白血病常见的染色体异常和受累基因
染色体异常 t (8;21)(q22;q22) t (15;17)(q22;q21) t (11;17)(q23;q21) inv (16)(p13;q22) t (16;16)( p13;q22) t (variable; 11q23) t (8;14)(q24;q32) t (9;22)(q34;q11)
➢ 免疫学检查
TdT
CD19 CD20
cCD79a
CD34
淋系干/祖
CD38
干/祖细胞
HLA-DR
B淋巴 T淋巴
cCD3/CD3 CD5
CD7
粒系
cMPO
CD123
髓系干/祖
CD117
单核系
CD33/13
CD64 CD11b
CD14
免疫表型：流式细胞仪检测分析
集单克隆抗体、荧光化学、激光、计算机等技术 诊断白血病等血液系统恶性肿瘤不可缺少的重要标准之一
原始和幼淋巴细胞以小细胞（直径≤12µm）为主 原始和幼淋巴细胞以大细胞（直径≤12µm）为主 原始和幼淋巴细胞以大细胞为主，胞浆空泡、嗜碱性
临床表现
➢ 正常骨髓造血功能受抑制表现 贫血 发热 出血：血小板减少、LC血管内瘀滞浸润、凝血异常、感染 AML-M3型容易因DIC和原发性纤溶-颅内出血
免疫分型 分析流程
造血细胞？ 定阶段 定系列 定良恶性
SSC
CD7-FITC CD117-PE FSC CD33-APC
CD45-PerCP
6个参数：2个物理参数＋4个荧关参数
)
(
成 熟 度 CD45
成熟淋巴细胞 白血病细胞
嗜酸粒细胞 粒细胞
有核红细胞
MM细胞
当代技术核心－CD45/SSC设门
分类
FAB分型 ( 1976年)：形态学，原始细胞/NEC≥30%
AML
M0 M1 M2（M2a/M2b） M3（APL） M4 M4Eo M5（M5a/M5b） M6（AEL） M7 ALL L1 L2 L3 （Burkitt）
原始细胞≥30%，无嗜天青颗粒和 Auer 小体，电镜 MPO（＋） 原粒细胞≥90% 原粒细胞 30～89%/异常中性中幼粒细胞≥30% 异常早幼粒细胞≥30% 原始细胞≥30%，各阶段粒细胞 30～80%，各阶段单核细胞>20% M4＋嗜酸性粒细胞≥5% 各阶段单核细胞占≥80%；原单核细胞≥80%/原单核细胞<80% 幼红细胞≥50%，NEC 中原始细胞≥30% 原始巨核细胞≥30%
累及基因 AML1 / ETO PML/ RARα PLZF/ RARα CBFβ/ MYH11 CBFβ/ MYH11
定义
造血干细胞的恶性克隆性疾病 白血病细胞LC增殖失控、分化障碍、凋亡受阻
LC大量增生、浸润
正常造血受抑制
分类 白血病细胞的成熟程度和自然病程
急性：原始和早期幼稚细胞，病程数月
慢性：较成熟幼稚细胞和成熟细胞，病程数年
受累细胞系列
急性白血病 (acute leukemi, AL) 急性淋巴细胞白血病 (acute lymphoblastic leukemia, ALL) 急性髓细胞白血病 (acute myeloid leukemia, AML)
➢ LC增殖浸润的表现
淋巴结和肝脾肿大：ALL多见 骨骼和关节：疼痛 眼部：粒细胞肉瘤/绿色瘤 口腔和皮肤：M4 、M5牙龈增生肿胀 CNS-L： ALL缓解期最多见
睾丸： ALL多见 其他：
实验室检查
➢ 血象 血常规：WBC↓↑或者正常 、Hb↓、PLT ↓ 血涂片：常可见原始/幼稚血细胞
➢ 骨髓象：形态学 AL的主要依据和和必做检查 FAB分类原始细胞/NEC≥30% WHO 分类≥20%
白血病
(leukemia)
概述
内容
急性白血病 (acute leukemia，AL)
慢性髓细胞白血病（chronic myeloid leukemia， CML）
慢性淋巴细胞白血病 （chronic lymphoblastic leukemia ，CLL）
正常血细胞的生成
第一节 概 述
化学因素：苯、氯霉素、乙双吗啉、烷化剂
遗传因素：人群3-4/10万，<35岁居第一位肿瘤
唐氏综合征50/10万，单卵双生1/5
第二节 急 性 白 血 病 acute leukemia, AL
定义
造血干细胞的恶性克隆性疾病 骨髓中异常原始细胞及幼稚细胞大量增殖
并抑制正常造血 广泛浸润肝、脾、淋巴结等脏器
慢性白血病 慢性髓细胞白血病 (chronic myeloid leukemia，CML) 慢性淋巴细胞白血病 (chronic lymphocytic leukemia,CLL) 毛细胞白血病HCL、 幼淋巴细胞白血病PLL等
病因 病毒：
成人T细胞白血病/淋巴瘤-人类T淋巴细胞病毒Ⅰ 型
物理因素：电离辐射
SSC(Side scatter)（颗粒多少）
白血病免疫学积分系统（EGIL，1998）
ALL亚型和分布
B系 早前 B-ALL 普通 B-ALL 前 B-ALL 成熟 B-ALL
T系 前 T-ALL T－ALL
免疫表型 CD19+ HLA-DR+
CD10– CD10+ CD10+ CyIg+ CD10+ SIg+ Cy CD3+ CD7+ CD2– CD1a– sCD3 CD2+ CD5±CD8± CD4±
M1 M2a
M2b
M3
M5
M6Biblioteka M7ALL➢ 细胞化学
协助形态学鉴别各类急性白血病
AML-M3a骨髓POX染色
AML-M1骨髓NSE ＋NaF染色
AML-M5a骨髓NSE染色
NSE＋NaF染色
ALL-L1骨髓PAS染色
WHO髓系和淋巴肿瘤分类 MICM分型 ➢ 形态学(Morphology ) ➢ 免疫学(Immunology） ➢ 细胞遗传学(Cytogenetics ) ➢ 分子生物学(Molecular biology)
儿童（％） 88 5 65 15 3 12 1 11
成人（％） 76 11 51 10 4 24 7 17
FAB 分型
L1 L2 L1 L2
L1 L3
L1 L2 L1 L2
➢ 细胞遗传学：染色体核型
细胞有丝分裂
AL常见染色体异常
➢ 分子生物学：主要指应用PCR技术
1990年Mullis等建立 PCR技术原理 ：体外酶促合成DNA片段