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一、红细胞渗透脆性试验
（二）孵育脆性试验 【原理】 遗传性球形红细胞增多症及某些遗传性非
球形红细胞溶血性贫血患者的红细胞，经 37℃孵育24h后，由于葡萄糖消耗，ATP的储 备减少，导致需要能量的红细胞膜对钠离子 的主动运转受阻，使钠离子在红细胞内积聚， 细胞膨胀，而致渗透脆性明显增加。
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（二）确定红细胞破坏场所的实验 说明红细胞在血管外破坏的实验 血清胆红素测定
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（三）确定溶血性贫血原因的实验 １．红细胞膜缺陷的有关试验 (1)诊断遗传性球形红细胞增多症的实验: 红细胞渗透脆性试验 自身溶血试验及纠正试验 酸化甘油溶血试验等
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一、红细胞渗透脆性试验
【试剂】 5g/L NaCl溶液
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一、红细胞渗透脆性试验
(一)半定量法 【操作】 1. 取12支清洁干燥的试管置试管架上，用
蒸馏水稀释NaCl溶液。 2. 静脉采血1ml，立即依次向每管加入1滴
血（贫血患者可加2滴），轻轻颠倒混匀. 3. 于室温中静止2h，观察溶血情况。
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一、红细胞渗透脆性试验
半 定 量 法
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一、红细胞渗透脆性试验
【结果判断】 上层溶液开始出现透明红色者为开始溶
血管；溶液呈透明红色且管底红细胞完全消 失的最高浓度管为完全溶血管。
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一、红细胞渗透脆性试验
【注意事项】
1. 氯化钠必须干燥后准确称量，用前新鲜配制。 2. 所用器具要清洁干燥，混匀时不能用力过大。 3. 本试验忌用抗凝血，如遇特殊情况时可用肝 素抗凝。 4. 加血时持针角度应一致。 5. 在白色背景下观察结果，结果不易判断时可 离心后观察。
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一、溶血性贫血定义红细胞内在缺陷和红细
胞外在因素所致。 红细胞内在缺陷 红细胞外在因素 血液中含有破坏红细胞的抗体，或感染、
物理、化学因素等。
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二、溶血性贫血检验的基本方 法
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二、溶血性贫血检验的基本方法
学习目标
○背诵溶血性贫血的概念和分类 ○记住溶血性贫血检验的基本方法 ○叙述红细胞渗透脆性试验、蔗糖溶血试验、
酸溶血试验的原理、试剂、操作、注意事 项和临床意义
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本章目录
第一节 概述 第二节 红细胞膜缺陷的检验 第三节 红细胞酶缺陷的检验 第四节 珠蛋白合成异常的检验 第五节 免疫性溶血性贫血的检验
（一）确定是否有溶血的实验 1.网织红细胞计数 2.血清胆红素测定 3.尿和粪中尿胆原测定 4.骨髓细胞检验 最直接的确证试验是红细胞寿命测定。
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（二）确定红细胞破坏场所的实验 说明红细胞在血管内破坏的实验及结果: 1.血浆游离血红蛋白增加 2.结合珠蛋白降低 3.高铁血红蛋白增多 4.尿隐血试验阳性 5.尿含铁血黄素阳性等
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（三）确定溶血性贫血原因的实验 １．红细胞膜缺陷的有关试验 (1)诊断遗传性球形红细胞增多症的实验 (2)诊断PNH的实验: 酸化血清溶血试验 蔗糖溶血试验 蛇毒溶血试验 冷抗体溶血试验
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（三）确定溶血性贫血原因的实验 １．红细胞膜缺陷的有关试验 2．红细胞酶缺陷的实验 (1)丙酮酸激酶荧光斑点试验和活性测定 (2)高铁血红蛋白还原试验 (3)变性珠蛋白小体试验 (4)G6PD荧光斑点试验和活性测定 (5)硝基四氮唑蓝试验等 其中G6PD活性测定是G6PD缺乏的确证试验。
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一、红细胞渗透脆性试验
★遗传性溶血性疾病重要筛选试验 红细胞膜缺陷：渗透脆性增加 血红蛋白异常：渗透脆性降低 红细胞酶缺陷：渗透脆性正常
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一、红细胞渗透脆性试验
（一）简易半定量法（Sanford法） 【原 理】 红细胞在低渗盐水中，水分通
过细胞膜进入细胞内，使之膨胀 破坏而溶血。本试验是测定红细 胞对不同浓度低渗盐水的抵抗力， 红细胞对低渗盐水的抵抗力与其 表面积和体积的比值有关，比值 越大，则抵抗力越大，脆性越小； 反之比值越小，则抵抗力越小， 脆性越大。
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（三）确定溶血性贫血原因的实验 １．红细胞膜缺陷的有关试验 2．红细胞酶缺陷的实验 3．血红蛋白异常的实验 4．免疫性溶血原因的有关检查 (1)抗人球蛋白试验 (2)冷热溶血试验 (3)冷凝集素试验
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第二节 红细胞膜缺陷的检验
一、红细胞渗透脆性的试验 二、自身溶血试验及纠正 三、蔗糖溶血试验 四、酸化血清溶血试验
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一、溶血性贫血定义和分类
（二）溶血性贫血的分类 1.根据红细胞破坏场所，分为血管内和血
管外溶血； 2.根据溶血发生的急缓，分为急性和慢性；
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一、溶血性贫血定义和分类
（二）溶血性贫血的分类 3.根据病因可分为红细胞内在缺陷和红细
胞外在因素所致。 红细胞内在缺陷： 膜缺陷 酶缺陷 血红蛋白异常
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二、溶血性贫血检验的基本方法
（三）确定溶血性贫血原因的实验 １．红细胞膜缺陷的有关试验 2．红细胞酶缺陷的实验 3．血红蛋白异常的实验 (1)血红蛋白电泳检测
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二、溶血性贫血检验的基本方法
(2)抗碱血红蛋白检测 (3)胎儿血红蛋白（HbF）酸洗脱试验 (4)红细胞镰变试验 (5)变性珠蛋白小体测定 (6)异丙醇沉淀试验 (7)热变性试验等。
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第一节 概述
一、溶血性贫血定义和分类 二、溶血性贫血检验的基本方法
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一、溶血性贫血定义和分类
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一、溶血性贫血定义和分类
（一）溶血性贫血的定义 溶血性贫血是由于各种原因导致的红
细胞寿命缩短，破坏过多或加速，超过了 骨髓造血代偿能力所发生的一组疾病。