教案与讲稿
一、教案
2005级医学心理，2005级临床动物组织中核酸的
课程名称授课专业和班级本科9班，2005级临床本科6提取与组分的鉴定
班，2005级药学专科授课学
授课内容纸层析鉴定转氨作用4学时时
2006.11.27，
6、7、
8、9节，
6、
2006.11.30，
7、8、9节，
1、2、授课地点分析实验室日期节次
2006.12.1，
3、4节，
1、2、
3、
2006.12.284节
教学目的熟悉苯酚法提取动物组织中核酸的原理和操作方法；了解核酸的组成，掌握核酸组分的鉴定方法。

教学重点动物组织中核酸提取的原理和操作方法；核酸组分的鉴定
教学难点核酸提取的操作；核酸组分的鉴定
教具黑板、粉笔、实验材料、实验仪器等。

教学方法小班讲课
动物组织中核酸提取的原理和操作方法10分钟
教学过程核酸组分的鉴定10分钟
学生实验操作130分钟实验结果观察及讨论分析10分钟
（1）刘粤梅朱怀荣主编《生物化学实验教程》（人民卫生出版社）
（2）张文峰黄林邦主编《分析与实验检测技术》（江西高校出版社）思考题
课后总结影响本次实验的因素？
参考书籍
二、讲稿
（一）实验原理：
核酸由磷酸、戊糖、含氮碱基化合物组成，根据戊糖的不同可分为脱氧核糖核酸（DNA）和核糖核酸（RNA）两大类。

由于它们在组织细胞中大部分与蛋白质结合成核蛋白，因此，提取核酸时必须使核酸与蛋白质分离开并去掉蛋白质。

核蛋白可用水从动物组织（实验中用肝）中提取，再用水饱和的酚去蛋白，释放出核酸，最后用乙醇沉淀出核酸。

核酸可被硫酸水解得到磷酸、戊糖、含氮碱基化合物，根据这三种物质的性质特点可用不同的方法加以鉴定：
1．磷酸：
可与钼酸试剂作用产生磷钼酸，后者在还原剂（如维生素C或氨基萘酚磺酸等）作用下可立即被还原成蓝色的钼蓝，其颜色的深浅与磷的含量成正比。

2．含氮碱基化合物：
嘌呤碱可与硝酸银作用生成灰褐色的絮状嘌呤银。

3．戊糖：
核糖：
与浓酸（浓盐酸或浓硫酸）共热得到糠醛，后者与3，5-二羟甲苯缩合而成绿色化合物。

脱氧核糖：
与浓酸（浓盐酸或浓硫酸）共热得到ω-羟基-r-酮基戊醛，后者与二苯胺作用生成蓝色化合物。

（二）实验步骤：
1．核酸的提取：
①称取新鲜动物肝2克，剪碎置于研钵中，加3ml蒸馏水研磨成糊状（约5分钟）。

②加90％苯酚5ml于研钵中再研磨5分钟左右，转入离心管中3000 rpm 离心5分钟。

③用小滴管取上层液于离心管中，加2ml乙醚并搅拌均匀，3000rpm离心3分钟，用毛细滴管取下层液于另一离心管中。

④加95％乙醇2ml于离心管中，搅拌混匀后3000rpm离心5分钟弃上层液即得核酸沉淀。

2．核酸的水解：
于装有核酸沉淀的离心管中加2ml蒸馏水，震荡摇匀使沉淀溶解。

加入10％硫酸2ml，摇匀，于沸水浴中加热7分钟，再冷却备用。

3．核酸的鉴定：
①嘌呤鉴定：
核酸水解液5％硫酸浓氨水5％AgNO
3测定皿20滴----数滴至碱性10滴
对照皿---- 20滴数滴至碱性10滴
加入AgNO
3后观察变化，静止15分钟后比较两皿沉淀。

②核糖检定：
核酸水解液5％硫酸3，5-二羟甲苯
测定管4滴--- 6滴
对照管---- 4滴6滴
摇匀后沸水浴10分钟，比较两管差异。

③磷酸的鉴定：
核酸水解液5％硫酸钼酸试剂3％维生素C 测定管10滴--- 5滴10滴对照管--- 10滴5滴10滴摇匀后室温放置5分钟，比较两管差异。

（三）学生实验操作：
根据学生的实验情况进行指导。

（四）实验结果及讨论分析：
（五）实验室整理：。