1 实验部分
1．1 仪器设备和试剂
1．1．1 仪器设备
751一GW 分光光度计。

惠普上海分析仪器有限公司；比色管，50 mL双刻度具塞比色管；
3 cm比色皿；容量瓶等实验室常用器皿。

1．1．2 试剂
除特别说明外．测定中使用光学纯水及分析纯试剂。

1．2 光学纯水的制备
将0．2um滤膜(细菌学研究中所采用的)在100 mL二次蒸馏水或去离子水中浸泡 1 h，用它过滤250 mL二次蒸馏水或去离子水，弃去最初的250 mL，制得光学纯水，以后用这种水配制全部标准溶液并作为稀释水。

1．3 标准溶液的配制
1．3．1 色度标准储备液
500度色度标准储备液：将(1．244~1．2446)g六氯铂酸钾(K2PtC16)及(1．000±0．001)g 六水氯化钴(C O C12·6H2O)溶于约500mL水中，加(99~101)mL盐酸(p=1．18 g／mL)并在1 000 mL的容量瓶内用水稀释至刻度。

将溶液放在无色、密封的玻璃瓶中．存放在暗处，温度不能超过30℃。

该溶液至少能稳定 6 个月。

1．3．2 色度系列标准溶液
在一组500 mL的容量瓶中．用移液管分别加入1．0、2．0、3．0、4．0、5．0、10．0、20．0、30．0、40．0及70．0 mL 储备液(1．3．1)，并用水(1．2)稀释至标线。

溶液色度分别为1、2、3、4、5、10、20、30、40、70度。

溶液放在密闭性好的无色玻璃瓶中，存放于暗处。

温度不超过30℃时，这些溶液可稳定1个月。

1．4 分光光度计波长的选择
色度测量是相对值，被测样品的色度是通过与作为标准色系列的已知色度进行比较而求得。

这种比较是通过751一GW分光光度计响应值而实现的，先用已知的标准色系列确定色度与吸光度之间的关系，为此，需要选择光度计对黄色调溶液吸光敏感的测定波长，使色度与吸光度之问的关系成直线关系．并尽可能不使直线偏离“0”点。

为选择波长．多次进行试验，在固定使用 3 cm比色皿的条件下．选择不同波长进行试验，比较试验结果的离散性．最后确定分光光度法测定色度的最佳波长。

1．5 标准曲线绘制
使用751一GW分光光度计，在光路中使用深紫色滤光片，选择波长339 nm，以光学纯水做参比，用3 cm比色皿测量标准色阶的吸光度，以色度为横坐标、吸光度为纵坐标绘制标准曲线，要求所得曲线的线性相关系数在0．999 9以上。

1．6 样品的取用
取50 mL透明的样品于50 mL比色管中，如样品色度过高，可少取样品，加光学纯水稀释后比色．将结果乘以稀释倍数。

若样品混浊，可先离心，取上层清液测定。

1．7 样品稀释色度准确性测定试验
取未知色度的样品．按1／2n方式进行稀释．配制成稀释样，测定各样品的吸光度与稀释倍数之间的线性关系。

1．8 注意事项
没作特别说明的色度测定试验，分光光度计使
用339 nm波长
（参考：分光光度法测定水样的色度曾凡亮，罗先桃）。