三、主要影响因素
4. 胚珠培养环境的设置 培养条件的设置对于胚挽救也有一定的影响。如合适的温度、 适量的光照及培养基适宜的pH 值都是胚挽救成功的重要条件。有 研究说明，常温、黑暗比低温、光照更有利于胚珠的发育。 5. 胚培苗的移栽及其管理 胚挽救苗炼苗移栽胚挽救育种的瓶颈环节。主要是因为挽救苗 由无菌容器向田间移栽的过程中经历了一个由半异养到自养、高湿 到低湿、恒温到变温、无菌到有菌的过程，环境条件发生了剧烈 的变化。
根据其外植体的不同，胚挽救技术包括子房培养、胚珠培养和胚培养。现在由于试验条 件的限制以及远缘杂交胚比正常胚弱小等原因，很难从子房中直接剥离出幼胚进行胚培 养，并且子房培养与胚珠培养和胚培养相比，实验操作较为简便，而且能够获得比较满 意的结果。因此子房培养应用相对要广泛一些。
胚挽救技术的应用 1、培育早熟品种 2、培育无核品种 3、克服远缘杂种不育 4、培育三倍体及其它多倍体新种质 5、克服多胚品种珠心胚的干扰
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无核葡萄的胚挽救技术
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无核葡萄的胚挽救技术
一、概念 二、方法步骤 三、主要影响因素 四、存在的问题及今后的研究方向 五、参考文献
一、概念
胚挽救（embryo rescue）
是指对由于营养和（或）生理原因造成难以播种成苗或在发育早期阶 段就败育、退化的胚进行早期分离培养成苗.
五、参考文献
[1] 唐冬梅，王跃进，赵荣华，潘学军，蔡军社，张剑侠，张朝红，骆强 伟.无核葡萄胚挽救中影响胚发育的因子.中国农业科学 2009,42(7):24492457. [2] 程和禾，吴雅琴，赵艳华.奥迪亚无核葡萄胚挽救技术研究[J].河北农业 科技，2008，12（11）：30-32. [3] 唐冬梅，蔡军社，骆强伟，等.用于无核葡萄选育的胚挽救技术研究[J]. 果树学报，2008，25（3）：316-321. [4] 程琳琳，王跃进，石艳，等.无核葡萄胚挽救影响因素的研究[J].西北 植物学报，2007，27（7）：1317-1322. [5] 范春霞，周燕，高述民，张小方.胚挽救技术应用于无核葡萄育种的研 究进展.《现代农业科技》,2009 ,9 :19-20.
培养室三角瓶→温室营养钵→苗圃地
三、主要影响因素
1. 优良的树种和品种(基因型）
为保证获得杂交后的合子胚，一定要用假单性结实的无核葡萄作 母本。在亲本选择时除保证无核性状外，选择并培育抗病、早熟大粒、 抗逆性强等优良性状是目前的育种方向。无核葡萄胚的发育受基因型 的严格控制。有研究者通过无核葡萄与有核葡萄胚挽救杂交后代的抗 寒性研究，证实了葡萄抗寒性具有母性遗传现象。因此，在进行葡萄 的抗寒性杂交选育中，一定要注意亲本特别是母本的选配。 2. 确定最佳胚挽救时期（胚龄） 不同品种，甚至同一品种的不同植株，同一植株的不同部位，其 胚发育期的长短是不同的。胚龄指从授粉开始到剥离胚培养的时间天 数。胚龄越小越难培养成功，且与胚培养成苗率呈正相关。因此，胚 龄是影响胚培养成功的关键因素之一。不同品种胚发生败育的时期不 同。应在胚发育到最高程度，但又尚未开始败育的时期进行培养。因 此，研究胚败育的过程，确定胚珠接种的最佳时期是胚挽救成功的前 提。
二、方法步骤
1、葡萄的杂交
采集花粉 去雄 授粉
2、实验 室胚挽救
4、移入大田
3、胚萌 发成苗
无核葡萄胚培养：
1、取幼果，灭菌 剖开果粒，取出胚珠 2、接种至胚珠发育液体培养基上
3、60天后，在解剖镜下 剖开胚珠，取出胚，接种 在固体胚萌发培养上
4、胚萌发长成正常苗
5、接至继代培育基上 继代扩繁
胚挽救试管苗的移栽：
四、存在的问题及今后的研究方向
胚挽救技术作为一种高效育种技术，在无核葡萄的品种选育中 得到了广泛地应用且进展迅速，不仅极大地拓宽了葡萄育种的范围 和效率，更缩短了育种周期，推动了葡萄育种的进程。但是，这项 技术还存在较多的不足，如虽然胚挽救技术较成熟，但葡萄无核性 状的遗传规律理论研究较少；应用于远缘杂交育种，供选群体无核 性状来源少且育种效率低，对不同无核葡萄的基因型还缺乏调节机 制研究；对不同葡萄无核品种的适宜接种时期以及幼胚营养水平和 培养条件深入研究不够；无核葡萄育种与常规有核杂交育种和分子 辅助标记选择技术结合不紧密等。 因此，立足已有的研究基础，胚挽救技术结合现代生物技术将 会大大地提高优良无核葡萄品种的选育效果，而精确的基因定位技 术和进一步完善并充分发挥无核葡萄胚挽救技术体系，是今后研究 努力的方向。
三、主要影响因素
3. 选择适宜的培养基、激素、糖水化合物及胚珠处理方式 无核葡萄胚挽救中选择适宜的培养基是获得成功的关键环节。在胚挽 救过程的不同培养阶段所选用的基本培养基类型不同。在胚珠培养阶段， 大多数研究者认为Nitsch 或NN 为胚发育的基本培养基效果良好，并经过 多年研究总结出了适合无核葡萄胚珠培养的ER 培养基。在胚萌发和成苗 培养阶段，多数研究者认为1/2MS 或Wood Plant（WP）培养基较好。经 研究比较ER 和Nitsch 两种固液双层胚珠发育培养基对胚珠萌发的效果， 结果发现后者更适宜于无核葡萄杂种胚的萌发和胚状体发生。因此，在胚 挽救过程中，注意基本培养基应随着胚的不同发育阶段而进行及时更换。 在胚挽救中，无核葡萄胚珠培养适合在较高的铵态氮的培养基上，在 培养基中适当添加活性炭和0.2~0.5mg/L 的BA 对无核葡萄的胚珠发育有促 进作用。为打破胚的休眠，可加入适宜浓度的GA 和IAA 取代低温处理。 诱导分化阶段可加入6－BA 和NAA。在幼胚生长中，附加碳水化合物如葡 萄糖和果糖等，既可提高培养基的渗透压，还可为胚的发育提供能量，对 胚性生长有利，但后期胚的萌发需降低渗透压。 切开胚珠可以改善胚与培养基之间的物质交流，横切的胚珠培养萌发 率最高。
单性结实型（Parthenocarpy） 受精卵形成的合子胚在发育过程中
(卵细胞不经过受精作用而直接发育成果实 ) 发生败育,至果实成熟时只留下种子 无核葡萄 残迹,杂交育种时以无核葡萄作母 本将难以得到杂交后代。所以常规 的无核育种方法都是以有核品种作 假单性结实型（Pseudo-Parthenocarpy ） 母本,无核品种只能作父本。但是这 即种子败育型（Stenospermocarpy ） 85% 样的杂交组合方式获得的后代中无 (虽受精，但受精后的胚很快停止发育导致无核果实产生) 核株系比率很低 。如果采用胚挽救 技术将合子胚在败育之前取出,在适 宜的条件下离体培养, 使其发育成 无核葡萄胚挽救技术 熟,并最终使胚萌发形成杂交单株, 是对假单性结实类型的无核品种，在其合子胚败育之前进行人工离体培 就可用无核葡萄品种作母本, 从而 养使其继续发育，最终萌发成苗，形成完整的植株。 使后代的无核比率大大提高。 之前，以有核材料（母本）×无核材料（父本）的杂交方式培育的无核葡 萄品种的无核比率很低，且选育1 个品种的周期非常长（10 年以上）。 现利用胚挽救方法可进行“无核×无核”方式杂交，通过胚挽救其后代来 培育无核品种，并结合现代生物技术，从而使无核比率成倍提高，且大大缩短 了品种的选育时间。自从1982 年Ramming首次报道使用胚挽救技术以来,很多 学者也开展了相关研究,并不断加以完善, 使这一技术在无核葡萄育种中得到了 广泛的应用
王跃进等于2000年首次开始选用中国野生葡萄作父本，与 欧洲无核葡萄进行杂交，通过胚挽救技术获得无核抗病后 代。
秦红无核
ห้องสมุดไป่ตู้
秦翠无核
植株生长旺盛，适宜棚架栽
培，单株产量15.8 kg，亩产 2133 kg左右，极丰产。较抗白 腐病、炭疽病，轻感霜霉病、 白粉病。适宜中长梢修剪，抗 病性及适应性均强，栽培上加 强肥水管理。