大鼠取血方法1. 割(剪)尾采血:当所需血量很少时采用本法。
每鼠一般可采血10余次以上。
小鼠每次可取血0.1ml,大鼠0.3〜0.5ml。
1.4見尖采血才法将大杖囲進好•阳50乜左右SL水根池城部妁2 血骨充血后•用球消黑、擦干BU匕用消澎手术旳的去尾尖3 ■ 10mi叭魅后从用根那向尼尖檢忙血fl朋尖流岀。
此法町采L5-2 mL2. 鼠尾刺血法:大鼠用血量不多时(仅做白细胞计数或血红蛋白检查),可采用本法。
先将鼠尾用温水擦拭,再用酒精消毒和擦拭,使鼠尾充血。
用7号或8号注射针头,刺入鼠尾静脉, 拔出针头时即有血滴出,一次可采集10〜50mm3。
如果长期反复取血,应先靠近鼠尾末端穿刺,以后再逐渐向近心端穿刺。
3. 眼眶静脉丛采血:体重20-25g的小鼠每次可采血0.2-0.3ml ;体重200-300g大鼠每次可采血0.5-1.0ml,可适用于某些生物化学项目的检验。
将天M冊建庄实验台边Sfir左手抓囂大區拥那皮肤囿定头部,井轻轻向下压迫用導先稚备好的io 号舍JM甘头顶蝎(怦尖斛閒朝内人垂氏插人内就并向眼底方向转动以便切开押体丛「血敕便会连缨不斷地溝人采血用此法大约可取?-3 取血宪毕•立刻用脱册郴压迫也环境材料0.9mm x 100mm,背牛人习櫃便用丫经常骨—断.30mm晴、弁去屮阀段=EP 曲虻人0.1% IH-比钠< >150U/mgJ 0J mL-均匀涧湿・50P减下I輻适帀1mL伞血的抗甌效果肛人取血则感须熒I R J衿住骨的质昂.杯号井汕. 邀当劣备.1 Mi ■. ■■ iV ■■■. >■ -K> ■宽敬台曲*輕了F组多步驟同时操作]| ■ cm ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■ ■■ ■琴L9tt»EP&J动物处理功物作亟耍求权不% J 250g给西前禁的2・24h・给药前探前0.5-1-Oh fe0.5-1.0% iV/W)给水实验粥问•补充休液.H前苛煜为:取血质常胃给予等统计4•理社加衙帝樹涪液.实验之后,外用泊炎药涂布眼部2 <1AF保定2压迢颈曽3加的剌入4固定采血5去背止jft 6样加擂匀4.叵定身怎.圧住石肢,放桧手祈,緞轿毛ML沆畅出血.6血样曾轻轻罷匀,防止窠血・濤血.Step 1A建议;L于内枚鼻•涌陆止摟見:B 一定更帶手豪;C开址必倾卑牢83定隹头邙头那乱动.扎位JT黑易棉僞离.且易枕咬伤:D可衣此叶将丸只取如的的乍須剪掉.彷止按总栽£・1 •料大R歿壬牲歐1±.捋钟*3 •右手持“曾从纹内*部,与6L土脱45的.从轻剌入5•取血丸成,之EF瞼去歿部压力.再采去界拔出,按圧吐上.1左手保定Stcpl.W大鼠按压在亂笼上.il&Wfff:藝部t2•紧携頤都,R追頌两侧.使卑突出・匝后铮脉丛充血r»ge 7•押•Stcp2A 可円管试来鼻段碰Cl 球是否巳疑 突出.1'此甘丈乱反此身扎JU ♦窑・保送 爪緊钓司时.不ttKii.便其宣息死亡.Step3A 针头钎面走尙at 班・的入后再转 一定角度便斜面廿着瓯聊&界;B 制入凍度.小区为2・4・大区 釣卜X ・考禺型有也力时即护止牠进. 同时.管逼出约0. 1-0. 5twr ・边迅边就 转;C 不要使用管的尖位伶利期描入. 场穷璇購碎片右叹内,迪成持纹伤芳. 使埒下次反抗增“;D 拿昔的子要保持工净,常血潢的 子損不妥搽狀管的的坊,另龟安疑血・ 可刃鮮水搏洗・Sgp2•禁祖fiS 部.压迪 it两侧・使銀交出.屯一I 后静脉丛It 血Step! WL 內如, 45匸夬代・戎转倒 入,夂转谴出.A -般血减速戊快.证明•«膩了殴匝劝脉. 如舉白兀迄皮慢.证明要调怒皂侦胥的位JL 占液祁克釘爼保中了,没版毛师打漉出来;B岀血过租*知週到出£不杨不用着宦械毛如管可以调兰一下毛细管的扎入付Jf或深戎浅的找止一下&会玄新沉出;C加肴“浹已经冬毛fw$中{固必须込迫拔除毛细管,再搽工净眼哺.f*JMf4L4t;D筝到出血点将力it 删到大II的身体上大鼠出现英动的惜况檢大的一邯分力是他旳吉吹仗出来约保迄抱的后咬尢法乱蹬就瓮很好的供定大鼠.集后传中指和*第处… •U可以保iL血淹的雁畅5去育止ItStep SA自曙自繪宣的血量6.即冷去3千到1部的圧力.同时.并覆土茎抜出.以防土术6 £併扎出直.B尿乞把1RM罔18的血潢摄干冷,遊丸储块附徇下次2・6"品摇匀S"M・血桿片U经汎勺.---- 障止心・Step 44同龙采血・ ±fr 力.将集血2{锻出.扶/!止血\ -* II4.断头取血: 采血者的左手拇指和食指以背部较紧地握住大 (小)鼠的颈部皮肤,并作动物头 朝下倾的姿势。
右手用剪刀猛剪鼠颈,约1/2-4/5的颈部前剪断,让血自由滴入盛器。
小鼠可采用约 0.8〜1.2ml;大鼠约5-10ml 。
5. 心脏采血:鼠类的心脏较小,且心率较快,心脏采血比较困难,故少用。
若做开胸一次死 亡采血,先将动物作深麻醉,打开胸腔,暴露心脏,用针头刺入右心室,吸取血液。
小鼠约 0.5-0.6ml ;大鼠约 0.8-1.2ml 。
13心脏齐莉来血方法麻醉同前・操作盪右手持5・Q mLffiJW 器■针*徵曲浏夫 下•以丽度0-30嗦布向上进下•边遅叶边耀啜回 抽针TL 针尖穿过槌膈鵬備续斜行刺人2.5-1€ cm,旳相半于 5 ent Off 的怦头快度,-&S 到针薫有轻嶽搏动.表明针婪 巳进人心脏内+血粧僧心駐跳动的力检涌人注射II 内*采血完 成后拔出种头左手轻轻按任心脏搏动处’大嚴放问茏内•先单 茏观SL 悟大佩苏fflf 幵始爬行时电獰按性别分开蝦养口1•浅麻醉大鼠2•四肢展开固定在平板上3•按常规碘酒、酒精消毒后4•用食指感觉心博最动处5.大约在胸骨下缘 1/3处、稍偏左0.2-0.5左右的地方垂直进针(1/4号)6•针头抵心脏有明显的搏动感,再稍进针,有空虚感,血液跳跃而上针腔7•从血液的颜色很容易判断在心室还是心房,一般都在心室8•多次同一大鼠的心脏采血,切记初次进针的位置及深度,不要随意更换固定姿势!9•我每次取1ml 血液,大约可操作 4-5次(200g 大鼠)6.颈动静脉采血:先将动物仰位固定,切开颈部皮肤,分离皮下结缔组织,使颈静脉充分暴 露,可用注射fi 絮丹事第拭耳■Kd 皆血(V/Va前五点(1丁 4昭一厉^<60%hw a器吸出血液。
在气管两侧分离出颈动脉,离心端结扎,向心端剪口将血滴入试管内。
离心取上清后,余下的红细胞加适量生理盐水从尾静脉中回输给大鼠, 鼠的血量、体内药物的浓度等影响均小些。
颈动静脉插管:1•麻醉后手术,大鼠固定后头朝自己,颈部中线附近开1-2厘米口,用弯止血钳钝性分离,动脉 在中间,静脉比较靠边,而且分支较多,找到较粗的部分,小心,耐心分离,用线结扎远心端,在近 心端预置一结扎用线,用止血钳牵拉远心端线,使血管充盈,显微剪剪开小口 ,插管,结扎•插管封 口 .(打结即可)2. 动脉方法相似.3. 将动静脉插管引至背后,分清动静脉,一般手术后17小时或更长时间开始给药,取血,通常动 脉取血,静脉给药,期间要用肝素冲管道•颈静脉采血:采血者可以站在动物头端, 不需要麻醉动物,用个硬纸筒稍固定头部防止动物 咬,左手固定将头部稍向左扭一下, 会看见出现一个三角区, 右手持注射器平行于三角区正 中进针就可以了。
左右两边颈静脉均可以采,采左边时上面的操作反方向。
i-5 耳养聊采&法 -越ifr 脉采血方法町不需雰将大腻麻醉后作颈靜脉分福手 术不需驶骷械固定用RB 抓(手我固世),将大鼠胸前 区采血部位皮于脚帕正中线均第4助廿水平先用逹射 器計头沿水孚方向娟人皮肤,再向颈辭脉所在位Ht 沿皮下进 达廉存脉所亦位IS 时,轻抽注射器内耐便之星负压, 再使注射器与脚郁农而成角度如•土轴"向喪娜脉剌人,此时注 轴魁应与施静牀走祎方向郴一致•規人的深庫约5rmn.fi 试探 剌人或披出时”如有血液启动流人注说明怦 尖已盘颈协脉内•此时(M 定好大he 勿便注射器件虫務劫,也町 将采血針抵在大敝胸骨上以便节摄作*抽引注IMSHL 特血液足 尊时■拔出釆血针.用干棉球推压止血。
从锁骨上方,紧贴锁骨中间的地方进针,这个位置很重要!!!!!!!!!!这样可能对大进针后,稍稍抽下针管,如果没有血,则往前或向后走下针头,其实我的经验是大都是向前扎的太多了,应往后抽下针头。
如果有血,哈哈,固定住注射器抽血吧。
抽完2 ml,大鼠100%存活的7. 腹主动脉采血:最好先将动物麻醉,仰卧固定在手术架上,从腹正中线皮肤切开腹腔,使腹主动脉清楚暴露。
用注射器吸出血液,防止溶血。
或用无齿镊子剥离结缔组织,夹住动脉近心端,用尖头手术剪刀,剪断动脉,使血液喷入盛器。
1,1腹主劲脉采血法將大敝膻腔注射10%水合瓠醛渤03 mL /kg麻醉,5 min £即可。
仰卧冊定崔大亂手术台上试濟以宪分»«»规消龙后用P术柳刀册服正申找榔开腹腔。
术称右手特鄭剌怦•师尖料面朝下•人對旳度妁25”・MT,朝向心端方向剌人・飜度以5 rmn左右为宜■抽吸血港即阿*可以反复采的血枠进行不H^flWiH试.i#l悴・200~300$ 大凰可采血就耳~ 10曲,一-般栗3种血样全过程貝需2 no%8.股动(静)脉采血:①先由助手握住动物,采血者左手拉直动物下肢,使静脉充盈。
或者以搏动为指标,右手用注射器刺入血管。
体重15-20g小鼠采血约0.2-0.8ml,大鼠约0.4-0.6ml。
②在大鼠麻醉状态下,固定,仰卧位固定,在大鼠的左侧腹股沟处切口,暴露股动静脉,分离并分别插管(插管中要求有肝素盐水并在插管的一头接上三通方便取血使用),取血。
药动学实验一般不主张麻醉,因此动脉插管不应使用,而且大鼠血量有限,不适合短时间内多次取血,取血量过大会直接影响大鼠生理状态,即使得到一些数据,意义也不大。
目前比较可行的办法是在每个时间点各取一组大鼠的血,再进行求算。
尾静脉取血不行,血量有限,而且采集时间太慢,根本来不及。
眼底静脉取血倒是可行的,血量最多的一回,我曾经取到过接近4ml, —般可以在1ml以上,但取血有一定难度,时间长了,手就受不了了,我的经验是可以浅麻一下,用乙醚短时间麻醉,让鼠没有太大力气就可以,而且对实验结果没有明显影响,但要几个人合作,准确掌握好取血的时间。
一个老鼠仅仅作为一个时间点的话,就从眼眶取血,大概200克大鼠可以取6ml左右,最好不要进行麻醉,只要毛细管在眼眶后扎对位置,血会象自来水一样流的,一开始的劲过了就不太挣扎了。