大米中直链淀粉和支链淀粉的检测分光光度法
企业标准（拟定稿）
倪天瑞2015年11月04日
1. 适用范围
大米中直链淀粉和支链淀粉含量的测定，不适用于熟制大米的检测；
2. 规范性引用文件
NY/T 2639-2014稻米直链淀粉的测定分光光度法
GB/T 15683-2008大米直链淀粉含量的测定
3. 原理
大米中淀粉与碘形成显色复合物，在波长620 nm处测定显色物的吸光度值，其吸光度与直链淀粉含量成正比；
大米中淀粉分为直链淀粉和支链淀粉，直链淀粉含量之外数值即为支链淀粉含量。

4. 试剂
使用试剂为分析纯试剂，水为三级水
4.1氢氧化钠溶液（1 mol/L）:称取4 g氢氧化钠，溶于100 mL水中；
4.2乙酸溶液（1 mol/L）:量取
5.78 mL冰乙酸，用水定容至100 mL ；
4.3碘液：0.2 g碘、2 g碘化钾，用水定容至100 mL；
4.4乙醇溶液（95%）
4.5空白校正液：氢氧化钠溶液（0.09 mol/L），量取4.5 mL 1 mol/L氢氧化钠溶液，定容至50 mL；
4.6直链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
4.7支链淀粉标准品，购于上海将来试剂公司；
5. 仪器
分光光度计
分析天平，感量土 0.0001 g
水浴锅
烧杯
研钵
筛子（80 目）
6. 分析步骤
6.1样品处理：将样品混匀，称取约10 g,粉碎后，过80目筛子；
6.2前处理：准确称取样品50± 0.2 mg,置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入 4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min，取出，冷却至室温，定容至50 mL。

该溶液即为待测液。

6.3标准溶液：
6.3.1直链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50± 0.2 mg直链淀粉标准品，置于50 mL容量瓶中，加入0.5 mL 95%乙醇溶液，冲洗容器壁上的粉末，再加入4.5 mL氢氧化钠溶液，摇匀，沸水浴10 min,取出，冷却至室温，定容至50 mL。

6.3.2支链淀粉标准溶液（1 mg/mL）
称取50±0.2 mg支链淀粉标准品，制备方法同上
6.4梯度浓度直链淀粉标准溶液配制
上述数据是在平均淀粉含量为 90%的大米干基基础上计算所得。

6.5测定
6.5.1标准曲线制作：
准确量取0.5 mL梯度标准溶液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min ；
分光光度计用空白校正液调零后，在620 nm处测定系列标准溶液的吸光度；以
吸光度为纵坐标，直链淀粉含量（干基质量分数）为横坐标，绘制标准曲线。

6.5.2样品检测
准确量取0.5 mL待测液到10 mL离心管中，加入5mL水，0.1 mL乙酸溶液，摇匀，加入0.2 mL 碘试剂，定容至10 mL，摇匀，静置10 min;分光光度计用空白校正液调零后，在 620 nm处测定系列标准溶液的吸光度。

每个浓度样品做2份平行测定。

7. 结果表示
参照6.5.1的标准曲线的吸光度值得到测定结果，两次检测结果的算数平均值为测定结果。