吸收环节 ：ABCB1 代谢环节：CYP3A4、CYP3A5、CYP2C9、CYP2C19 受体环节：P2Y12、 GP Ⅱb/ Ⅲa
相关性
权重
体系
个体化
二、评价各种血小板功能检测技术，建立行业标准
TEGPM
sc-2000
PAF-100 Verify Now
PL-11
血小板功能检测方法的比较
方法
功能与 基因多 态性的 相关性
ＰＣＲ-测序
*PCR最佳反应条件的建立 *患者遗传多态性分析
随访6个月
内再狭窄）、需要再次住院治疗的不 稳定心绞痛、脑卒中
随访6个月
*评估基因多态性与氯吡格雷疗效的相关性，建立血栓性疾病抗血小板药物 治疗的疗效的评估体系。
*评价血小板功能检测技术的优缺点，选择最优技术，并建立行业标准。
LTA sc-2000 PFA-100
VerifyNow
FCM
PL-11
优点
已有丰富的数据；结果与 临床预后相关；血小板功 能检测的金标准
操作简便；需血量少；全 血检测；无需处理血样
操作简便；需血量少；全 血检测；床旁检测；与 LTA相关性好
检测血小板表面的抗原； 可区分激活状态和非激活 状态的血小板
预测临 床事件
可 可 可
可
可
AR CR 诊断 诊断
可
可
（AA） （ADP）
可
不可
可
可
（AA） （ADP）
可
可
可
可
血小板功能检测在血栓病治疗、预防上具有重要价 值；但现有的血小板功能检测方法、质量及标准不足以 满足临床需要。
--- 《实验室检测诊断对抗血小板治疗的效能》专题研讨会，2011年 7月，美国亚特兰大，由AACC与美国心脏病学会联合举办
*实验室指标
患者临床
*冠脉照影结果 *PCI手术情况
特征对TEG 检测结果 的相关性
血小板功能检测
评估患者应用氯吡格雷 后的血小板功能状态 （低下or正常）
提取全血 基因组 Ｄ
ＮＡ
目的基因 选择，引 物设计
随
血小板
不同临床类型的CHD 患者的临床特征分析
6
访 个 月
缺血事件发生情况：致死或非致死性 心肌梗死、急性或亚急性血栓（支架
研究方法
血
多
小
提
PCR
态
板
取
（
性
功
全
反
基
与
能 检
血 基
应 条
因
缺 血
测
因
件
的
组
的
同 一
DNA
优 化
测 序
事 件 的 相
标
）
关
本
性
研究特色与创新之处
（1）在国内外的研究中，首次同时针对影响氯吡格雷疗效的吸收环节、 代谢环节和受体环节的3个环节7个目的基因进行了遗传多态性研究，分析 各目的基因对氯吡格雷疗效的影响权重，并考虑了多基因联合多态性的影 响；
（2）国内外首次探索建立一个以遗传多态性为核心，综合考虑患者其 它临床信息，通过计算危险分数，评估患者氯吡格雷疗效的评价体系；
（3）PL-11型血小板分析仪是最新的血小板功能检测技术，该仪器采 取“自动连续检测法”方法，直接对血样中血小板数量、体积在诱聚剂加 入后的变化进行连续检测，直接反应血小板聚集功能水平，提供对该个体 血小板功能水平的评价，该技术在国内外几乎无报道。
操作简便；重复性好；检 测信息真实、可靠；检测 灵敏；干扰因素少；采用 原始样品反映的血小板功 能水平更真实；
缺点
重复性差；需血量大； 需制备血小板富集血浆 ；耗时多
受vWF、PCT、HCT 、PLT等因素影响；无 调校方法
价格昂贵；无调校方法
仪器和试剂都比较昂贵 ；操作复杂，需受过特 别培训的技术人员；不 能作为快速检测项目
抗血小板治疗
抗血小板药物抵抗
抗血小板药物抵抗的可能机制
外部因素
依从性差/剂量不足
内部因素
血小板旁路途径活化
药物的生物利用度
治疗反应性 差异
基因多态性
药物相互作用
临床危险因素
研究内容
氯吡格雷的作用机制
氯吡格雷
小肠吸收（50%）
氯吡格雷
酯酶 无活性羧酸衍生物
肝内代谢 （CYP2C19、CYP1A2、CYP2B6）
原始血小板数 - 聚集后最低血小板数 ×100=MAR%
原始血小板数
*（原始血小板数-聚剂后最低血小板数 = 聚集的血小板数量）
sc-2000血小板聚集测试仪原理
本仪器采用光电比浊法测试血小板聚集:在特定的连续 搅拌条件下，在富血小板血浆(PRP)中加入诱导剂，血小 板发生聚集，PRP的透光度增高或浊度下降。将光浊度的 变化转换为电讯号的变化，从而计算出血小板的聚集率。 搅拌方式采用国际先进的磁棒搅拌方式。
氯吡格雷抵抗的 血小板功能差异与遗传多态性研究
指导老师 309医院检验科
主要内容
一、研究背景 二、研究目的 三、技术路线及试验方法 四、研究特色与创新之处 五、预期结果
研究背景
CHD特别是ACS的治疗原则
1. 处理已形成的血栓 开通闭塞的血管 恢复冠脉灌注 溶栓治疗
PCI 治疗
2. 防止新的血栓形成 防止血栓扩展 缩小损伤范围 抗凝治疗
肝细胞色素P450酶（CYP450）
肝内代谢
2-氧-氯吡格雷
（CYP3A4/5、CYP2B6、 CYP2C19、CYP2C9） P2Y12受体
ADP对腺苷酸环化酶的抑制 +
磷酸蛋白（VASP）的磷酸化
纤维蛋白受体（GPⅡb/Ⅲa）活化
血小板聚集
一、遗传多态性与氯吡格雷疗效差异的相关性
影响氯吡格雷 疗效相关基因
计算公式如下:
聚集率 = (1 —
PPP光电电压值 - 实测光电电压值 PPP光电电压值 - PRP光电电压值
）×100%
* （PPP 即贫血小板血浆）
技术路线及研究方法
技术路线
行PCI术的冠心病患者
病例资料采集
标本采集
诊断标准、纳入 标准、排除标准
同一标本先进行血小板功
*一般资料
能检测，再进行基因分析
预期结果
精诚合作 共谋发展
建立完善优化 的个体化治疗方案临检来自床验临床
建立统一的 评价抗血小 板药物反应 性的实验室 方法和标准
建立以遗传多态性 为核心，评价抗血 小板药物疗效差异
的评估体系
谢 谢！
PL-11血小板功能分析仪检测原理
• PL-11血小板分析仪采取“自动连续检测法”方法，直接 对全血中血小板原始数量检测后，继续对加入诱聚剂后血 小板数量进行连续计数检测，通过对比加诱聚剂前血液中 血小板数量与加入诱聚剂后血小板数量的变化及血小板下 降的速度，评价分析PL-11功能运用价值，建立行业标准 。