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抗酸染色操作规程

抗酸染色操作规程
1.目的
规范抗酸染色操作规程,确保染色结果清晰可靠。

2、原理
分枝杆菌细胞壁含脂质较多,其中主要成分为分枝菌酸,此物具有抗酸性,染色时与石炭酸复红结合牢固,能抵抗酸性乙醇的脱色作用,因此抗酸菌能保持复红的颜色,达到染色目的。

3、范围
用于抗酸性细菌(结核、麻风分枝杆菌)初步鉴定
4、质量控制
龟分枝杆菌ATCC93326做染色阳性,大肠埃希菌ATCC25922为染色阴性对照。

5、试剂
5.1石炭酸复红
碱性复红 10g 95,酒精 100ml 5,石炭酸 900ml (边加边研磨) 5.2盐酸脱色液(3,盐酸酒精)
浓盐酸 3ml 95,酒精 97ml
5.3吕氏美兰
美兰 0.3g 95,酒精 30ml 蒸馏水 70ml 10,KOH水溶液 0.1ml 复染液 6、工作程序
6.1制片:待检标本用无菌生理盐水涂片,经自然干燥后用火焰固定。

6.2初染:加石炭酸复红溶液,徐徐加热至有蒸汽出现,切不可沸腾。

反复染5分钟,清水冲洗。

6.3脱色:加盐酸脱色液,不时摇动玻片至无红色脱落为止,清水冲洗。

6.4复染:加美蓝复染,染0.5-1分钟,清水冲洗。

6.6待涂片自然干燥后,油镜镜检。

7、结果判断
结核杆菌呈红色,其它细菌呈蓝色
8、注意事项
染液注意密封,以免凝结产生沉淀影响使用效果。

体液标本均应离心后取下层沉淀液与染液混合,以提高检出率。

提高责任心,做到全片检查。

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