免疫球蛋白10. 药理作用11. 药品说明书1. 适应症2. 用量用法12. 相关文献具有抗体活性的血清蛋白称为免疫球蛋白，又称为抗体。

是由机体的B淋巴细胞在抗原的刺激下分化、分裂而成的一组特殊球蛋白。

人和动物的免疫血清中的免疫球蛋白极不均一，其组成、结构、大小、电荷、生物学活性等都有很大差异，约占机体全部血清蛋白的20～25％。

目前已在人、小鼠等血清中先后分纯得到5类免疫球蛋白，1968年，世界卫生组织统一命名为免疫球蛋白G（IgG）、免疫球蛋白M（IgM）、免疫球蛋白A（IgA）、免疫球蛋白D（IgD）、免疫球蛋白E（IgE）。

免疫球蛋白分子的基本结构Porter等对血清IgG抗体的研究证明，Ig单体分子的基本结构是由四条肽链组成的。

即由二条相同的分子量较小的肽链称为轻链和二条相同的分子量较大的肽链称为重链组成的。

轻链与重链是由二硫键连接形成一个四肽链分子称为Ig分子的单体，是构成免疫球蛋白分子的基本结构。

Ig单体中四条肽链两端游离的氨基或羧基的方向是一致的，分别命名为氨基端（N端）和羧基端（C端）。

图2-3 免疫球蛋白分子的基本结构示意图轻链和重链由于骨髓瘤蛋白（M蛋白）是均一性球蛋白分子，并证明本周蛋白（BJ）是Ig分子的L链，很容易从患者血液和尿液中分离纯化这种蛋白，并可对来自不同患者的标本进行比较分析，从而为Ig分子氨基酸序列分析提供了良好的材料。

1．轻链（lightchain,L）轻链大约由214个氨基酸残基组成，通常不含碳水化合物，分子量约为24kD。

每条轻链含有两个链内二硫键所组成的环肽。

L链共有两型：kappa(κ)与lambda(λ)，同一个天然Ig分子上L链的型总是相同的。

正常人血清中的κ：λ约为2：1。

2．重链（heavychain,H链）重链大小约为轻链的2倍，含450～550个氨基酸残基，分子量约为55或75kD。

每条H链含有4～5个链内二硫键所组成的环肽。

不同的H链由于氨基酸的排列顺序、二硫键的数目和们置、含糖的种类和数量不同，其抗原性也不相同，根据H链抗原性的差异可将其分为5类：μ链、γ链、α链、δ链和ε链，不同H链与L链（κ或λ链）组成完整Ig的分子分别称之为IgM、IgG、IgA、IgD和IgE。

γ、α和δ链上含有4个环肽，μ和ε链含有5个环肽。

重链（heavy chain,H链）由450～570个氨基酸残基组成，分子量约为50～70kD。

不同的H链因氨基酸的排列顺序、二硫键的数目和位置、含糖的种类和数量不同，其抗原性也不相同，可将其分为μ链、γ链、α链、δ链、ε链五类，这些H链与L链（κ链或λ链）组成的完整Ig分子分别称为IgM（μ）、IgG（γ）、IgA （α）、IgD（δ）和IgE（ε可变区和恒定区通过对不同骨髓蛋白或本周蛋白H链或L链的氨基酸序列比较分析，发现其氨基端（N-末端）氨基酸序列变化很大，称此区为可变区（V），而羧基末端（C-末端）则相对稳定，变化很小，称此区为恒定区（C区）。

1．可变区（variableregion,V区）位于L链靠近N端的1/2（约含108～111个氨基酸残基）和H链靠近N端的1/5或1/4（约含118个氨基酸残基）。

每个V区中均有一个由链内二硫键连接形成的肽环，每个肽环约含67～75个氨基酸残基。

V区氨基酸的组成和排列随抗体结合抗原的特异性不同有较大的变异。

由于V区中氨基酸的种类、排列顺序千变万化，故可形成许多种具有不同结合抗原特异性的抗体。

L链和H链的V区分别称为VL和VH。

在VL和VH中某些局部区域的氨基酸组成和排列顺序具有更高的变休程度，这些区域称为高变区（hypervariable region,HVR）。

在V 区中非HVR部位的氨基酸组面和排列相对比较保守，称为骨架区（framework region）。

VL中的高变区有三个，通常分别位于第24～34、50～65、95～102位氨基酸。

VL和VH 的这三个HVR分别称为HVR1、HVR2和HVR3。

经X线结晶衍射的研究分析证明，高变区确实为抗体与抗原结合的位置，因而称为决定簇互补区（complementarity-determining region,CDR）。

VL和VH的HVR1、HVR2和HVR3又可分别称为CDR1、CDR2和CDR3，一般的CDR3具有更高的高变程度。

高变区也是Ig分子独特型决定簇（idiotypic determinants）主要存在的部位。

在大多数情况下H链在与抗原结合中起更重要的作用。

图2-4 与抗原表位结合高变区（HVR）示意图（G表示相对保守的甘氨酸）2．恒定区（constantregion,C区）位于L链靠近C端的1/2（约含105个氨基酸残基）和H链靠近C端的3/4区域或4/5区域（约从119位氨基酸至C末端）。

H链每个功能区约含110多个氨基酸残基，含有一个由二锍键连接的50～60个氨基酸残基组成的肽环。

这个区域氨基酸的组成和排列在同一种属动物Ig同型L链和同一类H链中都比较恒定，如人抗白喉外毒素IgG与人抗破伤风外毒素的抗毒素IgG，它们的V区不相同，只能与相应的抗原发生特异性的结合，但其C区的结构是相同的，即具有相同的抗原性，应用马抗人IgG第二体（或称抗抗体）均能与这两种抗不同外毒素的抗体（IgG）发生结合反应。

这是制备第二抗体，应用荧光、酶、同位毒等标记抗体的重要基础。

功能区Ig分子的H链与L链可通过链内二硫键折叠成若干球形功能区，每一功能区（domain）约由110个氨基酸组成。

在功能区中氨基酸序列有高度同源性。

1．L链功能区分为L链可变区（VL）和L链恒定区（CL）两功能区。

2．H链功能区IgG、IgA和IgD的H链各有一个可变区（VH）和三个恒定区（CH1、CH2和CH3）共四个功能区。

IgM和IgE的H链各有一个可变区（VH）和四个恒定区（CH1、CH2、CH3和CH4）共五个功能区。

如要表示某一类免疫蛋白H链恒定区，可在C（表示恒定区）后加上相应重链名称（希腊字母）和恒定区的位置（阿拉伯数字），例如IgG重链CH1、CH2和CH3可分别用Cγ1、Cγ2和Cγ3来表示。

到Ig分子，并一起被分泌到粘膜表面。

SC的存在对于抵抗外分泌液中蛋白水解酶的降解具有重要作用。

单体、双体和五聚体1．单体由一对L链和一对H链组成的基本结构，如IgG、IgD、IgE血清型IgA。

2．双体由J链连接的两个单体，如分泌型IgA（secretory IgA,SIgA)二聚体（或多聚体）IgA结合抗原的亲合力（avidity）要比单体IgA高。

图2-5 分泌型IgA结构示意图3．五聚体由J链和二硫键连接五个单体，如IgM。

μ链Cys414（Cμ3）和Cys575(C 端的尾部)对于IgM的多聚化极为重要。

在J链存在下，通过两个邻近单体IgMμ链Cys之间以及J链与邻μ链Cys575之间形成二硫键组成五聚体。

由粘膜下浆细胞所合成和分泌的IgM五聚体，与粘膜上皮细胞表面pIgR(poly-Ig receptor,pIgR)结合，穿过粘膜上皮细胞到粘膜表面成为分泌型IgM(secretory IgM)。

酶解片段1．本瓜蛋白酶的水解片段Porter等最早用木瓜蛋白酶（papain）水解兔IgG,从而区划获知了Ig四肽链的基本结构和功能。

（1）裂解部位：IgG铰链区H链链间二硫键近N端侧切断。

（2）裂解片段：共裂解为三个片段：①两个Fab段（抗原结合段，fragmentof antigen binding）,每个Fab段由一条完整的L链和一条约为1/2的H链组成，Fab段分子量为54kD。

一个完整的Fab段可与抗原结合，表现为单价，但不能形成凝集或沉淀反应。

Fab中约1/2H 链部分称为Fd段，约含225个氨基酸残基，包括VH、CH1和部分铰链区。

②一个Fc段（可结晶段，fragmentcrystallizable）,由连接H链二硫键和近羧基端两条约1/2的H链所组成，分子量约50kD。

Ig在异种间免疫所具有的抗原性主要存在于Fc段。

图2-6 人分泌型IgA和分泌型IgM的局部产生示意图图2-7 IgM结构示意图2．胃蛋白酶的水解片段Nisonoff等最早用胃蛋白酶（pepsin）裂解免疫球蛋白。

（1）裂解部位：铰链区H链链间二硫键近C端切断。

（2）裂解片段：1）F（ab'）2：包括一对完整的L链和由链间二硫键相连一对略大于Fab中Fd的H 链，称为Fd'，约含235个氨基酸残基，包括VH、VH1和铰链区。

F（ab'）2具有双价抗体活性，与抗原结合可发生凝集和沉淀反应。

双价的F（ab'）2与抗原结合的亲合力要大于单价的Fab。

由于应用F（ab'）2时保持了结合相应抗原的生物学活性，又减少或避免了Fc段抗原性可能引起的副作用，因而在生物制品中有较大的实际应用价值。

虽然F（ab'）2与抗原结合特性方面同完整的Ig分子一样，但由于缺乏Ig中部分，因此不具备固定补体以及与细胞膜表面Fc受体结合的功能。

F（ab'）2经还原等处理后，H链间的二硫可发生断裂而形成两个相同的Fab'片段。

2）Fc'可继续被胃蛋白酶水解成更小的片段，失去其生物学活性。

图2-8 Ig酶水解片段示意图免疫球蛋白分子的功能Ig是体液免疫应答中发挥免疫功能最主要的免疫分子，免疫球蛋白所具有的功能是由其分子中不同功能区的特点所决定的。

特异性结合抗原Ig最显着的生物学特点是能够特异性地与相应的抗原结合，如细菌、病毒、寄生虫、某些药物或侵入机体的其他异物。

Ig的这种特异性结合抗原特性是由其V区（尤其是V区中的高变区）的空间构成所决定的。

Ig的抗原结合点由L链和H链超变区组成，与相应抗原上的表位互补，借助静电力、氢键以及范德华力等次级键相结合，这种结合是可逆的，并受到pH、温度和电解浓度的影响。

在某些情况下，由于不同抗原分子上有相同的抗原决定簇，或有相似的抗原决定簇，一种抗体可与两种以上的抗原发生反应，此称为交叉反应（cross reaction）。

抗体分子可有单体、双体和五聚体，因此结合抗原决定簇的数目（结合价）也不相同。

Fab段为单价，不能产生凝集反应和沉淀反应。

F（ab'）2和单体Ig（如IgG、IgD、IgE）为双价。

双体分泌型IgA有4价。

五聚体IgM理论上应为10价，但实际上由于立体构型的空间位阻，一般只有5个结合点可结合抗原。

B细胞表面Ig(SmIg)是特异性识别抗原的受体，成熟B细胞主要表达SmIgM和SmIgD，同一B细胞克隆表达不同类SmIg其识别抗原的特异性是相同的。

活化补体1．IgM、IgG1、IgG2和IgG3可通过经典途径活化补体。