血浆蛋白的测定及临床意义
一、血浆蛋白质测定方法的进展：
（一）、比色法：例如总蛋白的测定方法：双缩脲反应法；白蛋白的测定方法：溴甲酚绿法。

（二）、电泳法：是进一步分离蛋白质的方法。

（三）、免疫测定法：是利用抗原抗体反应检测标本中微量物质的分析方法。

特点：（1）特异性好：即某一抗原只与其相应的抗体起反应。

（2）敏感性高，可检测出纳克（ng）水平的的量。

免疫测定法包括：
1、免疫扩散法：敏感度在ug/ml，因此只能用于检测含量较高的蛋白质。

且操作
繁琐、时间长，需18-48小时。

2、免疫电泳法：是区带电泳与免疫扩散相结合的方法。

一般不能定量，仅用于检
测异常蛋白成分。

3、免疫浊度法：基本原理是：当可溶性抗原与相应抗体特异结合，在二者比例合
适，并有一定浓度的电解质存在时，可以形成不溶性的免疫复合物，即沉淀反
应。

二、免疫浊度法的原理：
免疫浊度法可分为透射免疫比浊法和散射免疫比浊法。

1、透射免疫比浊法：当一定波长的光线通过抗原抗体反应混合液时，被形成的免
疫复合物反射、遮挡或吸收而减弱。

在一定范围内，吸光度（A）与IC量呈正
相关。

因此当抗体量固定时，根据吸光度可计算出抗原量。

要求形成的IC达到
一定的数量，而且分子颗粒较大，否则难以精确测定，因此检测灵敏度相对较
低。

2、散射免疫比浊法：光线通过检测溶液时，被反应形成的抗原抗体复合物折射而
部分偏转，产生散射光，散射光强度（I）与样本的IC量、散射夹角（θ）成
正比，而与入射光波长成反比。

散射免疫比浊法又可分为终点散射比浊法和速率散射免疫比浊法
（1）终点散射免疫比浊法：当反应达到平衡时进行检测，通常需10-30min，且灵敏度较低。

（2）速率散射免疫比浊法：由于抗原与抗体结合形成免疫复合物的速度在单
位时间内时不同的，当反应开始时，进行动力学测定可以发现在某一时
间反应速度最快，IC形成最多，散射光强度相应最大，即所谓速率峰（最
大反应速率Vmax），Vmax与待测抗原量呈正相关而获得测定。

主要优点：快速、灵敏、精密度高、检测范围广。

三、免疫比浊分析的影响因素：
1．抗原抗体的比例：抗原抗体的比例是浊度形成的关键因素。

免疫比浊法的基本条件是在保持抗体过剩的情况下测定加入的抗原。

但抗体过剩又必须适量。

一般原
则是先确定某一被测物的正常值，以±50%作为检测范围，抗体在此范围内应保
持过剩。

2．抗体的质量：要求抗体有很强的特异性，有较高的效价，以及有高的亲和力。

一般采用R型抗体。

3．反应溶液：一般采用PH在7.0左右的磷酸盐缓冲液。

4．增浊剂的作用：一般使用浓度为3%-4%的PEG6000
四、Array特定蛋白分析仪的简介：
1．原理：采用速率散射比浊法。

2．测定速度：40-80结果/小时，每次可检测40个标本。

3．特点：具有抗原过剩识别功能。

在抗体量一定的情况下，免疫复合物生成量随着抗原量的增加而增多，但抗原量
超过一定域值后，免疫复合物的量却随之减少，影响检测的准确性。

Array360具
有的抗原过剩识别功能的工作原理是：在检测到抗原抗体反应速率峰之后，在反
应溶液中加入能与过剩抗体反应的微量的Ag，若反应溶液中有过剩抗体存在，
则与加入的Ag反应，形成一个过剩抗体峰；若反应溶液中无过剩抗体存在，不
能检测到过剩抗体峰的存在。

当一个反应，有速率峰和过剩抗体峰同时存在时，
仪器将确认第一次出现的速率峰有效，并将结果打印出来；而没有过剩抗体峰存
在的反应，仪器将重新对标本进行更高稀释度的稀释，然后再测定结果。

五、几种血浆蛋白质的正常值及临床意义：
（一）、防卫蛋白：
1、免疫球蛋白（Ig）：包括IgG、IgA、IgM IgA
临床意义：（1）低Ig血症：分先天性和获得性，获得性低Ig血症见于大量蛋白质流失的疾病，如肾病综合症、淋巴网状系统肿瘤等；（2）高Ig血症：见于感染，自身免疫病、肝脏疾病及M蛋白血症等、慢性活动性肝炎IgG和IgM升高明显。

SLE以IgG、IgA或IgM升高较多见，类风湿性关节炎则以IgM增高为主。

正常参考值：IgG：6.94-16.18g/L
IgA：0.6-2.63g/L IgA
IgM：0.68-3.78g/L
2、补体：包括C
3、C4
补体系统是人体抵抗感染甚至肿瘤的多种天然防御机制之一，定量检测各种补体成分有助于诊断免疫功能紊乱
临床意义：①补体升高：一般见于各种传染病、组织损伤、急性炎症及肿瘤患者；②补体降低：多见于自身免疫性疾病、SLE、慢性肝病、肾小球肾炎等。

参考值：C3 0.88-2.01g/L
C4 0.16-0.47g/L
3、κ和λ轻链（KAP和LAM）
用于诊断单克隆γ-球蛋白病，主要见于多发性骨髓瘤，除IgG、IgA升高外，可伴有KAP 和LAM的过度分泌。

参考值：KAP 5.74-12.8 g/L
LAM 2.69-6.38 g/L
（二）、急性时相蛋白：是指一组蛋白，它们的浓度在由外科手术、高温、肿瘤、感染或其它原因引起的炎症过程中明显升高。

1、C反应蛋白（CRP）：
CRP是最敏感的急性时相蛋白之一，在炎症及组织损伤发生6小时内，即升高，恢复时CRP下降。

还可用于手术后、继发性感染的监测；鉴别细菌与非细菌感染等。

参考值：CRP 0.08-0.8mg/dl
2、结合珠蛋白（HP）：
又称为触珠蛋白。

其主要功能是与血浆中游离的Hb形成复合物，转运至肝脏代谢，使得
氨基酸和铁被机体再利用。

临床意义：①对溶血的诊断：血管内溶血时，由于HP与血红蛋白结合，其含量明显下降；
②是反映肝功状态的敏感指标；③是一种急性时相蛋白，炎症时增高。

参考值：0.5-2.2 g/L
4、铜兰蛋白（CER）
其含量占血浆总铜量的50%，抑制炎症时脂氧及自由基形成。

主要用于肝豆状核变性的诊断，肝豆状核变性时CER降低。

对10岁以内儿童是一个良好的炎症指标。

参考值：21-53mg/dl
5、α1-酸性糖蛋白（AAG）
在肝脏合成，也由白细胞合成。

临床意义：（1）感染、风湿、创伤、恶性肿瘤时AAG升高；（2）慢性肝炎、肝硬化等时降低。

参考值：0.47-1.25g/L
6、α1-抗胰蛋白酶（AAT）
AAT为白血球吞噬异物时所释放的一种可中和溶酶体弹性蛋白酶的蛋白，是血清中主要的蛋白酶抑制剂，占血清中抑制胰蛋白酶活力的91%
临床意义：①炎症、组织损伤时AAT增高；②慢性阻塞性肿瘤及严重肝病时AAT降低。

参考值：0.83-1.99g/L
（三）其它
1、前白蛋白（PAB）
PAB由肝脏合成的糖蛋白，由于PAB在电泳时迁移于白蛋白之前，故称之为前白蛋白。

PAB的半衰期很短，只有2天。

临床意义：（1）肝病的诊断：PAB在肝脏合成，半衰期很短，因此可作为早期肝功能损伤的特异性指标。

（2）可用于营养不良的诊断和监测。

（3）急性时相反应诊断：是一种负急性时相蛋白，炎症等急性时相反应时PAB可迅速降低。

如果PAB持续保持低水平或进一步降低，提示预后不良。

参考值：250-400mg/L
2、转铁蛋白（TRF）：
由肝脏合成，半衰期8天。

其主要功能为结合并转运铁。

多数急慢性感染时及严重肝病时血TRF降低，缺铁性贫血时，TRF升高。

参考值：2.12-3.6g/L
3、抗链球菌溶血素“O”（ASO）
用于证实链球菌感染。

大约80%的急性风湿热及70-75%急性肾小球肾炎患者ASO水平升高。

参考值：0—200 IU/ml
4、类风湿因子（RF）：
RA患者血中RF大幅升高，而亚急性细菌性心内膜炎、梅毒、结核、肝炎等疾病时，血中RF也可轻度升高。

参考值：0--30 IU/ml。