导致内质网中钙库耗竭和质膜中持续的钙内流，这更
能说明淤胆胆汁酸介导的Ｃａ２＋的释放来自细胞中的
钙库。而通过免疫荧光成像技术，也可发现淤胆胆汁
酸与细胞预培养１２ｈ后，同样也可引起异位表达的
ＧＦＰ－ＳＴＩＭ １重新分布【ｌ ３Ｉ，然而利胆胆汁酸与淤胆胆
分子结构和基因序列等尚未阐明，ＳＴＩＭ是钙库ｃａ２＋含
［Ｊ］．Ｂｉｏｅｈｉｍ Ｂｉｏｐｈｙｓ，２００８，１７８３（５）：８７４．８８５． ［１４３ Ｆａｓｏｌａｔｏ Ｃ，Ｎｉｌｉｕｓ Ｂ．Ｓｔｏｒｅ ｄｅｐｌｅｔｌｏｎ
１ｅａｓｅａｃｔｉｖａｔｅｄ ｃａｌｃｉｕｍ
ｔｒｉｇｇｅｒｓ
ｔｈｅ ｃａｌｄｕｍ
ｒｅ．
ｋｉｎａｓｅ Ｃ ｂｙ ｔａｕｒｏｌｉｔｈｏｃｂｏｌｉｃ ａｃｉｄ ｉｎ ｉｓｏｌａｔｅｄ
ＳＴＩＭｌ是调控ＳＯ（３机制的新靶点，在钙库耗竭的基础
钙库耗竭基础上，广泛分布于ＥＲ中的ＳＴＩＭＩ重新移
位到质膜与内质网连接处，形成泪孔，与质膜中相对应
的Ｏｒａｉｌ相互作用而激活ｓｏＣｌ ９Ｊ。
上，分布于整个内质网的ＳＴＩＭｌ重新分布，参与９０Ｃ的
激活，而利胆胆汁酸可使ＳＴＩＭｌ再聚集到毗邻质膜的 位置，这可能成为利胆胆汁酸激活ＳＯＣ的机制之一。 ４．２利胆胆汁酸激活ｃｄ＋内流的机制
收稿日期：２００９．０９．０９；修订日期：２００９．１０．２２ 作者简介：秦勇（１９８２一），男，在读硕士研究生。
Ａｒｏｍａｔａｒｉｓ等¨３Ｊ通过Ｈ４一ＩＩＥ鼠肝癌细胞和大鼠 肝细胞实验来研究胆汁酸是如何调控ＳＯＣ的，结果表
万方数据
第１期
秦勇，等．胆汁酸与钙池操作性钙通道关系的研究进展
６５
明１００～３００ｔｍａｏｌ／Ｌ的利胆胆汁酸和三磷酸肌醇 （ＩＰ３）都可展示相似的内向整流和反转电位；３００ｔｔｍｏｌ／ Ｌ的ＴＤＣＡ以及Ｔｇ都可造成胞浆内游离的钙离子浓
知在质膜中存在多种钙通道，其中钙池操纵的钙通道
（ｓｔｏｒｅ－ｏｐｅｒａｔｅｄ ｃａｌｃｉｕｍ ｃｈａｎｎｅｌ，ＳＯＣ）在调节肝细胞的 生理功能中发挥主要作用【５Ｊ５。目前所知胆汁酸对来自 于肝细胞及胰腺细胞储存库中钙离子释放的影响已得 到合理的描述［３－４，６Ｊ。但胆汁酸是否可调控ＳＯ（３，从而
诱导Ｃａ２＋内流的变化，目前尚未明了。本文就胆汁酸
［Ｃａ２＋］ｃｙｔ，迸一步升高，说明ＴＤＣＡ造成的Ｃａ２＋释放 是来自细胞内钙库。有学者研究了肝细胞中ＳＯＣ与 淋巴细胞和肥大细胞中的ＣＲＡＣ的电生理性质，通过 膜片钳技术，利用ＩＰ３激活鼠肝癌细胞Ｈ４一ｌｉＥ产生的
Ｏｒａｉｌ之间，在钙库耗竭的基础上，使ＳＴＩＭｌ与Ｏｒａｉｌ
相互作用；通过改变连接质膜与内质网膜之间的长度， 发现Ｏｒａｉｌ需要更大的空间，这说明Ｏｒａｉｌ仅仅只是较
［１３］Ａｒ田ｎａｔａｒｉｓ
ｅｄ
Ｅ Ｃ，Ｃａｓｔｒｏ Ｊ，Ｒｙｃｈｋｏｖ Ｇ Ｙ，ｅｔ ａ１．Ｓｔｏｒｅｏｐｅｒａｔ． Ｓｔｒｏｍａｌ
Ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ
Ｃｄ＋ｃｈａｎｎｄｓ ａｎｄ
Ｍｏｌｅｃｕｌｅ
ｏｎ
１
（ｓｒＩＭｌ）ａｒｅ
ｔａｒｇｅｔｓ ｆｏｒ ｔｈｅ ａｃｔｉｏｎｓ ｏｆ ｂｉｌｅ ａｄｄｓ
ｌｉｖｅｒ ｃｅｌｌｓ
大高分子化合物集群的一部分。由此可认为，利胆胆
汁酸与淤胆胆汁酸的作用效果是相反的，可能与对Ｏ． ｒａｉｌ朝内质网链接处的运动的影响、ＳＴＩＭｌ与Ｏｒａｉｌ 相互作用、Ｏｒａｉｌ开放的概率以及对较大高分子化合物 集群的不同作用有关。 综上所述，ＬＣＡ与其它淤胆胆汁酸激活抑制ＳＯＣ 的机制可能为：预培养的ＬＣＡ及其它淤胆胆汁酸可 诱导内质网钙库中Ｃａ２＋释放，导致ＳＴＩＭｌ再分布到 质膜与内质网的连接处，可能改变连接处的结构和或
重要的作用。因此，可认为利胆胆汁酸促使钙库耗竭， 激活Ｃａ２＋内流通过ＳＯＣ，进而增加［Ｃａ２＋］ｃｙｔ。
综上所述，ＴＤＣＡ和其它利胆胆汁酸激活ＳＯＣ机 制可能为：通过加强Ｃａ２＋外排以及抑制ＳＥＲＣＡ引导 内质网钙库中钙离子耗竭，导致内质网中的ＳＴＩＭ 互作用，激活ｓＯＣ。 ４．３淤胆胆汁酸抑制ｓ０Ｃ的机制 Ａｒｏｍａｔａｒｉｓ等【１３Ｊ发现，淤胆胆汁酸与细胞预培养 １２ｈ后，能抑制Ｃａ２＋内流通过ＳＯＣ，但能使细胞内游 离钙离子浓度增加；后又利用ＤＢＨＱ刺激肝细胞，没 有检测到钙库中Ｃａ２＋的释放，这说明要么在加入ＤＢ— ＨＱ之前细胞内钙库中的ｃｄ＋已被耗竭，要么是淤胆 胆汁酸与内质网相互作用导致ＤＢＨＱ对ＳＥＲＣＡ作用 的破坏。早前研究［１８－１９Ｊ发现淤胆胆汁酸可抑制钙泵
ＳＯＣ的定义及分子组成 ＳＯＣ是一类由细胞内钙库排空Ｃａ２＋后激活的、存
在于细胞膜上的特殊ｃｄ＋通道［８】８。最新研究表明，Ｏ— ｒａｉ多肽构成ＳＯＣ的微孔，而位于内质网中基质相互
相同的技术，可使３００ｍｒｄ／Ｌ熊脱氧胆酸激活的ＩＳห้องสมุดไป่ตู้Ｘ３
作用分子（盯ＩＭ
１）蛋白组成钙传感器引５。在内质网
的波幅和饼＋内流初始抑制率显著下降。因此，可说明
与钙池操作性钙通道的研究做一综述。 ２胆汁酸的分类
Ｂａｒｒｉｔｔ等幅Ｊ贝０通过ＳＴＩＭｌ．Ｃｈｅｒｒｙ质粒转染肝细胞，采用
共聚焦成像技术观察到，１ＤＣＡ也可引起ＳＴＩＭｌ再聚集
且聚集的位置位于质膜的下端，相似的结果也可发生在 毒胡萝卜内酯（Ｔｇ）诱导的ＳＴＩＭｌ再分布。而以前研究
正常人胆汁中的胆汁酸种类可分为：高疏水性胆 汁酸，可抑制胆汁流量（属胆汁淤积型）；较少疏水性胆
［Ｃａ２＋］ｃｙｔｔａ度增加，进而诱导ＳＴＩＭｌ的移位使质膜中
ｓ０Ｃ开放，致使胞外瞄＋内流，填充细胞内钙库中的钙
离子，继而使胆小管收缩，加强胆汁酸的排泄，减少胆汁 酸的淤积，进而减少了淤积的胆汁酸对胆管及肝细胞的
损害，为了解利胆胆汁酸如何在治疗胆汁淤积症发挥有
利的作用提供了一个分子基础上的可能机制。 ６结语 目前，对于ＳＯＣ调控机制仍然知之甚少，如ＳＯＣ的
ａｆｔｅｒ饼＋ｓｔｏｒｅ
ｄｅｐｌｅｔｉｏｎ
［Ｊ］．Ｐｒｏｃ Ｎａｔｌ
Ａｃａｄ
Ｓｅｉ ＵＳＡ，２００７，１０４（２０）：９３０１．９３０６．
流的利胆药物提供了理论和实验依据。
参考文献： ［１］１３ｅｕｅｒｓ
Ｕ，Ｐｒｏｂｓｔ Ｉ，Ｓｏｒｏｋａ Ｃ。ｅｔ ａ１．Ｍｏｄｕｌａｔｉｏｎ ｏｆ ｐｒｏｔｅｉｎ
ｒａｔ
６０２
文献标识码：Ａ
鲫：１０．３９６９／ｊ．ｉｓｓｎ．１００５—４０５７．２０１０．０１．０２７
文章编号：１００５．４０５７（２０１０）０１．００６４．０３
胆汁淤积症源于肝功能障碍或肝内外胆管梗阻，
其细胞毒性作用会造成肝损伤，最终导致肝功能衰竭
和死亡。胆汁酸可诱导肝细胞胞浆内游离钙离子浓度
４胆汁酸对ＳＯＣ的调控机制 ４．１利胆胆汁酸对ＳＴＩＭ １分布的影响 在肥大细胞、淋巴细胞、肝细胞和其它许多类型的 动物细胞中，在细胞内钙库耗竭的基础上，内质网中的
ｉｍａｇｉｎｇ ｒｅｖｅａｌｓ鸵．
ｑｕｅｎｔｉａｌ ｏｌｉｇｏｍｅｒｉｚａｔｉｏｎ ａｎｄ ｌｏｃａｌ ｐｌａｓｍａ ｌＴｌｅｌ－ｎｂｒｓ／ｌｅ ｔａｒｇｅｔｉｎｇ ｏｆ ｓｔｒｏｆＩｌａｌ ｉｎｔｅｒａｃｔｉｏｎ ｍｏｌｅｃｕｌｅ １
的药理作用，这为在基因的基础上发现敏感、特异的作
用于该通道或调控ＳＴＩＭ分子易位并人为控制Ｃａ２＋内
ＳＯＣ是必需的，进而促使［饼＋］ｃｙｔ浓度增加，使胆管收 缩【２１］。有人认为淤胆胆汁酸抑制∞＋内流通过ＳＯＣ
会导致细胞内钙稳态以及ＳＯＣ下游区钙信号通路的破 坏【１４Ｊ。这可能有助于进一步抑制胆汁流量，改变肝细
胞的生长环境，最终导致凋亡和坏死［２２】。而有研究利 用胆汁淤积症鼠模型证实，利胆胆汁酸能刺激胆汁流 量【２３ Ｊ。Ｏ’Ｌｅ删等１２４ Ｊ研究显示，在妊娠肝内胆汁淤积
汁酸，可加强胆汁流量（属促胆汁分泌型）［７｜。
３
表明ＳＯ（３能够通过瞄＋一ＡＴＰ酶（ｓＥ慰Ａ）抑制剂Ｔｇ、
２，５一二特丁基对苯二酚（ＣｌＢｌ｛Ｑ）及其它ＳＥＲＣＡ抑制剂
激活【１４－１５Ｊ。上述研究结果提示，眦可引起ＳＴＩＭｌ
再分布以及参与ＳＯＣ的激活。有研究［１６］表明，在大鼠 肝癌细胞１４４－ＩＩＥ中，用ＲＮＡ干扰（１强Ｘ／Ａｉ）技术来阻断 ＳＴＩＭｌ的基因表达可引起ＩＳＯＣ波幅大幅度减少，这个 ＩＳ（Ｘ３是由ＩＰ３和Ｔｇ诱导产生的。Ａｒｏｍａｔａｒｉｓ等［１３】利用
１
症（Ｉ四）、原发性胆汁肝硬化（ＰＢＳ）、原发性硬化性胆管
炎（ＰＳＣ）等肝脏疾病的早期应用１脱Ａ，将明显减少胆
红素、丙氨酸氨基转移酶及碱性磷酸酶的含量，达到治 疗胆汁淤积的效果。上述研究从生理、病理上显示利胆 胆汁酸能够通过耗竭细胞内钙库中的钙离子导致
聚集到细胞膜与内质网交接处，与质膜中的Ｏｒａｉ １相
抑制Ｏｒａｉｌ朝内质网链接处的运动和或对较大高分子 化合物集群其它部分的作用，抑制ＳＯＣ。
５利胆胆汁酸对胆汁淤积症的治疗作用 有研究显示，正常胆汁酸流量对Ｃａ２＋内流通过
［Ｃａ２＋］ｅｙｔ增加，触发钙振荡的开始［４１；相似的实验［１３】
也证实了钙振荡的诱发依赖于胞外Ｃａ２＋内流，Ｇｄ３＋可 减少钙振荡，这说明Ｃａ２＋内流通过Ｓ｜ＯＣ对细胞内钙 振荡的维持是必需。有研究【１７Ｊ显示ＳＯＣ激动剂能够 激发正常／缺血再灌注损伤肝细胞产生规律性钙振荡， 从而进一步证实ｓｏＣｓ在肝细胞钙振荡中起到了至关
汁酸都能细胞内钙库耗竭，但却起到相反的效果，是什
么调控机制导致的呢？Ｖａｍａｉ等［２０］利用化学诱导桥 接形成物技术进行了研究，这个形成物位于ＳＴＩＭｌ与
度［Ｃａ２＋］。计大量增加，而Ｇｄ３＋能抑制Ｃａ２＋内流［１６］，利 用Ｇｄ３＋的抑制，ＴＤＣＡ仍能引起［Ｃａ２＋］州短暂增加； 但用ＩＰ３诱导［Ｃａｚ＋］ｃｙｔ增加时，ＴＤＣＡ不能诱导
（［ｃａ２＋］ｃｙｔ）的改变，这种改变是由内质网（ＥＲ）中
Ｃａ２＋的释放和或钙内流的激活所造成的【ｌ ４Ｊ。而胞外 的钙离子主要是通过质膜中的钙通道进入细胞内，已