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第三节 基因及基因表达的定量及定性分析


原理:
核酸分子杂交的碱基互补配对
用途:
鉴定DNA片段
步骤:
DNA分离→DNA变性→转膜→ 杂交→洗
膜→放射自显影
关键技术: 核酸探针标记和DNA的转移。
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是一种利用非放射性的荧光信号对原位 杂交样本进行检测的技术
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二、RNA的定性与定量
第三节 基因及基因表达的定量及定性分析 一、DNA的定性和定量分析 二、RNA的定性和定量分析
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一、DNA的定性和定量分析
1. Southern印迹(Southern blot) 2. 基因组PCR反应 3. 荧光原位杂交
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1.Southern印迹(Southern blot),DNA印迹
用途
mRNA定量
mRNA末端定位
mRNA剪切部位
内含子位置的确定
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类别
用途
基因组芯片 表达芯片(cDNA芯片) 测序芯片
表达芯片↘ 定量分析 RNA
测序芯片↗
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基因芯片使用流程
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1.Northern印迹 2.RT-PCR 3.实时PCR 4.RNA酶保护试验 5.芯片技术
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1.Northern印迹, RNA印迹
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实时PCR的基本原理
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10Leabharlann 原理利用RNase A和RNase T1能专一性降解单链 RNA而双链RNA受到保护的特性,分析受到保护的 RNA片段的大小,估计待检测mRNA的情况
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