Sample Processing (61%)
误差来源
(R.E. Majors, LC/GC Magazine, 2002)
时间消耗
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重要性
样品前处理在色谱分析过程中是一个既耗时又极易引进误差 的步骤，样品处理的好坏直接影响色谱分析的最终结果，因此 ，为了提高分析测定效率，改善和优化色谱分析样品制备方法 和技术是一个重要问题。
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SampliQ OPT-不怕干！
140 120 100 80 60 40 20 0
acetaminophen propranolol brompheniramine doxepin fluoxetine Dihydroxy naphthalene
DRY WET DRY WET DRY WET DRY WET DRY WET DRY WET DRY WET
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主要内容
1.样品前处理的重要性 2.样品前处理方法及比较 3.样品前处理一般性步骤 4.固相萃取技术 5.QuEChERS技术及应用
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样品前处理一般性步骤
提取
净化
测定
根据样品类别 和被分析物的 结构、极性等 理化性质选择 合适的提取溶 剂
离心 过滤 液-液萃取 SPE SPME ……
Carbon/NH2 (500mg/500mg) 适用于日本肯定列表方法
500mg carbon/500mg NH2, 6mL SPE cartridge, 30/pk
250mg carbon/500mg PSA, 6mL SPE cartridge, 30/pk
250mg carbon/500mg PSA, 6mL SPE cartridge, 30/pk
Carbon/NH2 SPE小柱是由石墨化碳黑和胺基填料组成的 双层复合材料组成的新型SPE小柱, 广泛适用多种样品基 质中农药的多残留分析
6cc Vac cartridge
Carbon 500mg 去除提取液中多种色素(如叶绿素、 叶黄素和胡萝卜素等
Frits
PSA填料500mg 经离子交换机制有效去除酸性干扰物 （如脂肪酸、有机酸、腐植质和某些 多酚类色素）
Data Management (27%)
Columns (11%)
Integration (6%) Instrument (8%) Collection (6%) Analysis (6%) Calibration (9%)
Operator (19%)
Sample Processing (30%)
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常见样品前处理技术包括:
固相 萃取 稀释
样品前 处理
沉淀
过滤
离心
液液 萃取
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方法
沉淀
选择性基础
溶解度
液—液萃取
固相提取 渗析/超滤 电泳 蒸馏/蒸发 超临界提取
样品在两相中的分配
样品在吸附剂上的吸附与分配 分子量与体积 电荷/淌度 沸点与蒸气压 样品在超临界流体中的分配
食品安全领域
烟草行业 环境保护
中草药研究 ……
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固相提取技术（SPE）：产品形式
小柱（cartridge） 96孔提取板（plate）
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常见固相提取小柱的构造
柱体 色谱柱床 (吸附剂) 过滤膜/筛板
插口/出液口Page 25固相提取技术的基本要求
样品必须呈液态 驱动力－操作方式 重力
5982-1111 5982-1132 5982-1135 5982-1165 5982-1160 5982-1182
Normal Phase (Polar) SiPhenyl Silica Diol Cyano Amino
C18EC
C8
C2
Mixed Mode SiC8/SCX EVDX
Ion Exchange Si-SAX Si-SCX
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原理及特点
利用杂质或目标化合物与样品基体溶剂和吸附剂之间亲 和力的相对大小差异实现净化分离。与传统的液液萃取相 比具有明显的优势。
更有效的是分析物与杂质分离 回收率、富集倍数高
特点
有毒溶剂用量少 无 相 分 离 操作简单、易自动化
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固相萃取的一般机理
固定相
化合物A
化合物B
强阴离子交换 (SAX)
强阳离子交换 (SCX) 混合模式
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吸附剂选择
正相填料 溶剂：正己烷，乙酸乙酯，二氯甲烷，丙酮等
填料：硅胶（ Silica ）/氰基/氨基/硅酸镁/氧化铝/石墨化碳黑
反相填料 溶剂：ACN/MeOH/水
填料：C18/C8/C2/苯基
离子交换填料 溶剂：缓冲液/盐流动相
1
mianserin
• 在填料干或湿的情况下都有较好的重现性及回收率
• 含有极性，碱性及疏水和中性几种化合物。
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聚合物SPE选择
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New！石墨化碳黑吸附剂
经过特殊工艺处理的石墨化碳黑（六角环结 构），解吸附效果比活性碳更好，避免了不 可逆吸附。相对于Florisil和Alumina来讲， 其极性弱（结构类似于芳香环），特别适于 吸附色素等杂环类化合物。
黑.
• 散装SPE填料和QuEChERS 填料– 多种可选
的分散剂填料，用户可自行填装；完整的 QuEChERS 方法所需的填料。
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聚合物
SampliQ OPT SampliQ pSCX SampliQ pWCX
NEW
SampliQ pSAX SampliQ pWAX
SampliQ PS-DVB
5982-1311 5982-1011 5982-1411 5982-1511 5982-2211 5982-1332 5982-1032 5982-1432 5982-1532 5982-2232 5982-1335 5982-1035 5982-1435 5982-1535 5982-2235 5982-1635 5982-1365 5982-1065 5982-1465 5982-1360 5982-1382 5982-1082 5982-1460 5982-2265 5982-2260 5982-1582 5982-2282
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SPE净化-改善灵敏度
鳄梨中的农残检测（ 未经 SPE处理） 鳄梨中的农残检测 （经过 SPE处理）
0
2 Time (min)
4
6
0
2 Time (min)
4
6
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主要内容
1.样品前处理的重要性 2.样品前处理方法及比较 3.样品前处理一般性步骤 4.固相萃取技术 5.QuEChERS技术及应用
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液液萃取
根据分析物在互不相溶的两相中的溶解度差 异来将分析物从一相提取至另一相中。
有机层

装置简单，操作容易 常被认定为成本低廉 费时费力
水层
常因乳化效益使相间分层不彻底，使得重复样的分析结果存在显 著偏差

若需萃取的样品体积大，则可能消耗大量的有机溶剂。由此可能 在购买、储藏、处置溶剂时花费庞大*。
注: 大量储存、使用和处置溶剂可对操作者的长期健康产生负面影响 ，并可带来火灾隐患。
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固相萃取技术 (SPE)
依据目标化合物在固定相和流动相间分配系数的不同将 其从液相提取至固定相中（ 本质上为色谱分离方法）
可同时取得对样品的净化与富集效果，彻底去除干扰物并浓缩样品 分析结果呈高度可靠性 使得检测灵敏度和选择性大大提高 明显延长色谱柱寿命，减小系统维修的频度 样品制备快速、涉及人工少、溶剂用量少 分析结果的精密度提高(偏差常 <5%) 多样化的产品设计迎合不同样品通量要求
为什么?
浓度太低- 被测物浓度低于定量限
样品太“脏”- 基质组分的存在影响样品测定
太“危险”- 污染物可能成为“色谱柱杀手”
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一个典型色谱分析中的误差来源和时间消耗对比
Contamination (4%)
Sample Introduction (6%) Chromatography (7%)
参数:
• 粒径25-35μm
• 孔径74-80Å using BET measure • 孔径1000Å using inverse size exclusion • 表面积475-505 m2/g • 颗粒质量控制 •遥感(大小) •光学显微镜(形状) •质谱(杂质)
聚合物质量控制:
成品柱子测试 •柱纯度测试(GC) •空管纯度测试 (GC) •物料重量测试 •柱子流阻 •萃取残留(%) •浑浊度 (NTU)
样品前处理技术及应用
Agilent Technologies
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主要内容
1.样品前处理的重要性 2.样品前处理方法及比较 3.样品前处理一般性步骤 4.固相萃取技术 5.QuEChERS技术及应用
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为什么要进行样品前处理？
样品收集 样品分析
X
原形样品不适合直接进行进一步分析!!!…
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SampliQ 产品填料类型
Silica
Reversed Phase (Non-Polar) C18 1ml 100mg, 100/pk 3ml 200mg, 50/pk 3ml 500mg, 50/pk 6ml 500mg, 30/pk 6ml 1000mg, 30/pk 96 Well Plate 50mg Bulk 25g Bottle
0.2 << K << 20
Digital chromatography (SPE) lies far outside this range: Retention Elution