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薄层层析操作步骤

TLC操作步骤
1、配制展开剂
氯仿:甲醇:水=75: 35: 10
倒入层析缸≤1 cm,盖上盖子让层析缸饱和
2、准备薄层板
距离底边2 cm处用铅笔画线,间距1 cm标点,放烘箱30 min烘干
3、点样
拿出薄层板放到层析缸里没有展开剂的一侧,30 min,让板充分饱和;
用毛细管在铅笔标点处点一次样,用洗耳球迅速吹干,多次重复,样品直径不要超过3 mm 4、进行分离
放层析缸,盖盖子,分离约10 min,至顶端约4 cm处,拿出,用铅笔画出前沿线,吹干溶剂
5、显色
荧光板在试样展开后,在紫外灯下观察,背底发荧光,而试样组分点由于吸收了紫外光,就不发荧光或荧光较弱
6、计算Rf值
原点至斑点中心距离
原点至展开剂前沿距离。

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