当前位置:
文档之家› 3.光学显微镜分类及观察方法
3.光学显微镜分类及观察方法
毛发、细菌,以及尿检 非生物样品:矿石、化学晶体、胶
体颗粒等
• 散射效应 • 暗背景,样品闪亮 • 分辨率降低,但优异的外部形态 • 如:细菌(密螺旋体),银增强等
集成调制反差 IMC –Integrated Modulation Contrast
三维立体图像 斜照明 狭缝照明 不需要特殊物镜 可用于塑料培养皿
用于体内标记的y (Sigma Aldrich) Alexa Fluor (Invitrogen) BODIPY (Invitrogen) Cy-dyes FluoProbes (Interchim) DyLight Fluor (Thermo Scientific, Pierce) DY and MegaStokes Dyes (Dyomics) MitoTracker Sulfo Cy dyes (CYANDYE, LLC)
– 明场 – 暗场 – IMC – 荧光
明场(Bright Field)
染色(明场观察) • 通过对样品染色给予反差 • 如:H&E染色, Gram染色等
暗场(Dark Field)
实际是暗场照明法。不直接观察到照明的光线,而观察到的是被 物体反射或散射的光线。
适用范围: 生物样品:微小水生生物、纤维、
显微镜观察方法
目录
• 光学显微镜分类 • 显微镜的观察方法
光学显微镜分类
• 宽场显微镜有正置和倒置显微 镜(这两者也合称复合式- Compound microscopes), 以及体视显微镜。
• 共聚焦(激光扫描)显微镜两 大类
正置显微镜 倒置显微镜 体视显微镜
复合式显微镜观察方法(反差增强方法)
通过聚光镜狭缝斜照明产生的立体 浮雕效果可以配合明场物镜使用
通过调节 IMC 模块可以优化 IMC 的观察效果
荧光(Fluorescence)
荧光发光原理
FITC
FITC / Rhod
Rhod
merged
Bovine endothelial cells
荧光样品染色标记类型
• 荧光染料的免疫细胞化学法 • 荧光探针 • 荧光蛋白基因转染
Emission spectra for the Alexa Fluor dye series (life technology)
Page 14