植物芳香油的提取 (2)
数在30~300之
间、适于计数
放 103、
线 104、
菌
105
的平板
针线细
细 104、 菌 105、
106
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深入思考
1、同一稀释倍数下,至少涂布几个平板, 为什么?是否需要设置空白对照,为什么 ?
至少涂布三个。
通过重复实验,增强实验的说服力和准确性。
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设置对照
空白对照
证明培养基是 否灭菌合格。
评
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提取方法 实验原理 适用范围 方法步骤
水蒸气 利用水蒸气将挥 适用于提取玫
蒸馏 发性较强的芳香
(水中、水上、油携带出来
瑰油、薄荷油 等挥发性强的
水气)
芳香油
1.水蒸气蒸馏 2.分离油层 3.除水过滤
通过机械加压,适用于柑橘、 1.石灰水浸泡
压榨法 压榨出果皮中 柠檬等易焦糊 2.压榨、过滤
的芳香油
果具有,是如何进行选择的?请设计一组
对照试验,判断以上培养基是否起到了筛
选作用。
A.未接种的选择培养基
B.未接种的牛肉膏蛋白胨 (全营养)培养基
C
C.接种了的牛肉膏蛋白胨
(全营养)培养基
D.接种了的选择培养基
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小组讨论
2、若有筛选作用,请思考筛选出来的一 定是尿素分解菌吗?如何鉴定尿素分解菌 ?
不一定。还需要进一步的验证。
显微镜直接计数法
(无法区分活菌和死菌)
稀释涂布平板法
滤膜法
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基础感知
4、利用稀释涂布平板法,如何计算样品 中的细菌数?(用公式表示)各字母所代 表的含义是什么?该方法统计出的菌落数 往往比活菌的实际数目少,为什么?
每克样品中的菌落数=(C÷V)×M
其中,C代表某一稀释度下平板上生长的平 均菌落数,V代表涂布平板时所用的稀释液 的体积(ml),M代表稀释倍数。
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操作中的注意事项 (1)无菌操作:铁铲和信封都要灭菌。称 取土壤、将称好的土样倒入锥形瓶、稀释土壤 溶液,每一步都要在酒精灯的火焰旁进行。
(2)做好标记:如在培养皿上注明培养基 种类、培养日期以及培养样品的稀释度等。
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小组讨论
1、仔细观察课本P22左上方的培养基配方
,请判断该培养基是否具有选择作用?如
玫 瑰 花
玫瑰花
精度深思 自主学习
思
小组讨论 合作探究
议
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基础感知
1、天然香料的来源?植物芳香油的特性 ?植物芳香油的组成成分?
天然香料主要来自于动物、植物和真菌;植 物芳香油都有较强的挥发性;植物芳香油组 成成分复杂,一般都是萜类化合物及其衍生 物组成。
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基础感知
2、植物芳香油的提取方法有哪些?这些 方法所依据的原理及适用范围?
总之,这个时期所应用的香料都是天然的、未加工过的固 体芳香植物。当时的香料仅限于少数人使用。
在这时期中,香料是一种贵重的商品,成为贵族阶层的嗜 好品。因此,珍奇的香料往往在世界各地遭到掠夺。随着历史 的发展,香料的需要量大为增加,仅采集芳香植物已感到运输 不便,同时芬芳花卉也不是四季都有,而且不可能持久地保存 下去,这就不能满足使用者的需求。因此,到了16世纪就发 明了用水蒸气蒸馏提取芳香植物精油的方法。至此,香料的应 用从固态芳香植物的直接应用发展到天然芳香植物经加工提取 出芳香成分。从此,天然香料不仅仅应用于熏香,进而应用于 药物、化妆品、饮食品和调味品等。天然香料的应用价值就进 一步获得发挥,这为整个香料工业的兴起和发展奠定了基础。
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
在培养微生物时,各 种微生物所需的培养 温度和时间分别是什 么?培养到什么时候 记录的结果误差才最 小?(基础感知Q6)
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细 菌:30-370C温度下培养1-2天 放线菌:25-280C温度下培养5-7天 霉 菌:25-280C温度下培养3-4天
在菌落计数时,每隔24h统计一次菌落 数目。选取菌落数目稳定时的记录作为结 果,以防止因培养时间不足而导致遗漏菌 落的数目。
菌落的特征
大小 形状 颜色 隆起程度
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土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
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基础感知
3、测定微生物数量的常用方法是什么? 哪种属于活菌计数法?
氮培养 碳培养 唯一 基) 基) 氮源
分 离 菌 真菌 种
金黄 色葡 萄球
菌
固氮 微生
物
自养 尿素 型生 分解
物菌
评
实验流程
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板
从肥沃、湿润的土壤中取样。 先铲去表层土3cm左右,再 取样,将样品装入事先准备 好的信封中。
微生物的培养与观察
菌落计数
评
土壤取、过滤
有机溶 剂萃取
使芳香油溶解在 适用范围广,要
有机溶剂中,蒸 发溶剂后就可获
求原料的颗粒要 尽可能细小,能 充分浸泡在有机
得芳香油
溶剂中
1.粉碎、干燥 2.萃取、过滤 3.浓缩
评
选择培养基
加 加青 减 霉素 成 等抗 份 生素
加高浓度 不加氮 不加碳 以尿 食盐水 源(无 源(无 素为
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基础感知
4、利用稀释涂布平板法,如何计算样品 中的细菌数?(用公式表示)各字母所代 表的含义是什么?该方法统计出的菌落数 往往比活菌的实际数目少,为什么?
当两个或多个细胞连在一起时,平板上观察 到的只是一个菌落。
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土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
这就是整个实验操 作的流程,那么, 在这个实验中,我 们如何去做到无菌 操作呢?
导
回顾旧知
1.微生物的实验室培养,常用的灭菌方法?
干热灭菌法 灼烧灭菌法
高压蒸汽灭菌法
导
回顾旧知
2.腐乳制作中,豆腐与盐的比例?泡菜制作 中,清水与盐的比例?
豆腐:盐=5:1 清水:盐=4:1
历史上最早的应用的天然香料包括原始而未加工过的直接应用 的动植物发香部位,通过物理方法进行提取或精炼加工而未改 变其原来成分的天然香料。早在五千年前,中国人民对大自然 中芳香花卉所散发出来的“香气”,即有美的、愉悦的感觉, 就认为“香”是快感的享受。
制备以尿素为唯一 氮源的选择培养基。
微生物的培养与观察
菌落计数
评
土壤取样 制备培养基 样品稀释涂布平板 微生物的培养与观察
菌落计数
在这一步我们需 要注意些什么呢?
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基础感知
5、在对样品进行稀释的时候,细菌、放 线菌、真菌的稀释倍数分别为多少?
稀释倍数
目的
真 102、 保证获得菌落
菌
103、 104
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尿素分解菌的鉴定
在以尿素为唯一氮源的培养基 中加入酚红指示剂。培养某种细菌 后,如果PH升高,指示剂将变红, 说明该细菌能够分解尿素。