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叶绿素a提取方案

盘星藻叶绿素a的检测方法
1、实验器材:紫外-可见分光光度计、比色皿、抽滤器、微孔滤膜、直径为47mm孔径为0.7um 的玻璃纤维滤膜、真空泵、低温冰箱(能控制在-40+1度)、电子天平、电热恒温水浴锅、温度计、离心管(10ml)
实验药品及试剂:95 % 乙醇
2、实验步骤
⑴样品富集:将微孔滤膜放置在连接有真空泵的抽滤器上,准确量取定量体积的混匀水样进行抽滤,抽滤时负压不应超过20kpa ,逐渐减压,在水样刚刚完全通过滤膜时结束抽滤。

用镊子小心将滤膜取出,将有样品的一面对折,用滤纸吸干剩余水分如样品不能及时提取,应将吸干水分的滤膜放入培养皿中,外面包裹一层铝箔,放入以下的冰箱中保存
⑵叶绿素a的提取:准确称取0 . 5 g新鲜样品于10 m L具塞离心管中,置冰箱中冷冻1 h , 取出后加入10 m L在水浴锅中加热至50度的95%乙醇中,充分振摇后于暗柜中静置3h , 取上清液测定。

⑶含量测定:分别以相应的提取液为空白, 扫描测定各种叶绿素提取液在645 n m和663 n m的吸收值A 645、A 6 63, 利用 A r no n 法计算叶绿素含量。

叶绿素a浓度( m g /L ):
C h la = 12 . 7 A 663 - 2 . 69 A 6 45
①双波长分光光度法同时测定叶绿素 a 、b 汪志国, 王静, 李国刚(中国环境监测总站,北京10 002 9)
②测定浮萍叶绿素含量的方法研究黄 帆, 郭正元, 徐 珍(湖南农业大学农业环保研究所, 湖南长沙41 012
8 )
③分光光度法测定水体中叶绿素含量的改进戴欣,杨航,石岩,鲁雪,王玲静,李聪(松辽流域水资源保护局松辽流域水环境监测中心,吉林长春130021 ;河海大学,江苏南京210098 )。

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