蟾蜍坐骨神经干标本的制备
121140066 许克波 B3
一、实验目的
1、离体标本实验(与在体标本实验的区别)
2、掌握锌铜弓导致生物电产生的原理
3、掌握离体标本的制备及手术训练
4、掌握剪刀的技用和双毁髓的意义
二、实验原理
1、锌铜弓的作用及原理
锌铜弓:在生理学实验中,锌铜弓是检验标本机能活性最常用而简易的刺激器。
由铜片和锌片两种金属制成。
锌铜弓具有刺激作用,是因为金属与溶液之间产生电位差,即电极电位。
通常将金属浸入电解质溶液中,如Zn便溶解而成Zn离子。
而在Zn的里面则形成负离子。
Cu在溶液中则相反,金属与溶液之间便产生了电位差——电极电位。
如果将Zn和Cu一端接触,则在接触部位电流由Cu向Zn方向流动;而在溶液中则相反,由Zn向Cu流动。
当锌铜弓接触组织时(注意:表面必须湿润),电流便沿Zn→可兴奋组织→Cu方向流动,而产生流动作用。
这样,锌铜弓好像一个电池,Zn如同其阳极,Cu好像阴极而发挥作用。
神经或肌肉的电刺激阈值非常小,所以仅用锌铜弓接触,即可构成刺激,以便检验组织的机能活性。
2、蟾蜍的毁髓及单毁髓和双毁髓及双毁髓的意义
蟾蜍破坏脑脊髓:取蟾蜍一只,用自来水冲洗干净。
右手握住蟾蜍,用食指压住头部前端使头前俯,中指、无名指捏住两前腿,无名指以及小指捏住两后腿,左手持针,当触及到两耳中间的凹陷处时,持针手即感觉针尖下陷,此处即是枕骨大孔的位置。
左手持针从枕骨大孔向前刺入颅腔,左右搅动捣毁脑组织,然后将刺蛙针退到枕骨大孔,不拔出而是将其尖转向后插入脊柱管中捣毁脊髓,插入椎管时,蟾蜍后肢立即失去紧张性,多数情况出现尿失禁。
若脑脊髓破坏完全,可见蟾蜍四肢松弛,呼吸消失。
单毁髓:如毁髓针确在颅腔内,实验者可感到针尖触及颅骨。
双毁髓:再将毁髓针退至枕骨大孔,针尖转向后方,与脊柱平行刺入椎管,以捣毁脊髓。
彻底捣毁脊髓时,可看到动物的后肢突然蹬直,而后瘫软如棉。
双毁髓的意义:这个实验主要是探讨神经纤维冲动产生、兴奋传递和肌肉收缩之间的关系,与神经中枢无关。
为了制备这个标本需要首先处死青蛙,双毁髓的意义就在于此,这种双毁髓的处死方法,简单易行,关键是相对比较人道。
3、坐骨神经干标本的制备和缝匠肌神经标本制备
坐骨神经干标本的制备:蟾蜍下肢背面向上置于蛙板上,剪去尾椎;标本腹面向上,用玻璃分针分离脊柱两侧神经丛,用线在近脊柱处结扎,剪断神经;将神经干从腹面移向背面。
标本背面向上固定,从大腿至跟腱分离坐骨神经。
坐骨神经标本置任氏液中备用。
三、实验器材及动物
蟾蜍、解剖器材、棉线、锌铜弓等。
四、实验结果
游离出来的蟾蜍坐骨神经干:
五、注意事项
(1)、避免蟾蜍体表毒液和血液污染标本,不可用金属器械触碰神经干。
(2)、在操作过程中,应防止标本表面干燥,用水或任氏液润湿,以免影响标本的兴奋性。
(3)、标本制成后放在任氏液中浸泡数分钟,使标本兴奋性稳定,再开始实验效果会较好。
(3)、锌铜弓使用前应适当润湿,但锌、铜两极不可直接或间接接触,形成闭合回路。
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