大吸收波长。 3.能够制备标准曲线，并能应用标准曲线对样品
进行定量分析。 4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的
吸光度。
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第一节 光谱分析法概论
第一节 光谱分析法概论 一、电磁辐射与电磁波谱 电磁辐射：电磁辐射，也叫电磁波，具有波粒二象性。
c＝λυ E＝hυ
电磁波谱：把电磁辐射按照波长大小顺序排列起来，就 称为电磁波谱。紫外光区和可见光区仅是电磁波谱中的 一小部分。
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第二节 紫外-可见分光光度法
五、吸收光谱曲线 概念：以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标所描
绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。 特点:
A．转动能级跃迁
B．振动能级跃迁
C．电子能级跃迁
D．以上都能发生
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第二节 紫外-可见分光光度法
二、透光率与吸光度
I0＝Ia + It + Ir I0＝Ia + It 透射光强度It与入射光强度I0 的比值称为透光率或透光度T。
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第二节 紫外-可见分光光度法
对透光率的倒数取对数，称为吸光度即：
二者的关系：

E1% 1cm
M 10
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第二节 紫外-可见分光光度法
课堂互动
用双硫腙测定Cd2+溶液的吸光度A时，Cd2+
（Cd的原子量为112）的浓度为140μg/L， 在λ＝525nm波长处，用L＝1cm的吸收池，
测得吸光度A＝0.220，试计算摩尔吸光系数
和百分吸收系数，实验中应选用哪种材质的 吸收池盛装溶液？
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第二节 紫外-可见分光光度法
课堂互动 您能说出朗伯-比尔定律的意义
及应用条件吗？
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第二节 紫外-可见分光光度法
四、吸光系数
摩尔吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度 为1 mol/L，液层厚度为1cm时所测得的吸光度称 为摩尔吸光系数，常用ε表示 。
百分吸光系数：在入射光波长一定时，溶液浓度 为1 ﹪（W/V）、层厚度为1cm时所测得的吸光度 称为百分吸光系数，常用E11c%m 表示。
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第一节 光谱分析法概论
三、紫外-可见分光光度的特点 1. 灵敏度高 2. 准确度高 3. 精密度好 4. 选择性好 5. 仪器设备简单，价格低廉，易于普及；操作简
便，测定快速 6. 应用范围广泛
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第二节 紫外-可见分光光度法
第二节 紫外-可见分光光度法
一、紫外-可见吸收光谱的产生
当分子（或离子）受到光照射时，能够吸收具有一 定能量的光量子，由能量较低的基态能级E1跃迁到 能量较高的激发态能级E2 ，即物质对光具有选择 性吸收。
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第二节 紫外-可见分光光度法
朗伯-比尔定律不仅适用于可见光，而且也适用于紫 外光和红外光；不仅适用于均匀、无散射的溶液，而 且也适用于均匀、无散射的固体和气体。
实验证明：溶液对光的吸光度具有加和性。如果溶液 中同时存在两种或两种以上的吸光性物质，则测得的 该溶液的吸光度等于溶液中各吸光性物质吸光度的总 和，即： A（a+b+c）＝Aa＋Ab＋Ac
A lgT
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第二节 紫外-可见分光光度法
三、朗伯-比尔定律 当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有
吸光性物质的溶液时，在入射光的波长、强度及 溶液的温度等条件不变的情况下，该溶液的吸光 度A与溶液的浓度c及液层厚度L的乘积成正比， 即 A＝K·L ·c 。 朗伯-比尔定律是定量分析的理论依据。
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第一节 光谱分析法概论
表9-1 电磁波谱分区表
电磁辐射区段
射线
X射线 远紫外辐射 紫外辐射 可见光区 近红外辐射 中红外辐射 远红外辐射 微波区 无线电波区
波长范围 10-3~0.1nm 0.1~10nm 10~200nm 200~400nm 400~760nm 0.76~2.5μ m 2.5~50μ m 50~500μ m 0.3mm~1m 1~1000m
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◆知识要求
1．掌握朗伯-比尔定律概念、表示及条件，吸光系数和 吸收光谱的意义、表示，常用的定量分析方法原理和 应用。
2．熟悉紫外-可见吸收光谱的产生机制、分光光度计的 基本结构、偏离朗伯-比尔定律的主要因素。
3．了解光谱分析法的分类、测量条件的选择、定性分析 的依据和方法。
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◆能力要求
1.能够用朗伯-比尔定律解决定量计算问题 。 2. 能 够 绘 制 吸 收 光 谱 曲 线 ， 找 出 被 测 物 质 的 最
能级跃迁的类型 原子核能级 内层电子能级 内层电子能级 价电子或成键电子能级 价电子或成键电子能级 涉及氢原子的振动能级 原子或分子的振动能级 分子的转动能级 分子的转动能级 磁场诱导核自旋能级
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第一节 光谱分析法概论
二、光谱分析法的分类 发射光谱法：物质的原子、分子或离子在一定条件
下，由低能态（基态）跃迁至高能态（激发态）， 再由高能态跃迁至低能态，同时产生电磁辐射，根 据这种光谱而建立的分析方法称为发射光谱法。 吸收光谱法：利用物质对电磁辐射的选择性吸收而 建立的分析方法称为吸收光谱法。紫外-可见分光光 度法是其中重要的一种方法。
◆学习目的
通过学习光谱分析法概论、紫外-可见分光光度法 的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误 差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光 学分析法的知识体系，熟悉紫外-可见分光光度法 的实际应用，会用紫外-可见分光光度计测定溶液 的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学 习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波 谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检 查和含量测定方法奠定基础。
2．下列叙述错误的是
A．光的能量与其波长成反比
பைடு நூலகம்
B．有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈
C．物质对光的吸收有选择性
D．光的能量与其频率成反比
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第二节 紫外-可见分光光度法
课堂互动
3．紫外-可见分光光度法属于
A．原子发射光谱法
B．原子吸收光谱法
C．分子发射光谱法
D．分子吸收光谱法
4．分子吸收可见-紫外光后，可发生哪种类型的 分子能级跃迁
紫外-可见光的能量(h)与分子（或离子）发生电 子能级跃迁前后的能量差（E2-E1）恰好相等，电磁 辐射与被测物发生能量交换，产生紫外-可见吸收 光谱。
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第二节 紫外-可见分光光度法
课堂互动
1．紫外-可见光的波长范围是
A．200~400nm
B．400~760nm
C．200~760nm
D．360~800nm