核糖核酸酶由124个氨基酸残基组成，有4对二硫键。用尿素和β-巯基乙 Байду номын сангаас处理该酶溶液，分别破坏次级键和二硫键，肽链完全伸展，变性的 酶失去催化活性；当用透析方法去除变性剂后，酶活性几乎完全恢复， 理化性质也与天然的酶一样。
概率计算表明，8个半胱氨酸残基结合成4对二硫键，可随机组合成105 种配对方式，而事实上只形成了天然酶的构象，这说明一级结构未破 坏，保持了氨基酸的排列顺序就可能回复到原来的三级结构，功能依 然存在。
17、一个人即使已登上顶峰，也仍要 自强不 息。上 午10时 2分29 秒上午 10时2 分10:0 2:292 0.9.22
谢谢大家
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◆ 血红蛋白含铁也是0.335%，最低分子量也为16700，但 用其他方法测分子量为68000，即每一个血红蛋白含有4 个铁原子，由此计算更为准确分子量为： 16700× 4=66800。
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◆ 2．凝胶过滤法
◆ 凝胶过滤法分离蛋白质的原理是根据蛋白质分子 量的大小。由于不同排阻范围的葡聚糖凝胶有一 特定的蛋白质分子量范围，在此范围内，分子量 的对数和洗脱体积之间成线性关系。因此，用几 种已知分子量的蛋白质为标准，进行凝胶层析， 以每种蛋白质的洗脱体积对它们的分子量的对数 作图，绘制出标准洗脱曲线。未知蛋白质在同样 的条件下进行凝胶层析，根据其所用的洗脱体积， 从标准洗脱曲线上可求出此未知蛋白质对应的分 子量。
蛋白质分子量的测定方法
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◆ 1．根据化学组成测定最低相对分子质量
◆ 用化学分析方法测出蛋白质中某一微量元素的含量，并假 设分子中只有一个这种元素的原子，就可以计算出蛋白质 的最低分子量。肌红蛋白、血红蛋白均含铁0.335%，分 别求它们的最低分子量：
◆ 肌红蛋白为55.8（Fe原子量）÷ 0.335× 100=16700，与 其他方法测分子量相符。
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◆ （三）分子病
◆ 分子病是指机体DNA分子上基因缺陷引起mRNA 分子异常和蛋白质生物合成的异常，进而导致机 体某些功能和结构随之变异的遗传病。在1904年， 发现镰刀状红细胞贫血病。大约化费了40多年才 清楚患病原因，患者的血红蛋白（HbS）与正常 人的（HbA）相比，仅β-链的第6位上，Val取代 了正常的Glu。目前全世界已发现有异常血红蛋白 400种以上。
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12、人乱于心，不宽余请。10:02:29 10:02: 2910: 02Tuesday, September 22, 2020
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13、生气是拿别人做错的事来惩罚自 己。20 .9.222 0.9.22 10:02: 2910: 02:29 Septe mber 22, 2020
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14、抱最大的希望，作最大的努力。 2020 年9月2 2日星 期二上 午10时2 分29 秒10:02 :2920. 9.22
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15、一个人炫耀什么，说明他内心缺 少什么 。。20 20年9 月上午 10时2 分20.9 .2210: 02Sep temb er 22, 2020
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16、业余生活要有意义，不要越轨。 2020 年9月2 2日星 期二10 时2分2 9秒10: 02:29 22 September 2020
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◆ （二）种属差异 ◆ 大量实验结果证明，一级结构相似的多肽或蛋白质，其
空间结构和功能也相似，不同种属的同源蛋白质有同源序 列，反映其共同进化起源，通过比较可以揭示进化关系。 ◆ 例如哺乳动物的胰岛素，其一级结构仅个别氨基酸差异 （A链5、6、10位，B链30位），它们对生物活性调节糖 代谢的生理功能不起决定作用。 ◆ 从各种生物的细胞色素C(cytochrome c ) 的一级结构分析， 可以了解物种进化间的关系。进化中越接近的生物，它们 的细胞色素c的一级结构越近似。
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◆ 3．SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳法
◆ 蛋白质在普通聚丙烯酰胺凝胶中的电泳速度取决于蛋白质 分子的大小、分子形状和所带电荷的多少。SDS（十二烷 基磺酸钠）是一种去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基。 当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，使 蛋白质分子带上大量的强负电荷，并且使蛋白质分子的形 状都变成短棒状，从而消除了蛋白质分子之间原有的带电 荷量和分子形状的差异。这样电泳的速度只取决于蛋白质 分子量的大小，蛋白质分子在电泳中的相对迁移率和分子 质量的对数成直线关系。以标准蛋白质分子质量的对数和 其相对迁移率作图，得到标准曲线，根据所测样品的相对 迁移率，从标准曲线上便可查出其分子质量。
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．蛋白质空间结构与功能的关系
◆ 蛋白质的空间结构是其生物活性的基础， 空间结构变化，其功能也随之改变。肌红 蛋白（Mb）和血红蛋白（Hb）是典型的 例子。
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◆ 肌红蛋白（Mb）和血红蛋白（Hb）都能与氧进 行可逆的结合，氧结合在血红素辅基上。然而Hb 是四聚体分子，可以转运氧；Mb是单体，可以储 存氧，并且可以使氧在肌肉内很容易地扩散。它 们的氧合曲线不同，Mb为一条双曲线，Hb是一 条 S型曲线。在低p(O2)下，肌红蛋白比血红蛋白 对氧亲和性高很多，p(O2)为 2.8torr(1torr≈133.3Pa)时，肌红蛋白处于半饱和 状态。在高p(O2)下，如在肺部（大约100torr） 时，两者几乎都被饱和。其差异形成一个有效的 将氧从肺转运到肌肉的氧转运系统。
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◆ Hb未与氧结合时，其亚基处于一种空间结 构紧密的构象（紧张态，T型），与氧的亲 和力小。只要有一个亚基与氧结合，就能 使4个亚基间的盐键断裂，变成松弛的构象 （松弛态，R型）。T型和R型的相互转换对 调节Hb运氧的功能有重要作用。一个亚基 与其配体结合后能促进另一亚基与配体的 结合是正协同效应，其理论解释是Hb是别 构蛋白，有别构效应。
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蛋白质结构和功能的关系
◆ 1蛋白质一级结构和功能的关系
◆ 2蛋白质空间结构和功能的关系
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蛋白质一级结构与功能的关系
◆ （一）一级结构是空间构象的基础
20世纪60年代初，美国科学家C.Anfinsen进行牛胰核糖核酸酶的变性和 复性实验，提出了蛋白质一级结构决定空间结构的命题。
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9、 人的价值，在招收诱惑的一瞬间被决定 。20.9. 2220. 9.22Tuesday, September 22, 2020
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10、低头要有勇气，抬头要有低气。 10:02: 2910: 02:291 0:029/22/20 20 10:02:29 AM
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11、人总是珍惜为得到。20.9.2210: 02:29 10:02S ep-20 22-Se p-20
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◆ 4．沉降法（超速离心法） ◆ 沉降系数（S）是指单位离心场强度溶质的
沉降速度。S也常用于近似地描述生物大分 子的大小。蛋白质溶液经高速离心分离时， 由于比重关系，蛋白质分子趋于下沉，沉 降速度与蛋白质颗粒大小成正比，应用光 学方法观察离心过程中蛋白质颗粒的沉降 行为，可判断出蛋白质的沉降速度。根据 沉降速度可求出沉降系数，将S带入公式， 即可计算出蛋白质的分子质量。