体育系实验报告系别：体育系班级： 1002 姓名：李申申授课教师：李煥品二○一二年下期综合性、设计性实验一、实验设计方案实验名称：尿生成的影响因素实验时间：2012-5-10小组成员：李申申小组合作：是○否○1、实验目的：观察尿液生成的一些因素，并分析其机制。
2、实验设备及材料：生物信号记录系统或多导生理记录仪、刺激器（或多用仪）记滴器、血压换能器、保护电极、家兔、兔手术台、哺乳动物手术器械（手术刀、手术剪、止血钳、玻璃分针,动脉夹，丝线，注射器，兔台、培养皿、膀胱插管、引流管）、动脉夹、动脉插管、注射器（20mL、10mL、1mL各一个）、棉绳、纱布、25%氨基甲酸乙酯溶液、生理盐水、肝素、20%葡萄糖溶液、1：10000去甲肾上腺素、速尿、0.6%酚红、10%Na OH溶液、垂体后叶素、体重台、。
3、理论依据：尿生成的过程包括肾小球的滤过、肾小管和集合管的重吸收以及分泌排泄3个过程。
凡能影响上述过程的因素，都可影响尿的生成，从而引起尿量的改变。
4、实验方法步骤及注意事项：1、手术准备：（1）用25%的氨基甲酸乙酯溶液按4mL/kg由耳缘静脉注入。
家兔麻醉后，仰卧起坐固定。
（2）颈部手术：暴露气管及与气管平行的右血管神经鞘，分离出右侧鞘膜内的迷失神经，在神经下穿线备用。
分离左侧颈总动脉，施行颈总动脉插管术，并接通压力传感器通道，记录血压。
（3）腹部手术：剪毛后于耻骨联合上方正中做一个2-3cm切口，切开腹壁，将膀胱移至腹部，辨认膀胱和输尿管的解剖位置后，在膀胱的颈部用线结扎，阻断痛尿道的通路。
选择膀胱顶部血管较少的部位，纵向做一小切口，插入膀胱插管。
插管口最好刚插入输尿管在膀胱的入口处，用线结扎固定。
将插管的另一端连至计数通道。
手术操作结束后，用温热的生理盐水纱布覆盖切口处。
2、试验观察（1）记录正常尿流量（滴、min)和血压。
（2）静脉快速注射37-38℃生理盐水20mL，观察尿量和血压有何变化。
（3）用中等强度和频率的电刺激剪短刺激右侧颈迷走神经末梢端，观察尿量和血压有何变化。
（4）静脉注射20%葡萄糖溶液5mL，观察尿量有何变化。
（5）静脉注射：1：10000去甲肾上腺素，观察尿量和血压变化。
（6）以5mL/kg体重的剂量静脉注射速尿，观察尿量和血压的变化。
（7）静脉注射0.6%酚红，用盛有10%Na OH溶液的培养皿收集尿液，计算从注射酚红起到尿中刚出现酚红所需的时间（酚红的碱性溶液中呈红色，可在培养皿下垫一白纸以及时察觉）。
〖注意事项〗（1）实验前应给兔多吃富含水分的饲料。
（2）本试验需多次静脉注射，应注意保护家兔耳缘静脉。
（3）手术操作应轻柔，避免引起损伤性尿闭。
腹部切口不可过大，切开腹部时应避免损伤内脏。
5．实验数据处理方法：结果以x±s表示，统计采用student t test 方法6．参考文献：[1] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:708.[2] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:720~721.[3] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:718.[4] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:719.[5] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:762.[6] 陈季强.基础医学教程各论(上)[M].北京:科学出版社.2004:714.指导老师对实验设计方案的意见：指导老师签名：年月日二、实验报告1、实验目的、设备与材料、理论依据、实验方法步骤见实验设方案2、实验现象、数据及结果（1）麻醉固定：按1g/kg体重剂量耳缘静脉注射200g/L氨基甲酸乙酰。
待兔子麻醉后，将其仰卧，先后固定四肢及兔头。
（2）腹部手术：从耻骨联合向上沿中线作长约4cm的切口，沿白线打开腹腔，将膀胱轻拉至腹壁外，先辨认清楚膀胱和输尿管的解剖位置，用止血钳提起膀胱前壁，选择血管较少处，切一纵行小口，插入插管后结扎。
使插管的引流管出口低于膀胱水平，用培养皿盛接由引流管流出的尿液。
术后用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。
（3）实验观察：1）按6~9ml/kg 体重剂量静脉快速注射生理盐水20ml，分5分钟记录尿量。
2）带尿量恢复后静脉注射200g/L葡萄糖5ml，分5分钟记录尿量。
3）带尿量恢复后静脉注射0.1g/L去甲肾上腺素0.5ml，分5分钟记录尿量。
4）带尿量恢复后静脉注射按5mg/kg体重剂量静脉注射10g/L呋塞米12.5ml，分5分钟记录尿量。
5）按0.75U/kg体重剂量静脉注射1000U/L垂体后叶素0.3ml，分5分钟记—录尿量。
尿液生成的影响因素药物对照组第一分钟第二分钟第三分钟第四分钟生理盐水 2.38±1.51 2.13±1.55 3.38±3.11 3.63±3.40 4.38±4.P值0.64*** 0.17*** 0.80*** 0.14*** 20%葡萄糖 4.25±5.73 8.38±6.74 12.38±8.12 10.88±12.50 10.50±1P值0.17*** 0.10*** 0.47*** 0.76***0.01%去甲肾上腺素 4.63±1.51 4.50±5.00 4.13±3.14 5.25±4.50 5.29±6.P值0.94*** 0.86*** 0.35*** 0.35***呋塞米 3.50±3.02 11.25±9.11 21.63±15.03 24.88±14.03 28.13±1 P值0.04** 0.03** 0.54*** 0.40**垂体后叶素27.75±13.13±8.90 5.63±8.77 6.00±8.99 5.75±7.21.05P值0.04** 0.06*** 0.48** 0.77*** *P<=0.01 数据有显著差异 **P<=0.05 数据有意义***P>=0.05 数据无意义3、对实验现象、数据及观察结果的分析与讨论：1、静脉注射大量生理盐水可使尿量增多。
其机制为：静脉快速注射生理盐水20ml 引起血容量增加，进而使血压升高，当动脉血压在80~180mmHg（10.7~24.0kPa）范围内变动时，肾小球毛细血管血压可保持相对稳定[1]。
当血压升高超过肾血流的自身调节能力时，可使肾小球毛细血管血压升高，且血浆稀释引起血浆胶体渗透压下降，二者均可使肾小球滤过率升高，尿生成增多，继而尿流量增大。
另外，循环血量的增加可刺激容量感受器，血压升高可刺激压力感受器，二者均可使迷走神经传入冲动增加，反射性的抑制抗利尿激素（ADH）的分泌和释放，使水的重吸收减少。
循环血量增多使心房扩张和摄入钠过多时还可刺激心房钠尿肽合成，通过抑制集合管对Na Cl 的重吸收、促进入球和出球小动脉的扩张（以前者为主）以及抑制肾素、醛固酮和抗利尿激素的分泌，使水的重吸收减少。
2、静脉注射高渗葡萄糖可使尿量增多。
其机制为：静脉注射20%葡萄糖5ml 可使血浆渗透压升高，促进组织也流入毛细血管，循环血量增加引起血压升高。
家兔的血糖浓度明显超过肾糖阈，导致小管液中葡萄糖含量增多，小管液渗透压增高，妨碍了水和Na Cl 的重吸收，造成尿量增多并出现糖尿。
另外血压升高可使肾小球滤过率增高且反射性抑制ADH 的合成和分泌，也可使尿量增多。
3、静脉注射去甲肾上腺素可使尿量减少。
其机制为：去甲肾上腺素可兴奋血管平滑肌上的α-肾上腺素能受体，引起血管收缩，外周阻力增加。
去甲肾上腺素可使入球小动脉和出球小动脉收缩，但前者收缩比后者更明显，使肾小球毛细血管血浆流量减少，肾小球毛细血管血压下降，肾小球的有效滤过压下降，尿生成减少。
4、静脉注射速尿（呋塞米）可使尿量大量增多。
其机制为：速尿可与髓袢升支粗段的Na+-K+-2Cl-共同转运系统可逆性结合，抑制其转运能力，使Na Cl 重吸收减少，降低了肾脏的稀释功能，同时使髓质间隙渗透压降低，也降低了肾脏的浓缩功能，从而产生迅速而强大的利尿作用，排出大量等渗尿。
5、静脉注射垂体后叶素可使家兔尿量减少。
其机制为：垂体后叶素包括催产素和ADH，ADH 可作用于血管平滑肌的相应受体，使血管收缩。
ADH 可与远曲小管和集合管上皮细胞管周膜上的V2 受体结合，通过兴奋性G 蛋白激活腺苷酸环化酶，使胞内c AMP 生成增多，最终增加管腔膜上的水通道，从而提高远曲小管和集合管上皮对水的通透性，增加水的重吸收而使尿量减少。
4、结论：（1）静脉注射大量生理盐水可使尿量增多。
（2）静脉注射高渗葡萄糖可使尿量增多。
（3）静脉注射去甲肾上腺素可使尿量减少。
（4）静脉注射速尿（呋塞米）可使尿量大量增多。
（5）静脉注射垂体后叶素可使家兔尿量减少。
5、实验总结1）、本次实验成败之处及其原因分析：（1）实验前未给兔多吃富含水分的饲料，导致尿闭。
（2）未保护家兔耳缘静脉，导致静脉注射失败。
（3）手术操作过重，引起损伤性尿闭。
腹部切口过大，切开腹部时损伤内脏。
2）、本实验的关键环节及改进措施：①做好本实验需要把握的关键环节：1.各种溶液配制浓度应适中。
2.结扎时应结实。
3.切开兔腹部时应注意避免切口过大导致兔死亡。
②若重做本实验，为实现预期效果，仪器操作和实验步骤应如何改善：实验过程中可以将膀胱插管改为尿道插管。
选用健康家兔,将20%氨基甲酸乙酯溶液以4m l/kg体重由耳缘静脉注射麻醉后,仰卧位固定在兔解剖台上,用8～14号导尿管(白色透明最好)顶部蘸少许液体石蜡,经尿道口缓缓插入约10cm左右,便可进入膀胱,尿液会自行流出。
如果所用家兔是雌性,插管时管顶部方向应略微向上倾斜,以免进入阴道。
一旦误入,则导尿管进入10cm后仍无尿液流出,可将导尿管抽出重新插一次。
3）、对实验的自我评价影响尿生成的因素实验是生理学泌尿系统的经典实验,此实验为生理学教学实验中必做的实验之一。
传统的方法为膀胱插管法此实验方法操作技术要求较高,难度较大,过程耗费时间长,任何一个环节不慎,都易导致实验不能顺利进行,就达不到实验的目的。
指导老师评语及得分：签名：年月日。