免疫细胞的分离与检测一、选择题（一）单项选择题（A型题）1．外周血中的单个核细胞主要是指A．淋巴细胞 B．嗜酸性粒细胞 C．单核细胞­淋巴细胞D．单核细胞 E．中性粒细胞2．分离人外周血淋巴细胞分层液的最佳密度为A．1.030 B．1.035 C．1.092 D．1.020 E．1.0773．用Ficoll­hypaque分层液分离PBMC，分离的PBMC层位于试管的A．血浆层之上 B．血浆层之中 C．血浆层与分层液之间D．分层液之中 E．试管底部4．用玻璃纤维或葡聚糖凝胶Sephadex­G10柱分离细胞时，从柱上洗脱下的细胞主要是 A．粒细胞 B．淋巴细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．B细胞5．能与SRBC结合形成E花环的细胞主要是A．T细胞 B．B细胞 C．单核细胞 D．粒细胞 E．血小板6．用小鼠抗人CD3单克隆抗体检测T细胞，其结果代表的是A．T细胞总数 B．Th细胞数 C．Ts细胞数 D．CD4 + 细胞数 E．CD8 + 细胞数 7．用尼龙棉柱分离细胞时，不易黏附尼龙棉纤维而被洗脱的细胞是：A．粒细胞 B．B细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．血小板8．表示淋巴细胞的活力常用A．活淋巴细胞占总淋巴细胞的百分比 B．活细胞浓度 C．淋巴细胞浓度D．活细胞和总细胞的比值 E．T细胞和B细胞的比例9．用腹腔渗出法可从动物的腹腔渗出液中分离出A．血小板 B．B细胞 C．单核细胞 D．T细胞 E．巨噬细胞 10．活细胞经台盼蓝染色后呈A．蓝色 B．棕色 C．红色 D．不着色 E．天青色11．荧光标记法计数外周血B淋巴细胞，检测的特有的表面标志是A．CD19 B．CD20 C．补体受体 D．SmIg E．FcR12．NK细胞特有的表面抗原是A．CD2 B．CD16 C．无特异的表面抗原 D．CD23 E．CD56 13．仅能使T细胞发生淋巴母细胞转化的因子是A．PHA B．PWM C．LPS D．ConA E．EBV14．能使B细胞和T细胞发生淋巴母细胞转化的因子是A．PHA B．PWM C．LPS D．SPA E．EBV15．检查体液免疫功能最常用的方法是A．血清免疫球蛋白定量测定 B．溶血空斑试验 C．B淋巴细胞计数D．淋巴母细胞转化试验 E．SmIgG测定16．溶血空斑试验用于检测下列何种细胞的功能？A．T细胞 B．B细胞 C．中性细胞 D．吞噬细胞 E．NK细胞 17．测定T淋巴细胞功能的体内试验是A．锡克试验 B．狄克试验 C．结核菌素试验D．天然血型抗体滴度 E．血清IgG测定18．正常人外周血T淋巴细胞转化率为A．＜40% B．40~50% C．60~80% D．80% E．＞90%19．常用检测细胞毒效应的方法是A． 3 H­TdR掺入法 B． 125 I释放法 C． 51 Cr释放法D．形态学检测法 E．CD8检测法20．包被有抗Ig抗体的亲和板，其吸附的是A．T细胞 B．B细胞 C．NK细胞 D．NKT细胞 E．吞噬细胞 21．Ficoll­hypaque液分离淋巴细胞是一种A．不连续密度梯度离心法 B．连续密度梯度离心法 C．亲和层析法D．离子交换层析法 E．自然沉降法22．Ficoll­hypaque淋巴细胞分离液的主要成分是A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇D．聚蔗糖+泛影葡胺 E．聚蔗糖+聚乙二醇23．Percoll分离液的主要成分是A．聚蔗糖 B．泛影葡胺 C．聚乙二醇D．聚乙烯吡咯烷酮 E．经聚乙烯吡咯烷酮处理的硅胶颗粒24．检测中性粒细胞杀菌功能的方法是A．NBT还原试验 B．白细胞计数 C．溶血空斑试验D．淋巴母细胞转化试验 E．补体介导的细胞毒试验25．MTT比色法检测IL­2活性，下列哪项是错误的？A．需要IL­2依赖细胞株B．增殖细胞具有吸收MTT的能力C．颜色的深浅代表细胞代谢活性的强弱D．可反映B细胞的功能E．可反映T细胞的功能（二）多项选择题（X型题）1．淋巴细胞分离液要求符合的条件有A．对细胞无毒 B．高渗 C．不溶于血液 D．无色 E．有合适的比重 2．与T细胞计数有关的表面抗原是A．CD2 B．CD3 C．CD4 D．CD8 E．CD193．与B细胞计数有关的表面标志是A．SmIg B．CD19 C．CD20 D．CD21 E．CD24．符合淋巴母细胞转化的形态学特征有A．细胞体积变小B．核仁明显、核染质疏松C．可见有丝分裂D．胞浆极少，呈天青色E．胞内可见空泡5．用酶联免疫斑点试验检测B细胞功能的优点有A．稳定、特异B．可检测抗体分泌细胞C．可检测抗体的分泌量D．可同时进行B细胞计数E．可同时检测不同抗原诱导的不同抗体的分泌6．细胞免疫功能测定包括以下哪些？A．T细胞计数 B．B细胞计数 C．T细胞功能测定D．Tc细胞效应测定 E．细胞因子测定7．检测淋巴细胞亚群常用的方法有A．免疫荧光法 B．流式细胞仪测定 C．酶免疫组化法D．放射免疫法 E．免疫金染色法8．细胞免疫功能体内试验方法有A．细胞毒试验 B．混合淋巴细胞反应 C．皮肤试验D．淋巴细胞增殖试验 E．接触性过敏试验9．T细胞增殖试验常用的检测方法有A．流式细胞仪法 B．形态学方法 C． 51 Cr释放法D．MTT检测法 E． 3 H­TdR掺入法10．检测吞噬细胞功能的方法有A．吞噬试验 B．杀菌试验 C．NBT还原试验D．化学发光测定法 E．趋化功能测定法11．淋巴细胞亚群的分离方法有A．E花环分离法 B．尼龙棉柱分离法 C．亲和板结合分离法D．免疫磁珠分离法 E．超速离心分离法12.T细胞数量检测包括A. T细胞增殖试验B.间接荧光免疫法C.酶免疫组织化学法D.微量细胞毒试验E.花环技术13.检测T细胞数量的花环试验有A.酵毌菌花环试验B.补体C3b花环试验C.E花环试验D.葡萄球菌花环法E.抗体致敏细胞花环法14.B细胞表面具有A.mIgB.CD抗原C.Fc受体D.补体受体E.EB病毒受体15.B细胞数量检测的方法包括A.mIg的检测法B.CD抗原检测法C.Fc受体检测法D. 补体受体检测法E.小鼠红细胞受体检测法16.B淋巴细胞功能的测定方法有A.B细胞增殖试验B.溶血空斑试验C.酶联免疫斑点法D.体内测定法E.形态学检查法17.中性粒细胞吞噬和杀菌功能的测定方法A. 形态学检查法B. 显微镜检查法C. 溶菌法D. NBT还原试验E. 化学发光测定法18.巨噬细胞功能的检测方法包括A.炭粒廓清试验B.吞噬功能检测C. 巨噬细胞溶酶体酶测定D.细胞毒作用测定E. 巨噬细胞促凝血活性测定二、填空题1．PBMC包括 和 。

2．在反相溶血空斑试验中，每一个空斑代表一个 。

3．B细胞表面特异的标志有 。

4．常用的测定淋巴细胞活力的方法是 。

5．淋巴细胞转化情况的判定方法有 、 和 。

6．淋巴细胞转化试验应用的同位素是 ，细胞毒试验应用的同位素是 。

7．分离外周血白细胞常用的方法是 和 。

8．去除白细胞悬液中残留红细胞的常用方法有 和 。

9．去除单个核细胞悬液中单核细胞的常用方法有 和 。

10．检测T细胞数量的花环技术包括 、 和 ；检测B细胞数量的花环技 术主要有 和。

三、名词解释1．外周血单个核细胞（peripheral blood mononuclear cell， PBMC）2．E花环试验（erythrocyte rosette test）3．淋巴母细胞转化试验(lymphoblast transformation assay)4．溶血空斑试验(hemolytic plaque assay)5．四唑氮蓝还原试验(nitroblue terazolium recovery assay，NBT还原试验)四、问答题1．简述T淋巴细胞转化的试验原理和镜下淋巴细胞转化形态学特征。

2．简述Ficoll­hypaque分离液分离PBMC的原理、步骤和注意事项。

3．叙述T细胞介导的细胞毒试验的原理、意义和方法分类。

4．测定吞噬细胞功能有哪些常用方法？参考答案与题解一、选择题（一）单项选择题（A型题）1.C2.E3.C4. B5. A6.A7.D8.A9.E 10.D11.D 12.C 13.A 14.B 15.A 16.B 17.C 18.C 19.C 20.B21.A 22.D 23.E 24.A 25.D（二）多项选择题（X型题）1.ACDE2.ABCD3.ABCD4.BCE5.ABCDE6.ACDE7.ABCE8.CE 9. BDE 10.ABCDE 11.ABCD 12.BCDE 13.CDE 14.ABCDE15.ABCDE 16.ABCD 17.BCDE 18.ABCDE二、填空题1. 淋巴细胞、 单核细胞。

2. 分泌Ig的细胞。

3. SmIg。

4. 台盼蓝染色法。

5. 形态学方法、 3 H­TdR 掺入法、MTT 检测法。

6. 3 H ， 51 Cr 。

7. 自然沉降法、聚合物加速沉降法。

8. 无菌蒸馏水低渗裂解法、0.83％氯化铵处理法。

9. 粘附去除法、羰基铁粉吞噬去除法。

10. E 花环试验、葡萄球菌花环法、抗体致敏红细胞花环法，EA 花环试验、EAC 花环试验。

三、名词解释1．PBMC ：外周血单个核细胞主要指淋巴细胞和单核细胞，是免疫学实验中最常用的细胞群，也是进行 T 细胞和B 细胞分离纯化的重要环节。

2．E 花环试验：T 细胞表面有特异性绵羊红细胞 (SRBC) 受体，即 E 受体。

将 T 细胞与 SRBC 按一定比 例混匀， 置4℃至少2h 或过夜， T 细胞表面的E 受体能与SRBC 结合形成以T 细胞为中心， 四周环绕SRBC 的花环样结构，镜检计数可得总花环(Et)形成率，亦即T 细胞的百分率。

3．淋巴母细胞转化试验：细胞在体外受到有丝分裂原或抗原的刺激后，细胞出现一系列的增殖反应，主要 表现为胞内蛋白质和核酸合成增加，并发生形态返祖变化，如细胞变大、胞质增多、胞质出现空泡、核染 色质疏松、核仁明显，这种淋巴细胞增殖反应又称淋巴细胞母细胞转化(lymphoblast transformation)。

4．溶血空斑试验：该方法用于检测实验动物抗体形成细胞数目。

其基本原理是抗体形成细胞分泌的 Ig 与 SRBC 上的抗原结合，在补体作用下出现溶血反应。

方法是将 SRBC 与其免疫的小鼠脾细胞、补体及适量 琼脂糖液混合倾注平板，或者将吸附有已知抗原的SRBC 与待检B 细胞、补体及适量琼脂糖液混合倾注平 板，温育一定时间，抗体形成细胞释放的抗体会使周围 SRBC 致敏，并在补体作用下出现肉眼可见的溶血 空斑，每一空斑中央含有一个抗体形成细胞，因此空斑数量即代表抗体形成细胞数。