• 4、在胶板尺寸较长的凝胶电泳仪中，对酶 解完全后的DNA片段进行电泳，各酶切片 段就会按其长度大小在电场中进行分离。 • 5、先用碱性溶液使凝胶板中分离开的双链 DNA片段变性为单链片段，然后将凝胶板 夹在尼龙膜中，并永久性地固定在尼龙膜 上。 • 6、让放射性DNA探针与尼龙膜上的单链D NA片段进行杂交。
遗传学家Jefferys 遗传学家
张DNA 纹
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DNA 纹图谱 构建
• 国外在20世纪70年代发展起来的DNA片段分析技术 国外在20世纪70年代发展起来的DNA片段分析技术—— 20世纪70年代发展起来的DNA片段分析技术 限制性片段长度多态性标记（RFLP） 限制性片段长度多态性标记（RFLP）在许多领域都有成功 的应用，也常用于构建各种DNA指纹图谱。 DNA指纹图谱 的应用，也常用于构建各种DNA指纹图谱。 • 但目前人们已普遍感到RFLP方法技术步骤繁琐费时费力， 但目前人们已普遍感到RFLP方法技术步骤繁琐费时费力， RFLP方法技术步骤繁琐费时费力 应用不便。 20世纪80年代中期PCR技术诞生以来 世纪80年代中期PCR技术诞生以来， 应用不便。自20世纪80年代中期PCR技术诞生以来，因其 操作简便、不需使用同位素、灵敏度高、特异性强等优点， 操作简便、不需使用同位素、灵敏度高、特异性强等优点， 迅速被用于相关领域。从常规PCR PCR发展而来的应用随机引物 迅速被用于相关领域。从常规PCR发展而来的应用随机引物 扩增的随机扩增多态性DNA标记或称任意引物PCR DNA标记或称任意引物 扩增的随机扩增多态性DNA标记或称任意引物PCR 解决了 未知特异DNA序列的情况下检测DNA的多态性。RAPD技术 DNA序列的情况下检测DNA的多态性 未知特异DNA序列的情况下检测DNA的多态性。RAPD技术 目前广泛用于中药DNA指纹图谱的构建， DNA指纹图谱的构建 目前广泛用于中药DNA指纹图谱的构建，在目前绝大多数药 用动植物DNA序列还未知的情况下，RAPD技术具有广阔的 DNA序列还未知的情况下 用动植物DNA序列还未知的情况下，RAPD技术具有广阔的 应用前景。 应用前景。
• 7、用放射性胶片与尼龙薄膜叠放， 尼龙膜上的放射性探针便会发出X 射线使胶片曝光，从而使杂交探针 的长度不同的DNA片段位置显影在 胶片上。这样的特征DNA片段条状 图谱，便是所谓的DNA指纹。
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多位点 性
DNA指 指 纹的特 点
简单的 遗传方 式Fra bibliotek高度变 异性
DNA指纹的特点 指纹的特点
• 多位点性 高分辨率的DNA指纹图谱通常由 15-30条带 组成，看上去就像挂号信上的条码签一样。DNA指纹区中 的绝大多数区带是独立遗传的，因此一个DNA指纹探针能 同时检测基因组中数十个位点的变异性。 • 简单的遗传方式 DNA指纹图中的区带是可以遗传的， 这不同于人的指纹。DNA指纹区带遵循简单的孟德尔遗传 方式。后代图中的每一条带都可以在双亲之一的图中找到， 只有0.004的可能性使子女中的一条带不能在其父母中的 图中找到。同一个体无病变的不同组织产生的DNA指纹图 完全相同，并能在培养的细胞株中维持下去。需要说明的 是，同卵双胞胎的DNA指纹图完全相同。
DNA指纹的遗传机理及检测方法
DNA指纹的特点 指纹的特点
DNA指纹图谱构建 指纹图谱构建
DNA指纹
DNA指纹技术的 指纹技术的 工作原理
什么是DNA指纹 指纹 什么是
么 DNA 纹
• 纹 独 ， 样 纹。 们 DNA 属 “DNA 纹”。 么 么 DNA 为 纹 样 独 DNA 纹 术 够检测 们 DNA 识别、 亲缘关系、医学诊断 寻 记。 动 进 研究 可 动 过 ； 种 类学 可 区 系 ， 应 。 们 个 界 尚 发现 ， 个 DNA 纹 ？ 实 来识别 。 纹，并 个 连锁 遗传标 种群 进 种 种 种
• 早在1984年，英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合 早在1984年 英国莱斯特大学的遗传学家Jefferys及其合 1984 Jefferys 作者首次通过DNA DNA分子生物学实验方法获得了一系列可以 作者首次通过DNA分子生物学实验方法获得了一系列可以 在胶片上看到的图纹，这些图纹极少有两个人完全相同， 在胶片上看到的图纹，这些图纹极少有两个人完全相同， 故称为“DNA指纹”， DNA指纹 故称为 DNA指纹 ，意思是它与人的指纹一样是每个人所 特有的。 特有的。 • 人类历史上第一个用DNA指纹破案的例子也是由Jefferys 人类历史上第一个用DNA指纹破案的例子也是由Jefferys DNA指纹破案的例子也是由 参与完成的。 1986年的一起发生在英国列斯特郡的奸 参与完成的。在1986年的一起发生在英国列斯特郡的奸 杀案中，Jefferys使用DNA指纹成功的证明了当时一名嫌 使用DNA 杀案中，Jefferys使用DNA指纹成功的证明了当时一名嫌 疑男子并非真正凶手。 疑男子并非真正凶手。
• 高度变异性 不同的个体或群体有不同的D NA指纹图。一般选用任何一种识别四个碱 基的内切酶来切DNA，经过电泳后，这种 个体间差异性就能表现出来。英国遗传学 家杰弗里斯对白种人研究表明，两个随机 个体具有完全相同的DNA指纹图的概率为3 000亿分之一，两个同胞个体具有相同图谱 的概率也仅仅为200万分之一。 返回
DNA 纹术 工
• 1、将送检各种生物学检样如毛发、血痕、 精斑、人体组织或白骨等，把其中所含的D NA提取出来。 • 2、如果提取的DNA 量很少，可以将DNA 样品进行PCR扩增，得到大量的所需DNA。 • 3、选用与探针配对的限制性核酸内切酶， 在长链DNA位置上加以切割，将分子量很 大的DNA长链切成许多长度不同的小片段 。