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采血时要注意
采血场所有充足的光线；室温夏季最好保持在 25～28℃，冬季，15～20℃为宜； ② 采血用具有采用部位一般需要进行消毒； ③ 采血用的注射器和试管必须保持清洁干燥； ④ 若需抗凝全血，在注射器或试管内需预先加入 抗凝剂。
①
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１．取少量血 部位 ａ．尾静脉 ｂ．耳静脉 ｃ．眼底静脉丛 d．舌下静脉 动物种类 大鼠、小鼠 兔、狗、猫、猪、山羊、绵羊 兔、大鼠、小鼠 兔
e．腹壁静脉
青蛙、蟾蜍
f．冠、脚蹼皮下静脉 鸡、鸭、鹅
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２．取中量血
部位 ａ．后肢外侧皮下小隐静脉 ｂ．前肢内侧皮下头静脉 动物种类 狗、猴、猫 狗、猴、猫
ｃ．耳中央动脉
ｄ．颈静脉
兔
狗、猫、兔
ｅ．心脏
ｆ．断头 ｇ．翼下静脉
豚鼠、大鼠、小鼠
大鼠、小鼠 鸡、鸭、鸽、鹅
ｈ．颈动脉
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⑵ 大鼠日龄与体重的对应 日龄/d 体重/g 日龄/d 体重/g 初生 10 20 30 40
6～7 17～25 35～50 55～90 100～150 50 60 70 80
150～210 170～240 210～270 240～320
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二、豚鼠 一般老年豚鼠牙齿和趾爪长，被毛稀疏无光泽， 眼神呆滞，行动迟缓。而年轻豚鼠牙齿短白，爪短 软，眼睛圆亮，行动敏捷，被毛有光泽，且紧贴身 体。同样，也可根据体重来推断大致年龄。同日龄 豚鼠，雌性体重略高于雄性。与大鼠一样，其体重 受多种因素的制约。实验对年龄要求比较严格时， 必须由卡片记录提供准确年龄。
第九章 动物实验基本操作技术
本章主要内容
实验动物的抓取与固定 性别鉴定 常规采血方法 年龄的大致判断 给药途径与方法 妊娠检查 麻醉方法 分组与编号 处死方法
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第一节 实验动物的抓取与固定
一、大、小鼠的抓取固定
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小 鼠 固 定 盒 固 定
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三、家兔的采血方法 1．心脏采血 2．耳中央动脉采血 3．耳静脉采血
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四、狗、猫的采血方法 1．后肢外侧跗外静脉、内侧隐静脉、前肢内侧 皮下头静脉采血 2．股动脉采血 3. 心脏采血同大、小鼠心脏采血 4．耳缘静脉采血同兔耳缘静脉采血
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（三） 当每个动物一组时： 例：设有A，B，C，D，E，F代表的6只家兔，试 用完全随机法将其每只分为一组。 分组方法：从随机数字表上用铅笔任指一点，若 为第21行第17列的33，则从33向左抄用6个数字，然 后分别以6，5，4，3，2，l除之。凡除不尽的，即 将余数写下。除尽的，写余数时即将其除数写下。 如下：
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年龄 2～4个月 4～6个月 1岁 2岁
犬齿更换和磨损情况 更换门齿 更换犬齿(白，牙尖圆钝) 牙长齐，洁白光亮。门齿有尖突 下门齿尖突部分磨乎
2个月以下 仅有乳齿(白、细、尖)
6～10个月 更换臼齿
3岁 4～5岁 6～8岁 9～10岁 10岁以上
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上、下门齿尖突大部分磨平 上、下门齿开始磨损呈微斜面，并发黄 门齿磨成齿根，犬齿发黄、磨损 唇部、胡须发白 门齿磨损，犬齿不齐全，牙根黄，唇边胡须全白
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五、犬 犬的年龄主要以牙齿的生长情况、磨损程度、 外形颜色等情况综合判定。仔犬在出生后十几天 即开始生出乳齿，2个月以后开始由门齿→犬齿→ 臼齿顺序逐渐更换为恒齿，8～l0个月齿换齐。但 犬齿需要1岁半以后才能长坚实。饲养场饲养的品 种犬，可以根据记录，明确了解年龄，而收购的 杂种犬就无法知道确切年龄。实际中，可根据犬 齿更换和磨损情况，估计犬的年龄。
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第六节 常规采血方法
一、大、小鼠的采血方法 1．颈静脉或颈动脉采血 2．股静脉或股动脉采血 3．心脏采血 4．尾部采血 5．眼眶采血 6．断头取血
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颈静脉或颈动脉采血
尾 部 采 血
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心脏采血
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二、豚鼠的采血方法 1．耳缘剪口采血 2．心脏采血方法同大、小鼠。 3．股动脉采血方法同大、小鼠。 4．后肢背中足静脉采血
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大鼠固定盒固定
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二、豚鼠的抓取固定法
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三、家兔的抓取固定法
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第二节 性别鉴定
一、大、小鼠的性别鉴定
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二、兔的性别鉴定
Female
Male
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第三节 年龄的大致判断
一、大、小鼠 1. 根据形态鉴定日龄（大、小情况基本一样）
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第四节 妊娠检查
雌性动物妊娠后会发生一系列的复杂变化。为 了在配种以后能及时掌握雌性动物是否妊娠、妊 娠的时间及胎儿和生殖器官的异常情况，采用临 床和实验室的方法进行检查，称为妊娠检查，又 称妊娠诊断(pregnancy diagnosis)。通过妊娠检查， 可以及时地对雌性动物加强护理或再次配种，以 保护母体和胎儿的正常发育，避免胎儿早期死亡 和流产及减少繁育时间的损失。妊娠检查不但要 求准确，且及早确诊更为重要。
日龄/d 初生 7 20 30 60
体重/g
日龄/d
60～80 100～120 150～200 170～220 240～300
90 120 180
体重/g
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330～400 400～470 520～600
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三、家兔 家兔的门齿和爪随年龄增长而增长，是年龄鉴 别的重要标志。青年兔门齿洁白，短小，排列整 齐；老年兔门齿暗黄，厚而长，排列不整齐，有 时破损。白色家兔趾小基本呈红色，尖端呈白色。 1岁家兔红色与白色长度相等；1岁以下，红多于 白；1岁以上，白多于红。还可根据趾爪的长度与 弯曲度来区别。青年兔趾爪较短，直平，隐在脚 毛中，随年龄的增长，趾爪露出于脚毛之外，而 且爪尖钩曲。另外，家兔皮薄而紧，眼神明亮， 行动活泼的为青年兔；皮厚而松，眼神颓废，行 动迟缓的为老年兔。
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如果甲组多两个，则接下去抄两个数。分别 以8，7除之，余数即指要调入乙组的第几个甲， 余此类推。最后各组的鼠数就相等了。调整后 各组鼠的编号为： 组别 鼠的编号 甲组 3 4 5 7 8 12 乙组 1 2 6 9 10 11
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(二)当分为三组时 例：设有雄性的SD大鼠12只，按体重大小依次 编为1，2，3，…，12号，试用完全随机的方法， 分为A、B、C三组。 分组方法：假设所定的点是随机数字表第40行17 列的08，则从08开始，自左到右抄12个随机数字： 动物编号： 1 2 3 4 5 6 7 8 9 10 11 12 随机数字：08 27 01 50 15 29 39 39 43 79 69 10 除 3 余数： 2 0 1 2 0 2 0 0 1 1 0 1 组 别： B C A B C B C C A A C A 调整组别：B
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二、编号标记方法 实验动物分组后，为了区分、观察并记录每个个 体的反应情况，必须给每只动物进行编号标记。 1．体表颜料着色法 一般对短期试验的白色动物 可用颜料涂搽被毛的方法标记。常用的涂染化学药 品有： 红色：0.5％中性红或品红溶液； 黄色：3％～5％苦味酸溶液或80％～90％苦味酸 酒精饱和液； 咖啡色：2％硝酸银溶液； 黑色：煤焦油酒精溶液。
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妊娠检查方法有
① 外部检查法
② 摸胎法
③ 阴道检查法 ④ 直肠检查法 ⑤ 超声波检查法 ⑥ 孕酮含量测定法
⑦ 青蛙试验
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第五节 分组与编号
动物实验之前，必须对实验动物进行随机分组 和编号标记，这是做好实验和实验记录的前提。 一、随机分组 （一） 当分为二组时 例：设有雄性Wistar大鼠12只，按体重大小依 次编为1，2，3，…，12号，试用完全随机的方法， 分为甲、乙两组。 分组方法：假设所产生的点是随机数字表上第 21行第31列的78，则从78开始，由上向下抄12个 随机数字，如下：
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采血方法的选择，决定于实验目的所需血量以及 动物种类。凡用血量较少的检验如红、白细胞计数、 血红蛋白的测定，血液涂片以及酶活性微量分析法 等，可刺破组织取毛细血管的血。当需血量较多时 可作静脉采血。静脉采血时，若需反复多次，应自 远离心脏端开始，以免发生栓塞而影响整条静脉。 而研究毒物对肺功能的影响、血液酸碱平衡、水盐 代谢紊乱，需要比较动、静脉血氧分压、二氧化碳 分压和血液pH值以及 K+、Na+、Cl-离子浓度，必须 采取动脉血液。
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以3除各随机数字，若余数为l，即该鼠归A组；余 数为2，归人B组；余数为3，归入C组。结果A组为4 只，B组为3只，C组为5只。C组多一只应调入B组。 方法同上。仍采用随机方法；从10后面接着抄，为 61。除以5，余数为1，则将第一个C，即第2号鼠调 入B组。调整后各组鼠的编号如下： 组别 鼠的编号 A组 3 9 10 12 B组 l 2 4 6 C组 5 7 8 11 对于将动物随机分为四组或更多组原理基本一致
日龄/d 1 3 4 5 外观形态特征 仔鼠裸体鲜红 耳壳露出表皮 脐带瘢痕脱落 能翻身
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能爬行