蔬菜中吡虫啉残留检测研究
摘要：果蔬中的农药残留是目前影响食品安全的主要因素之一，特别是中国加入WTO以来，由于果蔬中农药残留超出标准而影响产品出口的事件时有发生，这严重地阻碍了我国对外贸易的发展；另外，农药及其残留也会对人体产生毒害作用，严重危害国民健康。
吡虫啉（imidacloprid）又称咪蚜胺、蚜虱净，是国内近年发展较快的一种新型硝基亚甲基类杀虫剂，主要通过选择性地抑制昆虫烟酸乙酰胆碱酯酶受体，阻断神经系统传导，造成死亡，具有内吸、触杀和胃毒作用，可用于种子和土壤处理及直接喷雾，广泛用于水稻、小麦、蔬菜、果树、棉花、烟草等多种作物上，对飞虱、粉虱、蚜虫等刺吸式口器害虫及其抗药性种群具有优异的防治效果，具有速效、高效、持效期长、使用成本低等特点。
吡虫啉对水稻、棉花、小麦等作物的前期病虫防治有极高的综合控制能力。
但是由于大量使用，某些地区烟粉虱、银叶粉虱、灰飞虱、桃蚜、烟蚜等害虫的田间种群已经对吡虫啉产生了不同程度的耐药性或抗药性，特别是大棚和大田蔬菜、瓜类、果树上白粉虱和蚜虫及棉蚜等害虫对吡虫啉产生抗性的风险较大。
因此使用吡虫啉防治这类害虫时，为了提高防治效果而加大使用剂量，从而容易造成其在农作物上的残留。
因此对蔬菜中吡虫啉残留检测的研究是十分有必要的，可以减少农作物上农药的残留以及减轻对人体的危害。
关键词：吡虫啉农药残留液相色谱检测
正文：
材料与试剂：蔬菜样品若干
试剂：乙腈：色谱纯氢氧化钠：分析纯氯化钠：分析纯固相萃取柱（ENVI-18柱，3毫升，0.5克或相当者）有机滤膜：孔径0.45微米吡虫啉农药标准物质：纯度大于99% 25%乙腈：乙腈与水按1：3体积比混合农药标准溶液
标准储备溶液：称取10毫克左右（精确到0.10毫克）标准品于10毫升容量瓶中，加乙腈超声溶解，配成1 000微克/毫升左右的标准储备液，-18℃冰箱保存。
混合标准溶液：使用时根据检测需要稀释成不同浓度的标准使用液，4℃冰箱保存。
混合标准溶液避光4℃保存，可使用两个月。
净化过程所用溶液A（20mmol/L NaOH、NaCl饱和溶液）：称取0.8克NaOH于100毫升烧杯中，加入少量水充分溶解后，再加入氯化钠使其饱和，然后倒入1 000毫升容量瓶中，再用饱和氯化钠水溶液定容至刻度。
净化过程所用溶液B（20mmol/L NaOH溶液）：称取0.8克NaOH于100毫升烧杯中，加入少量水充分溶解后，倒入1 000毫升容量瓶中定容。
仪器和设备：高效液相色谱仪：配紫外检测器或二极管阵列检测器固体样品粉碎机：转速不低于4 000转/分钟组织捣碎机：转速不低于15 000转/分钟分析天平：感量0.1毫克和0.01克各一台离心机：转速不低于4 000转/分钟旋转蒸发仪梨形浓缩瓶：50毫升
SPE装置或相当者移液器：10毫升、1毫升超声波清洗器
研究方法：高效液相色谱分析法数据统计分析法
研究过程：
6.1 提取
按GB/T 8855抽取蔬菜样品取可食部分切碎，混匀，称取10克左右试样（精确到0.01克）于100毫升离心管中，加入20毫升乙腈，用高速组织捣碎机在15 000转/分钟，匀浆提取1分钟，加入5克氯化钠，再匀浆提取1分钟，将
离心管放入离心机，在3 000转/分钟离心5分钟，取上液10毫升（相当于5克试样量）加入50毫升梨形瓶中，38℃旋转蒸发近干，加25%乙腈2毫升入梨形瓶中，超声30秒充分溶解，待净化。
6.2 净化
加样前先用5毫升乙腈预淋洗ENVI-18柱，然后用5毫升25%乙腈平衡柱，再从上述梨形瓶中移取1毫升溶解好的果蔬或茶叶样品提取液转移至净化柱上，先用B溶液20mmol/升NaOH溶液10毫升洗柱，弃去；再用10毫升水洗柱，弃去，抽干柱。
最后用1毫升乙腈缓慢洗脱保留在柱上的吡虫啉农药，收集洗脱液定容至1毫升，0.45微米有机滤膜过滤，待测。
6.3 测定
6.3.1 参考分析条件
a）色谱注：C18柱（5微米，250毫米×4.6毫米）或相当者；
d）进样量：5微升；
e）检测波长：270纳米
6.3.2 定量测定
采用外标校准曲线法定量测定。
使用不同浓度的标准工作液，以色谱峰面积定量，绘制多点校准曲线，测定的试样浓度应在标准曲线范围内。
6.4 平行实验
按以上步骤对同一试样进行平行试验测定。
6.5 空白实验
除不称取样品外，均按上述步骤进行。
7、结果计算
按照外标标准曲线法定量。
试样中吡虫啉残留量按式（1）计算：
X＝A1×V1×V3× c / A2×V2×m (1)
式中：
X——样品中农药的含量，单位为毫克每千克（mg/kg）；
A1——试样中组分的峰面积，积分单位；
V1——试样中提取的总体积，单位为毫升（mL）；
V3——净化后定容的体积，单位为毫升（mL）；
c——标准品质量浓度，单位为毫克每升（mg/L）；
A2——标准样中组分的峰面积，积分单位；
V2——净化用提取液的总体积，单位为毫升（mL）；
m——试样的质量，单位为千克（kg）。
计算结果保留三位有效数字。
8、精密度
在重复性条件下获得的两次独立测试结果的绝对差值不大于这两个测定值的算术平均值的15%。
结果讨论与分析。