4）使用离心机要注意哪几个问题？
两侧必须配平，注意安全。
5）53WB 分光光度计的原理及操作注意事项是什么？ 原理：
分光光度计测量的是分子内电子跃迁产生的带状吸收光谱。根据不同的特征峰可以进行
定性测量，根据朗伯比尔定律可以进行定量测量。
注意事项：
溶液必须为均匀溶液，拿放石英皿要轻拿轻放，注意透光侧的光洁。
1.海藻糖含量的计算
舍去偏差较大的第三个数据点，作图如下：
0.9 0.319
Unknown 0.447
吸光度A
吸光度-糖含量标准曲线
0.35 0.3
0.25 0.2
0.15 0.1
0.05 0 0
y = 0.3653 x R²= 0.9812
0.2
0.4
0.6
0.8
1 糖含量ml
图 1. 吸光度-糖含量标准曲线
在拟合直线时选择了固定截距为 0。
标准曲线方程为 y=0.3653x，相关系数 R2=0.9812。
由标准曲线得到 0.447 吸光度对应的糖含量为 1.22ml。
则酵母菌中海藻糖含量为
2.实验结果与讨论
1.22 × 0.95 × 40 × 3
ω=
30
× 100% = 46.36%
第三个实验点出现了较大的偏差，分析可能的原因是试管内还有杂质，导致显色反应程
0
0.3
0.6
0.9
平均值
8. 教师审阅意见：
Unknown
3
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
第二部分：实验报告
二、实验记录
实验现象： 沸水浴加热中溶液由黄色变为绿色，浓度不同则颜色深度不同。 整理后的数据如下：
表三、实验数据整理
糖浓度/mL
0
0.3
0.6
吸光度
0
0.139
1.760
三、实验结果及讨论
称量药品一定要准确 加入蒽酮操作上需要尽快操作，但要确保安全 注意离心机与分光光度计的使用
6. 要采集的数据
温度，压力，湿度（有则记录），糖浓度，吸光度
7. 原始记录表
温度：
压力：
湿度：
5 未知样 1ml
1 8 10
2
糖浓度/mL 吸光度
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
表二、原始实验数据记录
度加剧。
4
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
3.思考题： 1）加蒽酮试剂时为什么盛有样品的试管必须浸入冰水中冷却？ 保证安全，防止过早进行反应。
2）煮沸样品时为什么“准确”煮沸 10min？ 由于蒽酮试剂与糖的显色强度随时间变化，所以要准确控制时间，本实验中 6min 即可。 3）在沸水浴中加热样品，为什么要打开试管盖？ 使得试管内外气压相等，沸水浴的温度即为其恒压沸点的温度。
六、指导教师批阅意见
表四、实验报告评分表
实验预习
实验记录
结果及讨论
自评 总分
实验原 预习思 实验现 原始数 计算举 数据图 结果讨
理
考
象
据
例
表
论
10
10
10
10
10
15
15
20
8
指导教师批阅意见：
5
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
教师签名 日期
6
沸水浴、冰水浴、53WB 分光光度仪器
↓ 称量 30mg 干酵母
↓ 加入 3mlTCAaq
↓ 离心，取上清液稀释 40 倍
↓ 配制蒽酮溶液
↓
1
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
取 5 支编号试管，加如下溶液
↓ 表一、溶液配制组成
编号
1
2
3
4
葡萄糖/ml
0
0.3
2.1 酵母菌中海藻糖→TCAaq
2.2 海藻糖→葡萄糖→糖醛
2.3 糖醛+蒽酮→蓝绿色复合物→分光光度计测量
3. 试剂与仪器
1） 化学试剂
2g/L 蒽酮试剂：称取 0.10g 蒽酮溶于 50ml80%（体积分数）H2SO4 中，0.1g/L 标准葡萄 糖溶液，5g/L 三氯乙酸水溶液（TCA）。
2） 测量仪器
实验 4 蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
化工专业实验报告
第一部分：实验预习
实验名称
蒽酮比色法测定酵母菌中海藻糖含量
一、实验预习
1. 实验目的
1.1 培养安全意识，注意安全；
1.2 掌握用三氯乙酸（TCA）抽提法提取酵母菌中海藻糖的方法；
1.3 掌握用蒽酮比色法测定海藻糖含量的原理和方法。
2. 实验原理
0.6
0.9
蒸馏水/ml
2
1.7
1.4
1.1
蒽酮/ml
8
8
8
8
总计/ml
10
10
10
10
↓ 立即放入冷水中，冷却后拿出混匀，在放入冷水中
↓ 打开试管盖，擦净外壁与试管盖的液体
↓ 沸水浴 6min，观察现象
↓ 放入自来水中冷却
↓ 测量吸光度，处理数据
↓ 整理好实验台 5. 注意事项 注意实验的人身安全与仪器安全
四、自评
这次实验在张老师的带领下收获颇多。首先在实验中老师反复强调了安全的重要性，这
让我加强了自己的安全意识。在实验流程的书写、数据处理的规范上老师也让我了解了正确
的做法，这些均对于我以后的科研生活有着很大的帮助，希望能够在以后的实验中越做越好。
五、参考文献
[1]王保国，化工过程综合实验（第 2 版），清华大学出版社，北京，2009 年 10 月。