仪器第一章概论1.临床检验仪器常用性能指标(可能考问答题)(l)灵敏度 (2)误差 (3)噪声 (4)最小检测量(5)精确度 (6)可靠性 (7)重复性 (8)分辨率(9)测量范围和示值范围 (10)线性范围 (II)响应时间(12)频率影响范围第二章离心机1.离心技术:利用离心沉降进行物质的分析和分离的技术2.离心机的工作原理:离心是利用旋转运动的离心力以及物质的沉降系数或悬浮密度的差异进行分离、浓缩和提纯生物样品的一种方法。
由于巨大的离心作用,使悬浮的微小颗粒以一定的速度沉降,从而使溶液得以分离,颗粒的沉降速度取决于离心机的转速、颗粒的质量、大小和密度。
3.离心机的分类:按转速分:低速、高速、超速离心机。
按用途分:分析型和制备分析两用型按结构:台式、多管微量式、细胞涂片式等4.最大容量:离心机一次可分离样品的最大体积,表示为 m×n m为一次可容纳的最多离心管数,n 为一个离心管可容纳分离样品的最大体积,单位是ml5.离心方法:差速离心法(分离物的沉降速度不同,采用不同的离心速度和时间进行分步离心的方法)。
密度梯度离心法又称区带离心法(速率区带离心法、等密度区带离心法)第三章显微镜1.光学显微镜的工作原理:光学显微镜是利用光学原理,把人眼所不能分辨的微小物体放大成像,供人们提取物质细微结构信息的光学仪器。
光学显微镜由两组会聚透镜组成光学折射系统。
把焦距较短,靠近观察物、成实像的透镜组称为物镜;焦距较长,靠近眼睛、成虚象的透镜组称为目镜。
被观察的物体位于物镜前方,被物镜作为第一级放大后成一倒立的实像,然后此实像再被目镜作为第二级放大,得到最大放大效果的倒立的虚象,位于人眼的明视距离处。
2.显微镜的结构光学系统机械系统3.光学显微镜的分辨率最小分辨距离0.2um4.显微镜目镜技术参数:包括放大倍数,最小视场宽度mm,都标记在目镜外壳上5.照明设置的主要部件:光源滤光器聚光镜6.显微镜的机械系统有底座镜臂镜筒物镜转换器载物台调焦机构聚光镜升降6.紫外-可见分光光度计的工作原理光照射到物质上可发生折射,反射和投射,一部分光会被物质吸收。
7.光的吸收定律 A=kbc8.光源:钨灯和卤钨灯是紫外-可见分光光度计使用最多的光源之一,发光波长为330~2500nm 氢灯和氘灯汞灯9.吸收池:在可见光范围内,常用无色光学玻璃或塑料制作,在紫外区,需用能透紫外线的石英玻璃或蓝宝石制作。
10.不同浓度的同一物质做吸光度测定时,其吸收曲线形状相似,最大吸收波长不变(P)11.当一束平行的单色光通过均匀的物质时,吸光度A与溶液厚度,浓度成正比(p)第四章紫外—可见光分光光度计1.光的吸收定律(朗伯—比尔定律):当一束平行的单色光通过含有均匀的吸光物质的吸收池(或气体、固体)时,光的一部分透过溶液、一部分被吸收池表面反射;2.光的的吸收定律的适用条件是:入射光为单色光;溶液浓度不能过大3.基本结构:光源、单色器、洗收池、检测器、信号显示系统4.分类:单光束可见分光光度计、单光束紫外-可见分光光度计、双光束分光光度计、双波长分光光度计5.性能指标:波长准确度和波长重复性、光度准确度、光度线性范围、分辨率、光谱带宽、杂散光、基线稳定度、基线平直度第五章临床血液常规检验仪器1.血细胞分析仪又被称为血细胞自动计数仪、血液自动分析仪等,是对一定体积全血内血细胞数目和异质性进行自动分析的常规仪器。
2.血细胞分析仪的功能:血细胞计数,白细胞分类,血红蛋白测定,相关参数计算等(1)电阻抗型血细胞分析仪的细胞计数原理:血细胞与等渗的电解质溶液相比为不良导体,其电阻值比稀释值大。
当血细胞通过检测器的微孔的孔径感受区时,其内外电极的恒流电路上的电阻值瞬间增大,产生电压脉冲信号。
脉冲信号数等于通过的细胞数,脉冲信号幅度大小与细胞体积成正比。
根据欧姆定律,在恒电流电路上,电压变化与电阻变化成正比,电阻值又同细胞体积成正比,血细胞体积越大,电压越高,产生信号的脉冲幅度就越大。
各种大小不同的细胞产生的脉冲信号分别被送入仪器的检测通道,经计算机处理后,以体积直方图显示出特定细胞群中的细胞体积和细胞分布情况。
最后得出白细胞、红细胞、血小板等相关参数。
(2)联合检测型血细胞分析仪的细胞计数原理:以流式技术为基础再联合使用流式、激光、射频、电导、电阻抗、细胞化学染色等多项技术进行细胞分析,并综合分析检测数据,从而得出较为准确的“五分类”结果。
其均使用了流式细胞计数,形成流体动力聚焦的流式通道,使单细胞流在鞘液的包裹下通过流式通道,将重叠限制到最低浓度。
1容量电导光散射联合检测原理 VCS v表示测定的细胞体积 C 电导性 S 表示对细胞颗粒的构型和颗粒质量的鉴别能力。
2多角度激光散射-电阻抗联合计数原理3光散射与细胞化学联合计数原理4电阻抗,射频与细胞化学联合计数原理不论是专用的网织红细胞分析仪,还是多功能高档的BCA,在进行网织红细胞计数分析时的基本原理都是相同的血细胞分析仪(BCA)又被称为血细胞自动计数仪(ABCC)血液自动分析仪(AHA)国际血液学标准委员会(ICSH)推荐的氰化高铁(HiCN)法的最大吸收峰在540nm.3.血细胞分析仪测定血红蛋白的原理(J)血细胞悬液中加入溶血剂后,红细胞溶解释放出血红蛋白,后者与溶血剂中有关成分结合形成血红蛋白衍生物,进入血红蛋白含量测试系统。
在特定波长(多为530~550nm)下进行光电比色,吸光度值与所含血红蛋白含量成正比,经仪器计算显示出血红蛋白浓度。
血液凝固分析仪(ACA)是采用一定分析技术,对血栓与止血有关成分进行自动检测分析的临床常规检验仪器。
4.血液凝固分析仪的检测原理血凝仪使用的主要检验技术方法有凝固法,底物显色法,免疫学法,干化学法。
凝固法是血栓/止血试验中最基本,最常用的方法,半自动血凝仪基本上以凝固法检测为主。
凝固法是通过检测血浆在凝血激活剂作用下一系列物理量(光,电,超声,机械运动等)de 变化,再由计算机分析所得数据并将之换算成最终结果的方法故也称生物物理法。
还有底物显色法、免疫学方法、干化学技术流式细胞分析仪的分析原理:将特异荧光染料染色的单细胞悬液放入样品管,在气体压力作用下,悬浮在样品管中的单细胞经管道进入FCM流动室,沿流动室的轴心向下流动形成样品流。
流式细胞分析仪1 散射光信号散射光分为前向角散射和侧向角散射,散射光不依赖细胞样品的染色等制备技术。
2 荧光信号保证荧光信号的关键技术。
荧光染料的选择和标记细胞的方法。
毛细管电泳的基本工作原理内径为20~100um区带电泳在医学检验中的应用最为广泛。
目前用于临床医学检验的电容主要有血清蛋白电泳,血红蛋白电泳糖化血红蛋白电泳,血清脂蛋白电泳尿蛋白电泳,脑脊液蛋白电泳。
第六章临床血液流变学检验仪器1.血液黏度计的分类(1)按工作原理:毛细管黏度计和旋转式黏度计(2)按自动化程度:半自动粘度计和全自动粘度计2.红细胞沉降率ESR 是指红细胞在一定条件下沉降的速度,简称血沉。
有的采用红外线障碍法进行检测3.自动血沉分析仪影响红细胞沉降的有哪些因素?1红细胞的变形性2红细胞的聚集性及相互作用3红细胞的压积4血浆介质的上升流动5红细胞的形态。
6沉降管的倾斜度4.红细胞沉降曲线分为四期悬浮期聚集期快速沉降期缓慢沉降期。
第七章临床尿液检测仪器1.有形成分:RBC、WBC、上皮细胞、管型、巨噬细胞、肿瘤细胞、细菌、精子以及尿液中沉析出来的各种结晶2.尿液分析的临床意义:尿液分析是临床诊断泌尿系统疾病的重要措施之一,通过对尿液的物理学检查和化学检查,可观察尿液物理性状和化学成分的变化。
在尿沉渣检查中能够看到的有形成分为红细胞,白细胞,上皮细胞,管型,巨噬细胞,肿瘤细胞,细菌,精子以及由尿液中沉析出来的各种结晶。
这些检查资料对肾和尿路疾患的诊断,鉴别诊断以及疾病的严重程度和预后的判断,都有重要的意义。
1.尿液分析仪的检测原理:(可能考大题)把试剂带浸入尿液以后,除了空白块外,其余的试剂块都因和尿液发生了化学反应而产生了颜色的变化,试剂块的颜色深深浅与光的吸反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光量值越大,反射光量值越小:反之,反射率越大。
因为颜色的深浅与光的反射率成反比关系,而颜色的深浅又与尿液中各种成分的浓度成比例关系,所以只有测得光的反射率及可以求得尿液中各种成分的浓度。
3.尿液分析仪一般采用双波长法测定试剂块的颜色变。
4.尿液分析仪的检测项目尿蛋白尿葡萄糖尿PH 尿酮体尿胆红质尿胆原尿潜血亚硝酸盐尿白细胞尿比重维生素C 尿液颜色和浊度。
5.试剂带的运用试剂块要比测试项目多一个空白块,有些仪器还多一个位置参考块。
各试剂块与尿液中被测定成分反应而呈现不同颜色。
空白块是为了消除尿液本身的颜色及试剂块分布的状态不均等产生出测试误差,提高测量准确度而设置的。
6.试剂带的结构尼龙膜绒制层吸水层塑料底层7.尿液分析仪的检测原理:试剂块的颜色深浅与光的吸收和反射程度有关,颜色越深,相应某种成分浓度越高,吸收光亮值越大,反射光亮值越小,反射率也越小;反之,反射率越大8.尿液分析仪的使用注意事项(1)保持仪器清洁(2)使用干净的取样杯,使用新鲜的混合尿液(3)不同类型的尿液分析仪使用不同的尿试带,每次取用后立即盖上瓶盖(4)试剂带浸入尿样的时间2秒,所有的试剂带全部浸入尿液中(5)结合半定量值进行分析9.尿液分析仪的质量控制(1)检测前的质量控制(2)检测中的质量控制(3)检测后的质量控制10.流式全自动尿有形成分分析仪工作原理:是应用流式细胞术和电阻抗的原理进行的,一个尿液标本被稀释并经染色液染色后,靠液压作用通过鞘液流动池。
反应样品从样品喷嘴出口进入鞘液流动室时,被一种无粒子颗粒的鞘液包围,使每个细胞以单个纵列的形式通过流动池的中心轴线,在这里每个尿液细胞被氩激光光束照射。
每个细胞有不同程度的荧光强度,从染色尿液细胞发出的荧光,主要反映细胞的定量特性,前向散射光强度,它成比例地反映细胞的大小和电阻抗的大小。
仪器将这种荧光,散射光等光信号转变成电信号,并对各种信号进行分析,最后得到每个尿液标本产生出的直方图和散射图。
通过分析这些图形,即可区分每个细胞并得出有关细胞的形态。
11.仪器结构光学检测系统液流(鞘液流动)系统电路系统自动进样装置。
鞘液第八章临床自动生化分析仪器1.自动生化分析仪器是将生物化学分析过程中的取样、加试剂、去干扰、混合、保温反应、自动检测、结果计算、数据处理和打印报告,以及报告后的清洗等步骤自动化的仪器根据仪器反应装置结构的不同分为:连续流动式、离心式、分离式、干化学式2.分立式自动生化分析仪工作原理是按手工操作的方式编排程序,并以有序的机械操作代替手工操作,用加样探针将样品加入各自的反应杯中,试剂探针按一定时间自动定量加入试剂,经搅拌器充分混匀后,在一定条件下反应。