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流式细胞仪基本原理及应用


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Bengbu Medical College Department of Immunology
流式细胞仪-光学系统
激发光源与荧光标记物
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Injector Tip
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光学检测信号
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流式细胞仪的光学系统 FACSCalibur
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流式细胞仪在临床检测和科研中的应用
免疫学检测和科研应用
血液病检测和科研应用
肿瘤学检测和科研应用
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一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念
液流系统:鞘液系统+样品流动系统
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台式机——FACSCalibur
双激光 488nm 635nm
四荧光参数
分选、浓缩系统
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一、流式细胞仪和流式细胞术的基本概念
流式细胞术(Flow Cytometry,FCM): 是应用流式细胞仪,对处于快速流动液 体中的细胞或生物颗粒进行多参数、 快速测量和定量分析,以及分选的技 术。
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Injector Tip
Sheath fluid
Fluorescence signals
Focused laser beam
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流式细胞仪-液流系统
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一、流式细胞仪和流式细胞术-特点
多参数测量和分析(散射光和荧光) ; 快速测量和分析
每秒可达1000-10000个细胞 分选纯度可达99%以上。
获取的数据分析结果更具有统计学意义;
通常测量的对象如各种细胞细胞必须处在单 个细胞悬液中。此外,也可测量微生物等生物 颗粒,或者工合成微球非生物颗粒,
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免疫学教研室
流式细胞仪在临床检测和 临床科研中的应用
李柏青 蚌埠医学院免疫学教研室
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流式细胞仪的基本工作原理以及在基础 和临床科研中的应用
流式细胞仪和流式细胞术-概述
流式细胞仪的工作原理和测量参数
流式细胞仪(Flow Cytometer, FCM): 是集合光电子物理,光电测量技术, 液流技术,计算机技术等现代高科技 技术为一体的细胞测量和分析仪器。
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大型机——FACSVantage SE
科研型 八荧光参数 高速分选 多路分选
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流式细胞仪与荧光显微镜比较流细胞仪 流动的细胞荧光显微镜 静止的细胞样本
流式细胞仪-光路系统
激光 (Laser)是一种相干光源,它能提供 单一波长、单一方向、同步的稳定光照
激光波长: 488nm, 635nm
光收集系统是由若干组透镜, 滤波片, 小 孔组成,将产生的光信号引导至检测器
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光路系统
数量大
数量少
高速分选
样本难以再利用
细胞群体特征量分布 可揭示细胞内部结构信息
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二、流式细胞仪的工作原理和测量参数 Bengbu Medical College Department of Immunology
(一) 流式细胞仪的结构
光路系统:
激光光源,光路系统(透镜、滤光片)
电子系统:光电倍增管(PMT),补偿电路 液流系统: 鞘液系统,样品流动系统
数据系统:计算机,数据测量和分析软件。
细胞分选系统
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