课堂小结 1、小组汇报本次课实验的结果及分析失败成功的原因 2、作业：预习原子吸收分光光度检测技术。
1Hale Waihona Puke /9可 见 分 光 光 度 法 测 定 铁 的 含 量
光分析法模块之
任务 可见分光光度法测定铁的含量
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可 见 分 光 光 度 法 测 定 铁 的 含 量

教学目标
知识目标：掌握可见分光光度计测定铁离子的原理；掌 握优化显色条件的方法。 能力目标：能独立测出铁离子的最佳波长；会使用可见 光分光光度计、并能测定溶液中的离子浓度；会绘制曲 线图； 素质目标：养成节约卫生意识；安全规范操作意识；具 有较好的团队合作能力。
每加入一种试剂之前都应先摇匀(不要加盖)容量瓶中的
溶液；
(3) 用刻度吸管取标液时，应从满刻度处开始，放 出所需体积，以减小体积误差； (4) 每改变一次波长 , 都要用参比溶液调“ 0”和 “100%”。
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6 问题讨论
（1）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺 序可否颠倒？为什么？ （2）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波
在测定微量铁时，通常以盐酸羟胺或抗坏血酸还原 Fe3+ 为 Fe2+ ，在 pH=2 ～ 9 范围内，使 Fe2+ 与邻二氮菲反应 生成稳定的橙红色配合物[Fe(C12H8N2)3]2+，其lgKf=21.3，
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λmax=510 nm。反应式如下：
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（2）制作吸收曲线时，为什么每改变一次入射光波 后，都必须用参比溶液调零？ 答：由于比色皿和参比溶液对不同波长的入射光有 不同的反射和吸收，所以当测量波长改变时，都要用参
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比溶液进行调零，这样才能测出有色物质在该波长下的
实际吸光度。
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实验 可见分光光度法测定铁的含量
1 实验目的
(1) 掌握用邻二氮菲显色法测定铁的原理和方法。
(2) 学习吸收曲线的制作和适宜测量波长的选择。
(3) 进一步熟练掌握分光光度计的使用方法。
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2 实验原理
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后，都必须用参比溶液调零？
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7 参考答案
（1）显色时，还原剂、缓冲溶液、显色剂的加入顺 序可否颠倒？为什么？ 答：顺序不能颠倒，因为显色反应必须在一定的条
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件下进行，才能取得较好的显色效果。被测物质和各种
试剂的加入顺序往往需经反复试验才能确定，所以对已 经确定了的试剂加入顺序不能随意改动。
460 470 480 491 500 510 520 530 540 550 560
440
450
（2）根据测量数据As，Ax及溶液的稀释情况，用比较 法算出待测铁溶液中铁的含量
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5 注意事项
(1) 认真读懂仪器使用说明，方可操作仪器；
(2) 配置溶液时，加入试剂的顺序不能随意改变。
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课程引入
1、课程回顾
2、问题：铁是人体不可缺少的矿物质元素，特别 是婴幼儿在生长发育阶，用光度法测定段是不可 或缺的。铁离子吸收波长为538nm,铁离子含量检 测我们可不可以用光度法呢？可以的话是用紫外 分光光度计还是可见分光光度计呢？ 答案：可以用光度法测定。选择可见光分光光 度计测定
3 实验步骤
1．测量溶液的配制 按表1配制测量溶液，试剂按从左往右的顺序加，每加一 种试剂之前都应先摇匀(不要加盖)容量瓶中的溶液。
表1 测量溶液的配制
试 液
标准 铁测 量液 参比 溶液 试样 V/mL 标准铁 溶液 5.00 待测铁 溶液 0 加去离 子水至 20 H2SO4 溶液 5滴 抗坏血 酸溶液 1.5 HAc-NaAc 溶液 5.0 邻二氮 菲溶液 3.0 定容 体积 50.00
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0 0
0 5.00
20 20
5滴 5滴
1.5 1.5
5.0 5.0
3.0 3.0
50.00 50.00
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2. 吸收曲线的测量 用两个1 cm比色皿分别盛标准铁测量液和参比溶 液，在440～560 nm之间，每隔10 nm测1次吸光度。 3．试样溶液的测量 根据前面的测量结果，选取最大吸光度所对应的
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波长λmax为入射光波长。再取1个1 cm比色皿装入试样
测量液，在 λmax 下用参比溶液调零后，分别测量标准 铁测量液的吸光度A：和试样测量液的吸光度Ax，读数 准确至±0.001。
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4 实验结果
（1）填写表2
表2
λ/nm A
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[Fe(C12H8N2)3]2+ 溶液吸收曲线的测定