弧菌科和气单胞菌科
选择性培养基: TCBS(硫代硫酸盐-枸橼酸盐-胆盐-蔗糖)琼脂平板 含亚碲酸钾的培养基:双洗琼脂 庆大霉素琼脂
El Tor生物型在血平板上可形成β-溶血
生物学性状 (培养特性)
霍乱弧菌在TCBS琼脂平板上形成发酵蔗糖的较大的黄色菌落
生物学性状 (培养特性)
➢ 霍乱弧菌在含 亚碲酸钾的琼 脂平板上将碲 离子还原成原 素碲,形成有 灰褐色中心的 菌落
鉴定 l)初步鉴定:与O1群和O139群抗血清(多价和 单价)凝集,菌落和菌体形态、氧化酶试验等 作出初步报告。 2)最后鉴定:根据纯培养后全面生化反应、血 清学分群及分型。
检验方法
鉴别试验:
霍乱红试验 粘丝试验 O/129敏感试验 鸡红细胞凝集试验 多粘菌素B敏感试验 第IV组霍乱弧菌噬菌体裂解试验 耐盐培养试验
2011
生物学性状(生化分型)
生物型:根据生物学特性分型
C h aracter
溶血(羊 RBC)
C lassical biotype
+
E 1 -tor b io ty p e
d
血凝(鸡 RBC)
-
+
V-P 试 验
-
Hale Waihona Puke +多粘菌素 B 敏感试验
+
-
第 IV 组 噬 菌 体 裂 解 试 验
+
-
第 V 组噬菌体裂解试验
霍乱肠毒素(CT, chloera toxin)
临床意义 (致病因素)
霍乱弧菌肠毒素(CE)
发病
临床意义(发病过程图示)
临床意义(发病机理)
cAMP
cAMP酶
临床意义(临床分期)
1、前驱期:
无明显前驱症状,或轻度腹鸣、腹胀和不适
临床意义(临床分期)
2、吐泻期:
持续2~3天,因剧烈吐泻造成大 量水分和电解质丧失。
其它弧菌
其它弧菌
拟态弧菌 创伤弧菌:我省沿海有致病性创伤弧菌报道多例 溶藻弧菌 河弧菌 弗尼斯弧菌 霍利斯弧菌 ……
气单胞菌属
气单胞菌属 豚鼠气单胞菌(A.caviae) 嗜水气单胞菌(A.hydrophila) 简达气单胞菌(A.jandaei) 舒伯特气单胞菌(A.schubertii) 易损气单胞菌(A.trota)
副溶血弧菌
副溶血弧菌
副溶血弧菌培养于TCBS中,显示绿色(蔗糖不发酵)菌落 (18小时,37℃)
副溶血弧菌 Vibrio parahaemolyticus
临床意义 具有嗜盐性,但不耐盐,主要存在于海产品中 主要引起食物中毒和腹泻,感染临床表现远较霍 乱轻 偶有致伤口感染和菌/败血症 毒素(TDH)溶血素(TRH)粘附致病
副溶血弧菌(生物学性状)
培养特性:
嗜盐,不耐盐(0%、1%、6%、8% 、 10%) 在TCBS培养基上:为蔗糖不发酵的绿色菌落 神奈川现象(Kanagawa phenomenon,KP) 在SS平板上:扁平、无色半透明、蜡滴状菌落,有辛辣
味,不易刮下,48h后牢固粘附在培养基上,部分菌株 不能生长。
-
+
临床意义(所致疾病)
• 肠道内感染(霍乱) • 肠道外感染(胃肠炎、伤口感染、中耳
炎、败血症等)
临床意义(致病过程)
低血容休克 酸中毒 呕吐 腹泻 肌肉痉挛
临床意义(临床表现)
剧烈上吐下泻,严重脱水、酸中毒、痉挛、尿闭、休克、死亡。
临床意义(流行史)
1817-1923 共6次 印度恒河三角洲 古典生物型 1961 第7次 印度尼西亚 El Tor生物型
1992.10 马德拉斯、孟加拉湾 O139
临床意义 (致病因素) 侵袭力
进入小肠,动力、菌毛、分泌粘液
穿过小肠粘膜表面粘液层
粘附于小肠粘膜上皮细胞刷 状缘的微绒毛上大量繁殖
霍乱肠毒素
MW:80000-90000 A1:活性亚单位 23000 A2:连接亚单位 5000 B:结合亚单位
临床意义 (致病因素)
临床意义(临床分期)
3、脱水虚脱期:
脱水貌,洗衣工手; 循环衰竭、代谢中毒、
急性肾衰; 水电解质平衡紊乱导
致肌肉痉挛。
4、恢复期:
各种症状趋于缓解, 但可出现发热
生物学性状 (纯培养革兰染色)
革兰阴性,弯 曲弧形或逗点 状,首尾相接 鱼群样平行排 列 单端极鞭毛, 有普通菌毛和 性菌毛
霍乱弧菌革兰染色
生物学性状 (纯培养扫描电镜)
描述:弯曲弧形或逗点状
霍乱弧菌的扫描电镜图(金属镀膜)
生物学性状 (电镜)
霍乱弧菌的鞭毛(↑)和它可溶解的鞘膜(↑↑)
负染,×3 100
生物学性状 (特殊染色×10,000)
霍乱弧菌的鞭毛染色
生物学性状 (培养特性)
兼性厌氧 pH6.8~10.2 (耐碱怕酸) 初次分离用pH8.5碱性蛋白胨水 经4~6h液体表面大量繁殖,形成菌膜
生物学性状(生化反应) 重要的生化反应:耐盐试验
霍乱弧菌 副溶血弧菌
耐盐试验(%NaCl) 0% 1% 6% 8% 10 + + ±- -
- + + +-
生物学性状(生化反应)
重要的生化反应
霍乱弧菌 副溶血弧菌 拟态弧菌
······ 麦氏弧菌
氧化酶 + + +
硝酸盐还原 + + +
-
-
检验方法
维隆气单胞菌(A.veronii):可分为嗜冷和嗜中
温菌群 沿海区5岁以下儿童易感,多为夏季腹泻
谢谢