作者：徐燕兰婉玲傅超美何瑶
【摘要】目的建立甘露醇及甘露醇注射液有关物质的检查方法。
方法采用高效液相色谱法（rid 检测器）进行有关物质检查。
色谱柱：phenomenex rezex rcm monosaccharide ca+；流动相：脱气水；流速：1.0 ml/min。
结果该试验条件能有效分离主峰与杂质、降解产物峰，可用于甘露醇及甘露醇注射液的有关物质检查；甘露醇及甘露醇注射液均有很好的化学稳定性，甘露醇注射液在灭菌后的储藏过程中亦未见有降解产物产生。
结论 hplc法操作简便、结果准确，可用于甘露醇及甘露醇注射液中有关物质的检测。
【关键词】甘露醇；甘露醇注射液；有关物质检查
甘露醇(mannitol)又称d 甘露糖醇，分子式c6h14o6，是一种六元醇，与山梨醇为同分异构体，白色或无色的结晶粉未。
其在医药工业中的应用广泛，可作为降压剂、利尿剂、脱水剂，以及片剂的填充剂、直接压片的赋形剂、咀嚼片的矫味剂、冻干粉针剂的支架剂。
甘露醇注射液为甘露醇的灭菌水溶液，是上世纪60年代初即开始在我国临床上广泛使用的脱水利尿药，效果好，副作用小，经济安全可靠，应用日益广泛。
药物中含有杂质会降低疗效和影响稳定性，有的甚至对人体健康有害或产生其他副作用。
因此，检测有关物质、控制纯度是确保用药安全、有效，保证药物质量的重要方面。
英国药典（bp2005）与欧洲药典（ep 5.0）均收载了甘露醇原料的有关物质检查项［1,2］，而现行《中国药典》（2005年版二部）中收载的甘露醇及甘露醇注射液质量标准中却未设有关物质检查项［3］。
为有效控制甘露醇及甘露醇注射液中有关物质的限量，保证临床用药的安全有效，作者参照英国药典（bp2005）与欧洲药典（ep 5.0）对甘露醇及其注射液有关物质的测定方法进行了研究。
1 仪器与试药
1.1 仪器
agilent 1200 系列高效液相色谱仪，agilent rid 检测器。
1.2 试药
甘露醇（市售原料药，收集了3个生产厂家，共5个批次样品）；山梨醇（生化试剂）；甘露醇注射液（市售药品，收集了11个生产厂家，共11个批次样品）。
2 方法与结果
2.1 色谱条件
色谱柱： phenomenex rezex rcm monosaccharide ca（300 mm×7.8 mm 8 μm）；检测器：agilent rid 检测器（设置温度：55℃）；柱温：80℃；流动相：脱气水；流速：1.0 ml/min。
2.2 系统适用性试验
取甘露醇与山梨醇各0.5 g,置100 ml量瓶中,加水溶解并稀释至刻度,作为系统分离度测试溶液。
照高效液相色谱测定法(《中国药典》2005年版二部附录ⅴd)测定，将系统分离度测试溶液20 μl注入液相色谱仪，记录色谱图，见图1～3.
甘露醇的出峰时间约为22 min，山梨醇的出峰时间约为27 min，相对保留时间约为1.25，两者的分离度为4.59，色谱峰面积响应值比约为1.0：0.93，本系统适用性试验符合英国药典（bp2005）方法的要求。
2.3 强制破坏试验
取甘露醇5 g，置100 ml量瓶中，加水稀释至刻度，摇匀，作为供试品溶液（约20%浓度）；取供试品溶液5 ml，加水稀释至4倍体积(约5%浓度)，摇匀，按上述色谱条件，进样20 μ
l，记录色谱图，结果未经破坏的供试品溶液检测出一个杂质峰，出峰时间约为27 min，可确定为山梨醇，以归一化法计算其含量为0.36%，见图4.
光破坏试验取供试品溶液5 ml，置强光（4 500lx）下照射240 h，加水稀释至4倍体积(约5%浓度)，摇匀，按上述色谱条件，进样20 μl，记录色谱图，色谱图中除原有的山梨醇杂
质峰外，未产生新增杂质峰，且山梨醇杂质峰的量未见增加。
见图5.
酸破坏试验取供试品溶液5 ml，加入5 mol/l的盐酸溶液2 ml，水浴加热1 h，用5 mol/l 的氢氧化钠溶液中和后，加水稀释至4倍体积(约5%浓度)，摇匀，按上述色谱条件，进样20 μl，记录色谱图，色谱图中除原有的山梨醇杂质峰外，未产生新增杂质峰，且山梨醇杂质峰的量未见增加，见图6。
（注：出现在色谱图中保留时间约10 min的峰为强酸强碱破坏空白试剂产生，见图7）。
氧破坏试验取供试品溶液5 ml，加入过氧化氢溶液2 ml，在室温放置1 h，100℃水浴加热1 h，加水稀释至4倍体积(约5%浓度)，摇匀，按上述色谱条件，进样20 μl，记录色谱图，可见在氧化破坏试验中供试品溶液产生了少量杂质，见图9.
热破坏试验取供试品溶液5 ml，100℃水浴加热4 h，加水稀释至4倍体积(约5%浓度)，摇匀，按上述色谱条件，进样20 μl，记录色谱图，色谱图中除原有的山梨醇杂质峰外，未产生新增杂质峰，且山梨醇杂质峰的量未见增加，见图10.
强制破坏试验降解产物检测结果表明，甘露醇溶液能耐受强酸、强碱、高热及强光照射的破坏，记录的色谱图中均未产生新的杂质峰，仅在氧化破坏试验中产生少量杂质；在该色谱系统中，杂质峰能与主峰基线分离，说明该色谱系统能有效检测降解杂质。