至最大,使光线通过聚光器入射到镜筒内,
这时视野内呈明亮的状态。 四、将所要观察的玻片放在载物台上,使玻片中被观察的部分中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜的使用规程
五、先用低倍镜观察(物镜4X、10X、目镜10x)。观察之前,先转动粗动
调焦手轮,使载物台上升,物镜逐渐接近玻片。需要注意,不能使物镜
触及玻片,以防镜头将玻片压碎。然后,左眼注视目镜内,同时右眼不 要闭合(要养成睁开双眼用显微镜进行观察的习惯,以便在观察的同时 能用右眼看着绘图),并转动粗动调焦手轮,使载物台慢慢下降,不久 即可看到玻片中材料的放大物像。 六、如果在视野内看到的物像不符合实验要求(物像偏离视野),可慢慢 调节载物台移动手柄。调节时应注意玻片移动的方向与视野中看到的物 像移动的方向正好相反。如果物像不甚清晰,可以调节微动调焦手轮, 直至物像清晰为止。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
显微镜的使用练习
1. 羊毛交叉标本 2. 字玻片
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
实验二 动物细胞形态结构观察
鸡血细胞
动物神经细胞
动物平滑肌细胞 华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
鸡血细胞
重点在高倍镜下和油镜下观察红细胞、嗜中性白细胞和血栓细胞(血小 板)的形态结构特点。 红细胞——为卵圆形细胞,有胞核,呈椭圆形,内有染色质块,胞质染 成淡红色。 嗜中性白细胞——由于颗粒具有多种嗜色性,故又称为异嗜性粒细胞, 细胞较大,胞质内含棒状或纺锤形的红色颗粒。胞质色淡,胞核分叶情况因 成熟程度而有不同,有的不分叶,有的分叶,染成淡紫色。 血栓细胞——是鸡血液内最小的细胞,成纺锤形。两端钝圆,常集聚成 群,胞质染成浅蓝色,核呈卵圆形。注意血栓细胞与红细胞的区别,主要是 体积较小,核较大,染成玫瑰紫色。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
油镜的使用
100×物镜是油浸物镜。使用前必需在镜头与盖玻片间加浸油。 油镜的透镜很小,光线通过玻片与油镜头之间的空气时,因介质 密度不同,发生折射或全反射,使射入透镜的光线减少,物象显现不 清。若在油镜与载玻片之间加入和玻璃折射率(n=1.52)相近的香柏 油(n=1.515),则可减少光线折射,使进入透镜的光线增多,视野亮
平滑肌与组织块
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
细胞生物学实验绘图方法与要求
一、在仔细观察的基础上,选择典型结 构进行描绘,要求真实、准确(注意 各部结构的比例关系)。
核的中央有一个染成深色
的核仁。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
动物平滑肌细胞分离片
先用低倍镜再用高倍镜
和油镜下观察平滑肌分离片, 可见染成紫红色呈纺锤形的
肌细胞,细胞核为椭圆形,
位于细胞的中央,着色很深, 在细胞质中有淡红的肌原纤
维。略旋动细调焦螺旋,仔
细观察。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
相差显微镜
相差显微镜是一种将光线通过透明标本细节时所产生的 光程差(即相位差)转化为光强差的特种显微镜。 相差显微镜与普通光学显微镜的基本结构是相同的,所不同
的是它具有四部分特殊结构:即环状光阑、相板、合轴调节望
远镜及绿色滤光片。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
多媒体互动教学系统的使用
学生端的功能 学生端主要具备菜单显示、电子举手、作业提交、学 生交流、屏幕录制、屏幕回放、图象采集、系统设置八大 功能。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
多媒体互动教学系统的使用
四、学生交流 学生交流功能用于学生之间的交流。点击“学生交流”会出现一 个下拉窗口,窗口中列出了其他所有学生端的IP地址,选择想要观摩 的学生端的IP地址后点击“确定”,此时被请求方会收到一个观摩请 求的窗口,窗口中显示请求方的 IP地址及窗口关闭倒计时秒数,被 请求方同意后即可观看到其屏幕画面了。 五、图象采集 在显微镜下找到最佳影像后,点击“图象采集”即可以启动此学 生端的采集程序,从而可以采集图象。
华中科技大学生命科学与技术教学实验中心
光学显微镜的使用规程
七、如果进一步使用高倍物镜观察,应在转换高倍物镜之前,把物像中 需要放大观察的部分移至视野中央(将低倍物镜转换成高倍物镜观察 时,视野中的物像范围缩小了很多)。 八、在转换高倍物镜并且看清物像之后,可以根据需要调节孔径光阑的 大小或聚光器的高低,使光线符合要求(一般将低倍物镜换成高倍物 镜观察时,视野要稍变暗一些,所以需要调节光线强弱)。 九、观察完毕,应先将物镜镜头从通光孔处移开,然后将孔径光阑调至 最大,再将载物台缓缓落下,并检查零件有无损伤(特别要注意检查 物镜是否沾水沾油,如沾了水或油要用镜头纸擦净),检查处理完毕 后即可装箱。