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植物芳香油的提取 (2)


数在30~300之
间、适于计数
放 103、
线 104、

105
的平板
针线细
细 104、 菌 105、
106

深入思考
1、同一稀释倍数下,至少涂布几个平板, 为什么?是否需要设置空白对照,为什么 ?
至少涂布三个。
通过重复实验,增强实验的说服力和准确性。

设置对照
空白对照
证明培养基是 否灭菌合格。


提取方法 实验原理 适用范围 方法步骤
水蒸气 利用水蒸气将挥 适用于提取玫
蒸馏 发性较强的芳香
(水中、水上、油携带出来
瑰油、薄荷油 等挥发性强的
水气)
芳香油
1.水蒸气蒸馏 2.分离油层 3.除水过滤
通过机械加压,适用于柑橘、 1.石灰水浸泡
压榨法 压榨出果皮中 柠檬等易焦糊 2.压榨、过滤
的芳香油
果具有,是如何进行选择的?请设计一组
对照试验,判断以上培养基是否起到了筛
选作用。
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨 (全营养)培养基
C
C.接种了的牛肉膏蛋白胨
(全营养)培养基
D.接种了的选择培养基

小组讨论
2、若有筛选作用,请思考筛选出来的一 定是尿素分解菌吗?如何鉴定尿素分解菌 ?
不一定。还需要进一步的验证。
显微镜直接计数法
(无法区分活菌和死菌)
稀释涂布平板法
滤膜法

基础感知
4、利用稀释涂布平板法,如何计算样品 中的细菌数?(用公式表示)各字母所代 表的含义是什么?该方法统计出的菌落数 往往比活菌的实际数目少,为什么?
每克样品中的菌落数=(C÷V)×M
其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平 均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液 的体积(ml),M代表稀释倍数。

操作中的注意事项 (1)无菌操作:铁铲和信封都要灭菌。称 取土壤、将称好的土样倒入锥形瓶、稀释土壤 溶液,每一步都要在酒精灯的火焰旁进行。
(2)做好标记:如在培养皿上注明培养基 种类、培养日期以及培养样品的稀释度等。

小组讨论
1、仔细观察课本P22左上方的培养基配方
,请判断该培养基是否具有选择作用?如
玫 瑰 花
玫瑰花
精度深思 自主学习

小组讨论 合作探究


基础感知
1、天然香料的来源?植物芳香油的特性 ?植物芳香油的组成成分?
天然香料主要来自于动物、植物和真菌;植 物芳香油都有较强的挥发性;植物芳香油组 成成分复杂,一般都是萜类化合物及其衍生 物组成。

基础感知
2、植物芳香油的提取方法有哪些?这些 方法所依据的原理及适用范围?
总之,这个时期所应用的香料都是天然的、未加工过的固 体芳香植物。当时的香料仅限于少数人使用。
在这时期中,香料是一种贵重的商品,成为贵族阶层的嗜 好品。因此,珍奇的香料往往在世界各地遭到掠夺。随着历史 的发展,香料的需要量大为增加,仅采集芳香植物已感到运输 不便,同时芬芳花卉也不是四季都有,而且不可能持久地保存 下去,这就不能满足使用者的需求。因此,到了16世纪就发 明了用水蒸气蒸馏提取芳香植物精油的方法。至此,香料的应 用从固态芳香植物的直接应用发展到天然芳香植物经加工提取 出芳香成分。从此,天然香料不仅仅应用于熏香,进而应用于 药物、化妆品、饮食品和调味品等。天然香料的应用价值就进 一步获得发挥,这为整个香料工业的兴起和发展奠定了基础。
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
在培养微生物时,各 种微生物所需的培养 温度和时间分别是什 么?培养到什么时候 记录的结果误差才最 小?(基础感知Q6)

细 菌:30-370C温度下培养1-2天 放线菌:25-280C温度下培养5-7天 霉 菌:25-280C温度下培养3-4天
在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落 数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结 果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌 落的数目。
菌落的特征
大小 形状 颜色 隆起程度

土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数

基础感知
3、测定微生物数量的常用方法是什么? 哪种属于活菌计数法?
氮培养 碳培养 唯一 基) 基) 氮源
分 离 菌 真菌 种
金黄 色葡 萄球

固氮 微生

自养 尿素 型生 分解
物菌

实验流程
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板
从肥沃、湿润的土壤中取样。 先铲去表层土3cm左右,再 取样,将样品装入事先准备 好的信封中。
微生物的培养与观察
菌落计数

土壤取、过滤
有机溶 剂萃取
使芳香油溶解在 适用范围广,要
有机溶剂中,蒸 发溶剂后就可获
求原料的颗粒要 尽可能细小,能 充分浸泡在有机
得芳香油
溶剂中
1.粉碎、干燥 2.萃取、过滤 3.浓缩

选择培养基
加 加青 减 霉素 成 等抗 份 生素
加高浓度 不加氮 不加碳 以尿 食盐水 源(无 源(无 素为

基础感知
4、利用稀释涂布平板法,如何计算样品 中的细菌数?(用公式表示)各字母所代 表的含义是什么?该方法统计出的菌落数 往往比活菌的实际数目少,为什么?
当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察 到的只是一个菌落。

土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
这就是整个实验操 作的流程,那么, 在这个实验中,我 们如何去做到无菌 操作呢?

回顾旧知
1.微生物的实验室培养,常用的灭菌方法?
干热灭菌法 灼烧灭菌法
高压蒸汽灭菌法

回顾旧知
2.腐乳制作中,豆腐与盐的比例?泡菜制作 中,清水与盐的比例?
豆腐:盐=5:1 清水:盐=4:1
历史上最早的应用的天然香料包括原始而未加工过的直接应用 的动植物发香部位,通过物理方法进行提取或精炼加工而未改 变其原来成分的天然香料。早在五千年前,中国人民对大自然 中芳香花卉所散发出来的“香气”,即有美的、愉悦的感觉, 就认为“香”是快感的享受。
制备以尿素为唯一 氮源的选择培养基。
微生物的培养与观察
菌落计数

土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
在这一步我们需 要注意些什么呢?

基础感知
5、在对样品进行稀释的时候,细菌、放 线菌、真菌的稀释倍数分别为多少?
稀释倍数
目的
真 102、 保证获得菌落

103、 104

尿素分解菌的鉴定
在以尿素为唯一氮源的培养基 中加入酚红指示剂。培养某种细菌 后,如果PH升高,指示剂将变红, 说明该细菌能够分解尿素。
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