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交叉配血试验(凝聚胺方法)

交叉配血试验(凝聚胺方法)
一、试剂储存条件及有效期
未开封试剂应贮存于2~25℃、相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体的室内;已开封试剂应贮存于相对湿度不大于80%,无腐蚀性气体和通风良好的室温环境,试剂用后应及时拧紧瓶盖保存;未开封试剂的有效期为二年,在有效期内的已开封试剂应在开封后的6个月内使用完。

二、样本要求
1、新鲜血清、含EDTA抗凝血浆、3%-5%的红细胞悬液。

2、不能使用溶血标本及含枸橼酸钠、肝素抗凝血浆标本。

三、检验方法
1、取试管二支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2滴,加供血者 3-5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1 滴,次侧管反之。

2、各加 LIM0.7ml,混合均匀后,再各加 Polybrene2 滴,并混合均匀。

3、用血库离心机 3400 转/分离心 10 秒,然后把上清液倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml 液体。

4、轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。

5、最后加入 Resuspending2 滴,轻轻转动试管混合并涂片,显微镜下观察结果:在 30 秒-1 分钟内凝集散开,代表是由 Polybrene 引起的非特异性聚集,配血结果相合;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。

如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。

四、注意事项
1、可以用含EDTA之血浆代替血清使用。

2、若病人血清(血浆)含肝素,如洗肾患者,须多加4-6滴Polybrene溶液以中和肝素。

3、本试剂盒的操作方法也适用于抗体鉴定。

4、若试剂使用前为低温贮存,请恢复室温再行操作。

5、加做辅助性抗球蛋白试验,目的是增加检测抗-K的敏感性,对检测其他红细胞抗体无帮助。

6、在冬天室温极低的情况下,操作交叉配血试验,某些病人血清中可能含有寒冷凝集素等因素,面导致假阳性的结果出现。

若有此怀疑,建议在最后滴入Resuspending时,将试管立即置入37摄氏度水浴中,轻轻转动试管混合,并在60秒内观察结果。

7、红细胞抗原检测步骤同抗体筛检试验,其检测标准血清用已知标准血清。

8、可使用IgG抗D抗体(效价≥64)与RhD阳性红细胞反应做阳性对照试验,测试本试剂的有效性。

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