实用帖血液样本的采集与保存
在脊椎动物中，外周血一直被认为是侵害性较小、富有价值的检测样本。
在许多生物样
本库中，由于血液样本的常规收集、处理及保存方法简便、成本低且富含可利用成分和生物分子，因此是进行多种项目分析的理想实验材料。
然鹅，科研僧们历经千辛万苦最后发现获
得的血液样本RNA降解了。
额，这就很惆怅了。
所以呢，在样本采集、处理及储存过程中必须格外注意，从根本上确保获得高质量的
RNA
今天小编和大家一起来聊一聊在进行RNA实验时血液样本如何进行收集与保存。
血液的组成
首先来熟悉一下血液的组成。
人类的血液由血浆和血细胞组成。
其中血浆约占血液的55%是水，糖，脂肪，蛋白质,
钾盐和钙盐等的混合物。
血细胞约占血液的45%主要分为红细胞、白细胞和血小板。
而哺
乳动物成熟的红细胞和血小板是无核的。
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血浆和血清
血浆是离开血管的全血经抗凝处理后，通过离心沉淀，所获得的不含细胞成分的液体, 其中含有纤维蛋白原，不含游离的
Ca 2+
，若向血浆中加入
，血浆会发生再凝固。
血清是离体的血液凝固之后，
经血凝块聚缩释出的液体， 其中已无纤维蛋白原,
游离的Ca 2+
，血清中少了很多的凝血因子但多了很多的凝血产物。
不加卿赛
mm
BW.
血囲
其他有形咸分
但含有
血浆
有形成分
采血管的选择
采血管，大家都不陌生，去医院抽个血，一定会用到采血管，那么问题来鸟，这么多颜 色的采血管，有什么区别呢？下面小编来给大家介绍一下采血管的分类及不同颜色试管帽代 表的含义。
1. 蓝色头盖管（含有柠檬酸钠抗凝剂的采血管）
2. 黑色头盖管（含有0.109mol/L 柠檬酸钠）
3. 紫色头盖管（含有乙二胺四乙酸以及其盐的采血管
）
4. 绿色头盖管（肝素抗凝管）
5. 灰色头盖管（含有草酸钾/氟化钠）
6. 橘红色头盖管（促凝管）
7. 金黄色头盖管（含有惰性分离胶及促凝剂的采血管） 8.红色头盖管（无添加剂的干燥真空管）
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抗凝剂有很多种，原理包括螯合钙、抑制蛋白酶和抑制血小板活化等。
虽然有这么多抗凝剂可供选择，但不建议使用肝素抗凝剂，因为肝素会同引物和酶竞争性结合核酸，影响后续的实验结果。
所以对于血清样本，采血管推荐使用黄盖采血管（促凝管或促凝管带分离胶）■ 血浆样本，采血管推荐使用紫盖采血管（EDTA-K2或EDTA-K3）。
血液总RNA的提取
目前对血液总RNA的提取，前期处理主要分为红细胞裂解法及淋巴细胞分离法。
两种方
法各有优缺点。
由于红细胞裂解法操作简单，能获得几乎所有白细胞的RNA因此这种方法被广泛使用。
对于血液RNA的抽提，除了采用传统Trizol进行抽提之外，市面上也涌现出各式各样的试剂盒，如何在众多的试剂盒中挑选出最适合自己的一款，也需要考验眼力哦！
今天小编给大家推荐一款比较好用的血液RNA提取试剂---TRIzol? LS Reage nt，比
TRIzol还要好用哦！！！（并不是托，亲测，好用。
）
TRIzolS1 LS Reagent是苯酚和异硫亂酸弧的即用型
单和溶液.设计用于从人坷动物.植物.酵母、细菌和搞毒
来源的液体样品中分离总RNA- 在样品匀浆或裂解过程
中.HGzolE LS Regent —方面保持RNA的完整性•另一方
面破坏细想井裂解细胞组分。
TRIzolLS试剂成分较
「RIzolift度更高，对于液体样本.TRIzolLS试剂抽提效
果优于TRkol试剂，是TRIzol的升级版*
如何进行取样？
全血样本取样方法
全血样本
为尽可能缩短取样时间，保证RNA质量，建议使用抗凝采血管（不建议使用肝素抗凝管）采集全血。
采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，使抗凝剂与血液混匀。
将采集好的全血快速
转移至单独的冻存管或离心管，按照每250ul/管分装，加750ul（即三倍体积）的Trizol LS,
混匀。
液氮速冻后，放-80 ° C冰箱保存。
长期保存，可放入液氮。
每个环节尽可能的快速完成，避免RNA 的降解。
每个环节尽可能的快速完成，避免RNA的降解。
还需要小伙伴们注意的是，保存全血所使用的冻存管或离心管，操作中使用的枪头盒离
心管等均需要RNase-free哒，装好样品后管口需要以封口膜封好，防止污染，分装好的样本做好标记，避免混淆。
血清样本取样方法
血清样本
采用快速分离法
建议使用橘黄色促凝采血管（可在5min内使采集的血液凝固，适用于急诊血清系列生
化试验）采集全血，采血后轻轻倒转采血管混合4~5次，使促凝剂与血液混匀。
直立置于4 C
待血液完全凝固，1000g离心10分钟，分离血清。
将采集的血清转移至单独的冻存管或离心管，按照每250卩1/管分装。
液氮速冻后，放-80 C冰箱保存。
长期保存，可放入液氮。
黄盖采血管（促凝管或促凝管带分离胶）。