全国高职高专药品类专业卫生部“十二五”规划教 材
第七章 紫外-可见分光光度法
分析化学（第2版） 谢庆娟 李维斌
◆学习目标⊙ ◆知识要求⊙ ◆能力要求⊙全国高职高专药品类来自业卫生部“十二五”规划教材
◆学习目标
分析化学（第2版） 谢庆娟 李维斌
通过学习光谱分析法概论、紫外-可见分光光度法 的基本原理、分光光度计的基本构造、降低测量误 差的方法、常用的定性、定量方法等知识，了解光 学分析法的知识体系，熟悉紫外-可见分光光度法 的实际应用，会用紫外-可见分光光度计测定溶液 的吸光度，并对有关物质进行定性定量分析，为学 习红外分光光度法、荧光分光光度法、核磁共振波 谱法及药物分析课中有关药品的定性鉴别、杂质检 查和含量测定方法奠定基础。
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◆知识要求
分析化学（第2版） 谢庆娟 李维斌
1．掌握光的吸收定律概念、表达式及条件，吸光系数和 吸收光谱的意义，常用定量分析方法的原理和应用。
2．熟悉紫外-可见分光光度计的基本结构、吸光度测量 条件的选择、偏离光的吸收定律的主要因素。
3．了解光谱分析法的分类、紫外-可见吸收光谱的产生 机制、定性分析的依据和方法。
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第一节 概述
分析化学（第2版） 谢庆娟 李维斌
课堂活动
1．紫外-可见光的波长范围是
A．200~400nm
B．400~760nm
C．200~760nm
D．360~800nm
2．下列叙述错误的是
A．光的能量与其波长成反比
B．有色溶液越浓，对光的吸收也越强烈
利用光谱进行定性、定量和结构分析的方法称为光 谱分析法，简称光谱法。
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第一节 概述
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一、物质对光的选择性吸收
单色光: 单一波长的光束 复色光: 含有多种波长的光束 电磁波谱: 以波长大小顺序排列的电磁波谱图
波长 10pm 300pm 200nm 400nm 800nm 500mm 1cm 1m
根据可见光、紫外光与物质分子的相互作用建立了 紫外-可见分光光度法，
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第一节 概述
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根据待测物质（原子或分子）发射或吸收的电磁辐 射，以及待测物质与电磁辐射的相互作用而建立起 来的定性、定量和结构分析方法，统称为光学分析 法。
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第一节 概述
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点滴积累 1．光的本质是电磁波；物质对光的吸收具有
选择性。 2．吸光度与透光率的关系是 :
3．吸收曲线是溶液在一定条件下的吸光度随 入射光波长变化而变化的曲线。
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光谱 射线 X射线 紫外光 可见光 红外光 微波 无线电波
方法 光谱法
分光光度法 光谱法
可见光
核磁共振
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第一节 概述
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红光与绿光互补、紫光与黄光互补，等等。
白光的组成
白光的色散
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第二节 紫外-可见分光光度法的基本原理
一、光的吸收定律 当一束平行的单色光通过均匀、无散射的含有吸光性
物质的溶液时，在入射光的波长、强度及溶液的温度 等条件不变的情况下，该溶液的吸光度A与溶液的浓 度c及液层厚度L的乘积成正比，即： A＝K·L ·c 。 称为光的吸收定律（朗伯-比尔定律）。 光的吸收定律是定量分析的理论依据。
C．物质对光的吸收有选择性
D．光的能量与其频率成反比
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第一节 概述
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课堂活动
3．紫外-可见分光光度法属于 A．原子发射光谱法 B．原子吸收光谱法 C．分子发射光谱法 D．分子吸收光谱法
4．分子吸收可见-紫外光后，可发生哪种类型的分子能 级跃迁 A．转动能级跃迁 B．振动能级跃迁 C．电子能级跃迁 D．以上都能发生
第一节 概述
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二、透光率与吸光度
I0＝Ia + It + Ir I0＝Ia + It
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第一节 概述
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透射光强度It与入射光强度I0的比值称为透光率或透光度T 透光率的负对数为吸光度A
A lgT
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◆能力要求
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1.能够用光的吸收定律解决定量计算问题 。 2. 能 够 绘 制 吸 收 光 谱 曲 线 ， 找 出 被 测 组 分 的 最
大吸收波长。
3.能够绘制标准曲线，并能应用标准曲线对样品 进行定量分析。
4.会使用常见的紫外-可见分光光度计测定溶液的 吸光度。
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案例导入
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在夏天参加户外活动时，如果天气晴朗，就应该注 意保护皮肤，否则，暴露在火辣辣太阳之下的皮肤， 数小时后就会出现红肿、瘙痒、发热、刺痛症状，数 日后出现蜕皮现象，这表明太阳光中有一种光线能伤 害生物细胞。科学家研究证实，这种光线是紫外线。
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第一节 概述
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A
max=515
480
520
560nm
吸收光谱曲线示意图
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第一节 概述
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四、紫外-可见分光光度的特点
特点
灵敏度高 准确度高 精密度好 选择性好 易于普及 应用广泛
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第一节 概述
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三、吸收光谱曲线
概念：以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标所描 绘的曲线，称为吸收光谱曲线，简称吸收光谱。
特点：在相同条件下，同一物质的不同浓度的溶 液，其吸收光谱曲线相似，且λmax相同。这是定 性分析的基础。