结论：影响匀浆提取鼠尾草酸的纯度的各因素主次顺 序为：提取时间 > 乙醇浓度 > 溶剂PH值 > 料液比
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
正交实验结果
综合评价分析表
因素 k1 k2 k3 R
A 30.659 33.144 32.990 2.485
B 32.031 32.415 32.347 0.384
14
12
10
8
6
4
2
0
234源自5678
9
10
ph值
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
提取溶剂调节酸种类的选择 （调节酸种类：盐酸、硫酸、柠檬酸、磷酸 ）
条件 10g迷迭香叶 150ml80%乙醇 匀浆4min
结果 使用磷酸作为调节酸时鼠尾草酸转化成鼠尾草酚的量最多，保 护作用最差，在达到相同PH值的时候，盐酸的用量最少 。
分析方法的建立
匀浆提取操作简单、快速、充 分，并能达到较高的提取效果
提取方法的选择
盐酸调节PH值为3.0的体积分数为80%乙醇作 为提取溶剂，提取时间为5min及料液比为1： 12.
匀浆法提取工艺优化
浓缩物真空干燥得产物纯度可达 到76.5%的鼠尾草酸产品 。
硅胶柱层析法纯化CA
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感谢…老师老师的悉心指导 。 感谢…等同学在实验过程中的大力支持和帮助 同时论文评阅人和答辩委员会所有老师致以最诚挚的谢意
结论 选择盐酸作为最佳酸性调节物质 。
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
料液比的选择
（料液比：1:6、1:8、1:10、 1:12、1:14、1:16、1:20 ）
条件 10g迷迭香叶 80%乙醇 匀浆4min 盐酸调节PH为3.0
结果 随着料液比的增大，鼠尾草酸的提取量也一直在增加，当料液 比达到1:12后，再增加料液比，鼠尾草酸的提取量变化量较少。
结论 选择料液比为1:12优化条件
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
匀浆提取时间的选择 （时间：1、2、3、4、5、6、7min）
条件 10g迷迭香叶 120ml80%乙醇 PH为3.0
结果 随着提取时间的增加，鼠尾草酸的提取量也不断增加，但在四 分钟后基本无明显变化进一步延长匀浆时间，可能会导致某些 本不易溶出的杂质成分也被溶剂溶出，从而使鼠尾草酸的纯度 有所下降。从提取效率及节能的方面考虑，应选择在最短的时 间内，达到近于最好的提取效果。 结论 选择匀浆时间4min作为优化条件
鼠尾草酸提取量mg /g-1 鼠尾草酸纯度
6
35.00%
5
30.00%
25.00% 4
20.00% 3
15.00%
2 10.00%
1
5.00%
0 50%
60%
70%
80%
90%
0.00% 100%
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鼠尾草酸提取量 乙醇浓度
鼠尾草酸纯度
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
提取溶剂PH值选择
（PH值：2.0、3.0、4.0、5.0、6.0、7.0、8.0、9.0、 10.0、11.0、12.0 ）
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究 正交实验
正交实验因数水平表
A乙醇浓度（%） B溶剂PH值 C提取时间（min）
D料液比
70
2
3
1:10
80
3
4
1:12
90
4
5
1:14
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
定义：提取率数值
正交实验结果
的十倍与纯度的数
正交实验结果数据表
值之和为综合评价 因数
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究 实验操作流程
迷迭香干叶
蒸馏法取精油
单因素实验
匀
分
浆
析
提
正交实验
计
取
算
优化条件下提取
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究 蒸馏法提取精油
条件 60g迷迭香叶 600ml蒸馏水 加热2.5小时
装置图
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究（单因素实验）
海南大学学士论文答辩
论文题目：迷迭香中鼠尾草酸的提取工艺研究
指导老师：
班 级： 姓 名：
学 号：
Contents
1 前言 2 鼠尾草酸的分析方法 3 鼠尾草酸提取方法的选择 4 匀浆法提取鼠尾草酸研究 5 柱层析法纯化鼠尾草酸 6 总结
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1 前言
迷迭香
主要分布：法国、西班牙、南斯拉夫、突尼斯、摩洛哥、保加利亚 ，等 主要成分：萜类、黄酮类、酚酸类及其他化学物质 抗氧化成分：鼠尾草酸、鼠尾草酚、迷迭香酸、迷迭香酚、表迷迭香酚，等 主要作用：抗氧化、抑菌、抗病毒、抗癌及作香料，等
Phase 2
Phase 3
提取方法的选择 提取工艺优化 分离纯化
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3 鼠尾草酸提取方法的选择
超声波 提取法
匀浆 提取法
其他 方法
提取方法
常温浸 提法
9
回流 提取法
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3 鼠尾草酸提取方法的选择
准确称取迷迭香干叶10g，加入体积溶剂为80%乙醇溶液200ml 置于烧瓶中 。其他条件根据下表进行实验，并计算出该方法下所 得到的鼠尾草酸提取率。
C 32.141 33.063 31.589 1.474
D 31.348 32.765 32.680 1.417
结论：得出最佳的提取工艺条件 A2B2C3D2，即乙醇 浓度为80%，溶剂PH值为3.0（HCl调节），提取时 间为5min及料液比为1:12。
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4 匀浆法提取鼠尾草酸研究
1.123
20.473
31.703
6
80
4
3
1:12
1.255
21.054
33.604
7
90
2
5
1:12
1.310
19.482
32.582
8
90
3
3
1:14
1.287
20.563
33.433
9
90
4
4
1:10
20
1.259
20.365
B3L2.9O55GO
4 匀浆法提取鼠尾草酸研究 正交实验结果
以鼠尾草酸提取率为指标，极差分析表
优化条件下进行匀浆提取鼠尾草酸 标 准 品 谱 图
样 品 谱 图
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结果： 提取率达到1.35%， 平均纯度达到22.3%
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5 柱层析法纯化鼠尾草酸
硅胶层析法的分离原理是根据物质在硅胶上的吸附力不同而得到分离，一般情 况下极性较大的物质易被硅胶吸附，极性较弱的物质不易被硅胶吸附，整个层析 过程即是吸附、解吸、再吸附、再解吸过程。具体流程操作如下图。。
因素
A
B
C
D
k1
1.109 1.140 1.139 1.086
k2
1.205
1.164
1.192
1.216
k3
1.285
1.205
1.178
1.208
R
0.266
0.065
0.053
0.130
结论：影响匀浆提取鼠尾草酸的提取率的各因素主次 顺序为：乙醇浓度 > 料液比 > 溶剂PH值 > 提取时间
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条件 10g迷迭香叶 150ml80%乙醇 匀浆4min
结果 在PH值为3-4的时候鼠尾草酸氧化成鼠尾草酚的量最少 ，因 为酸性条件所提供的质子有助于保护不向鼠尾草酚转化，但是 酸性太强对设备的腐蚀性增加。 结论 选择提取溶剂的PH值为3.0作为最佳提取溶剂的PH值
盐酸和氢氧化钠 调节PH
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鼠尾草酸提取量mg/g-1
分段收集流分剂
硅胶柱层析
回收洗脱剂
烘干得产品
HPLC检测
滤液 得粗提物
50℃减压浓缩 60℃烘箱烘干
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5 柱层析法纯化鼠尾草酸
硅胶柱层析
柱层析条件的建立 洗脱剂：乙酸乙酯
鼠尾草酸洗脱曲线
洗脱剂比例：乙酸乙酯:正丁烷=4:6
硅胶粒度：100-200目
硅胶初始含水量：6%
柱层析条件的建立
4
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2 鼠尾草酸的分析方法
色谱条件的建立
▪
色谱柱：Waters C18（150×4.6 mm,5 um）；
▪
流动相：乙腈-0.5%磷酸水溶液（75:25）；
▪
流速：1.0 mL/min；
▪
检测器：紫外检测器；
▪
检测波长：230 nm；
▪
灵敏度:0.16 AFUS；
▪
柱温:室温（25 ℃）。
5
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2 鼠尾草酸的分析方法
标准曲线绘制
配1mg/ml、0.5mg/ml、0.25mg/ml、0.125mg/ml混合标准品溶液，溶解液使用甲醇
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2 鼠尾草酸的分析方法 提取液
取1ml经0.45μm 微孔滤膜过滤之后 进行HPLC检测 ， 得C1
置于60℃烘箱中烘 干,取烘干样称量 得m2,用无水乙醇 溶解、定容于25 mL棕色容量瓶,。 过滤后进行HPLC 检测 .得C2
不同提取方法各项指标的比较
提取方法 提取温度/℃ 提取时间/h 提取率/%
超声波提取
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