香菇多糖的制备方法
•酶解法是一些生物或者物理的辅助方法
• 酶提取法的原理是利用蛋白酶对细胞壁 的降解作用，减小细胞壁对多糖溶出的阻 碍，从而提高多糖提取率。采用的酶制剂 可以是单酶，也可以是多种蛋白酶（果胶 酶、中性蛋白酶和纤维素酶）按照一定比 例混合的复合酶。
•该法具有得率高、条件温和等优点，但由 于蛋白酶制剂的价格比较高，会增加提取 工艺成本，不利于大规模生产应用
香菇多糖的一级分子结构
香菇多糖的结构
• 天然香菇多糖的二级结构是β-三股绳状螺旋 型，但加入尿素或二甲亚砜后或在不同浓 度 NaOH 溶液下立体构型转变为单绳螺旋 结构.主链和侧链是单一螺旋有序构象，胶 体结构的结合区域会形成多螺旋构象；由 D-葡萄糖、D-半乳糖、D-甘露糖、L-阿拉 伯糖、D-木糖等组成。
带有硫酸根或乙酰基基团的香菇多糖，其 水溶性大大提高。
香菇多糖能溶解于浓度为0.5 M的NaOH 溶液中，溶解度可达50~100mg/mL。
在不同的NaOH 中具有不同的旋光度。 香菇多糖在 0.5M NaOH 溶液中的极限粘
度为 0.6~1.3（c=g·100 mL-1Molish 反应 呈阳性，茚三酮反应呈阴性等。
四、香菇多糖中粗蛋白的去除
•经乙醇沉淀后的粗多糖中蛋白质的含量较 高, 常用 Sevag 法脱除蛋白,。
•将多糖水溶液 1/5 体积加入氯仿, 随之再加 入氯仿体积 1/5 的正丁醇。混合物剧烈振摇 20 min, 离心, 倾出上层清液, 除去中间层变 性蛋白和下层氯仿。
•将 Sevag 法结合酶法去蛋白效率可提高 68 %, 且可以节省大量的试剂和时间
香菇多糖黄原胶结 冷胶
主要内容
➢ 香菇多糖的结构 ➢ 香菇多糖的性质 ➢ 香菇多糖的制备方法 ➢ 香菇多糖的应用
。
香菇多糖的结构
• 香菇多糖是从优质香菇子实体中提取的有 效活性成分。
• 香菇多糖的一级结构具有β-D（1→3）连 接的吡喃葡聚糖主链，在主链中葡萄糖的 C6位上含有支点（每 5 个 D-葡萄糖有 2 个支点），其侧链是由 β-D(1→6)键和βD(1→3)键相连的葡萄糖聚合体组成，在侧 链上也含有少数内部β-D(1→6)键。结构呈 梳状结构.
香菇多糖的性质
香菇多糖为白色或棕黄色粉末状固体 对光和热稳定,具吸湿性,相对湿度为92.5% 无甜味和还原性，相对分子质量较大 部分能溶于水,在水中的溶解度随分子质量
增大而降低,水中最大溶解度为 3mg/mL 水溶液为中性,不溶于甲醇 、 正丁醇、已
醇、 丙酮等有机溶剂。
香菇多糖的性质
香菇多糖的制备方法
二、香菇多糖的提取
•香菇多糖一般采用不同温度的水或稀碱溶 液提取。在其浸提参数中,温度是影响多糖 提取的主要因素。 •香菇多糖的提取方法有：
热水浸提法、稀酸（碱）浸提法、酶解 法、超声波提取法、微波提取法。
香菇多糖的制备方法
• 提取方法
• 浸提法是提取香菇多糖最常用的方法，
• 热水浸提法
五、香菇多糖的分离纯化及纯度鉴 定
• 多糖的分离纯化及纯度鉴定是进一步研 究多糖的必要步骤, 纯化的过程一般先用 有机溶剂如乙醇等进行反复洗涤沉淀，除 去醇溶的部分杂质; 纯化后得到的多糖分 子量分布很宽，需要进行分级来得到一定 分子量范围的具有较强生物活性的多糖"
• 常用的纯化方法有:分级沉淀法、柱层析 法、超滤法等。
微波法被广泛应用于食品领域
三、香菇多糖的脱色处理
•提取的香菇多糖溶液,一般含有较深的颜色,色素的 存在影响纯度和理论研究,因此要尽量去除。常用的 脱色方法有H2O2、活性炭法和离子交换树脂法。 •多糖脱色是多糖纯化的一个关键工艺,主要采用活性 炭吸附脱色,该方法脱色效果一般,活性炭对多糖的吸 附严重。H202虽然脱色效果不错,但存在着多糖降解 的问题,这很可能影响多糖的生物活性。离子交换树 脂通常使用DEAE纤维素柱,由于DEAE纤维素价格昂 贵,一般只能在理论研究中提取高纯度多糖使用,在工 业化生产中不能得以应用。

香菇多糖的制备
一、 香菇的预处理
↓ 二、 香菇多糖的提取
↓ 三、香菇多糖的脱色处理
↓ 四、 香菇多糖中粗蛋白的去除
↓ 五、香菇多糖的分离纯化及纯度鉴定
• 香菇多糖的制备
一、香菇的预处理
• 一般用于多糖提取的香菇子实体通常是干 品, 将无霉变和虫蛀的优质香菇子实体置 于 60 ℃左右的条件下干燥, 以利于粉碎， 粉碎后过 20～80 目筛。由于香菇的脂肪 含量约为干重的 2 %～4 %, 因此一般不 考虑脂肪对香菇提取的影响, 但也有研究 采用石油醚、乙醇等除去原料中的脂肪成 分。
多。
香菇多糖的制备方法
•微波提取法
•微波提取时水分吸收微波能，使得细胞内 的温度上升，从内向外对香菇进行加热，同 时液态水的气化产生的压力瞬加穿透香菇， 破坏香菇的细胞壁，香菇中的多糖成分就从 细胞中溶出来。
•微波提取法与传统加热技术相比具有节能 高效、均匀性好、易于控制等，此方法有重 现性好、操作性强、热效率高等优点。
•由于酸对多糖的糖苷键有破坏作用, 故一般 采用稀碱作为浸提剂。碱浸提通常采用 NaOH 作为浸提液。
•从稀酸、碱液法提取易造成香菇多糖水解， 碱可以通过破坏细胞壁而使酸性多糖溶出， 但所提取出来的多糖成分比较复杂，提取过 程部分多糖会发生水解导致多糖活性结构遭 到破坏，降低了多糖的提取率。 这种方法 应用较少。
香菇粉→加蒸馏水→90℃水浴提取→静置→过滤 →滤液浓缩→加入乙醇→充分混匀→静置→离心 →取上清浓缩→加入甲醇→静置→离心→得沉淀 →加甲醇、乙醚洗涤后→自然风干→得粗香菇多 糖→称重
• 热水浸提法是目前工业生产提取的主要手段， 但工艺提取时间长。提取效率不高"。
香菇多糖的制备方法
•稀酸（碱）提取法
香菇多糖的制备方法
•超声提取法是利用超声波产生强烈振动，
破坏香菇多糖细胞壁，加速多糖释放.
•可以缩短提取时间，降低提取液的黏度， 提高提取效率"。但超声功率过大会引起多 糖分子的降解，导致多糖性质发生变化。
•超声提取法具有能耗低、时间短、效率高 等特点，近年来被广泛应用于实验室的植 物多糖提取，对于超声提取的研究也比较