现代分子生物学ppt课件
• 翻译后的转运机制:细胞膜受体 • 核定位蛋白的转运机制:核定位序列 • 蛋白质的降解:蛋白酶水解、N端氨基酸影
响半衰期
第五章 分子生物学研究方法
知识要点
• 分子克隆技术的过程 • 分子杂交的概念 • PCR反应步骤
分子克隆RE、ligase • 重组DNA分子导入寄主细胞:细菌转化 • 重组体克隆的筛选:蓝白斑筛选、抗生素
第四章 生物信息的传递(下)
知识要点
• 三联体遗传密码 • tRNA的结构与功能 • 核糖体的结构与功能
• 蛋白质合成机制 • 蛋白质转运机制
遗传密码
• 遗传密码的破译 • 遗传密码的特性:无逗号、不重叠、通用
性、简并性、起始密码和终止密码
tRNA的结构与功能
• tRNA的二级结构:三叶草型——四环四臂 • tRNA的三级结构:倒L型 • tRNA的功能:密码子与反密码子的配对 • tRNA种类:起始tRNA与延伸tRNA、同工
C值矛盾
DNA结构
• DNA的一级结构 • DNA的二级结构——双螺旋模型
影响DNA二级结构稳定的因素 • DNA的高级结构——正超螺旋和负超螺旋
DNA复制
• 半保留复制 • 半不连续复制 • 复制的起点、方向和速度 • DNA聚合酶:原核 真核 • 原核生物和真核生物DNA复制的差别
第三章 生物信息的传递(上)
知识要点
• RNA转录过程和转录后加工 • 启动子与增强子、终止与抗终止 • 原核生物与真核生物mRNA的特征比较
RNA转录过程
• 不对称转录 • 原核生物RNA聚合酶:核心酶+因子 • 真核生物RNA聚合酶:分类、特征、转录
产物 • 起始(启动子)、延伸、终止(终止信号)
原核与真核启动子的特征 增强子的概念和作用特点 终止和抗终止
第一章 绪论
知识要点
• 分子生物学发展历史 • 分子生物学研究范围
重要名词
• 分子生物学Βιβλιοθήκη • 基因 • 中心法则第二章 染色体与DNA
知识要点
• 染色体 • DNA结构 • DNA复制 • DNA修复 • DNA转座
染色体
• 染色体是遗传物质的载体,DNA是遗传物 质
• 染色体上的蛋白质包括组蛋白和非组蛋白 • 染色体的基本结构单元是核小体 • 组蛋白的类别和特性 • 原核生 • 反转录生成cDNA • 与载体分子相连接 • 转入寄主细胞
酵母双杂交系统
• 用于分离能与已知靶蛋白质互作的基因 • 基本原理:真核生物的转录因子大多有两
个结构分开、功能上独立的结构域组成: DNA结合域(BD)和转录激活域(AD), 只有两者在空间上相互靠近才能起始转录。
• 激素调节、热激蛋白调节、金属蛋白调节
第八章 疾病与人类健康
知识要点
• 癌症发病机制 • 癌基因概念和分类 • 基因治疗的概念
癌基因的概念和分类
• 癌基因:体外引起细胞转化,体内诱发肿 瘤。分为v-onc(HIV和HBV)和c-onc两类
• 诱发癌症的因素:物理、化学、生物(点 突变、启动子插入、甲基化程度降低、基 因扩增与高表达、基因易位或重排)
真核生物基因组的特点
• 单顺反子 • DNA与蛋白质结合 • 存在大量的非转录和非翻译序列 • 转录的调节区较大 • RNA转录与蛋白质合成存在空间间隔 • 须经过成熟和剪切过程才能翻译成蛋白质
真核生物基因表达调控层次
• DNA水平:染色质结构变化、甲基化 • 转录水平:顺式因子和反式因子互作 • 转录后水平:剪切 • 翻译水平:5‘帽子结构的识别等 • 翻译后水平:切割、水解、化学修饰
RNA转录后加工
• 前体mRNA5’加帽子(m7G),3’端加尾 (polyA)
• RNA剪切:intron和exon的交界序列、选择 性剪切
• RNA编辑
原核与真核mRNA的比较
• 原核生物mRNA:半衰期短、多顺反子形式 存在、无帽子和尾巴
• 真核生物mRNA:有帽子和尾巴、单顺反子 帽子和尾巴的功能
tRNA、校正tRNA、氨酰tRNA合成酶
核糖体结构与功能
• 核糖体组成 rRNA序列特征:SD序列
• 原核与真核核糖体结构的差异 • 活性中心
蛋白质合成
• 氨基酸的活化 • 肽链的起始 • 肽链的延伸:进位、转位、移位 • 肽链合成的终止 • 蛋白质合成抑制剂
蛋白质转运机制
• 翻译——转运同步机制:信号肽的结构特 征
原核生物转录后调控
• 翻译起始调控:mRNA二级结构 • 稀有密码子对翻译的影响 • 重叠基因对翻译的影响 • Poly(A)对翻译的影响 • 翻译的阻遏 • 魔斑核苷酸水平对翻译的影响:严禁反应
第七章 基因的表达与调控(下)
知识要点
• 真核生物基因组的特点和表达调控特点 • 真核生物基因表达调控的多个层次 • 顺式因子和反式因子
• 抑癌基因:存在与正常细胞中的可抑制细 胞生长并具有潜在抑癌作用的基因
基因治疗
• 将正常基因或有治疗作用的基因通过一定 方式导入靶细胞以纠正基因缺陷或发挥治 疗作用,从而达到治疗疾病目的。
• 载体:病毒载体、非病毒载体
第九章 基因与发育
知识要点
• 免疫球蛋白的合成机制 • 果蝇胚胎的模式发育 • 高等植物花发育的分子机理
第六章 基因的表达与调控(上)
知识要点
• 基因表达调控的基本概念 • 操纵子模型
• 原核生物的转录后调控
基因表达调控的基本概念
• 组成性表达、诱导和阻遏表达 • 顺式作用元件、反式作用元件
操纵子模型
• 操纵子概念 • Lac operon:负调控和正调控 • Trp operon:弱化调节 • Ara operon:自身反馈调节
顺式因子和反式因子
• 顺式因子:启动子、增强子、沉默子 • 反式因子:转录因子 • 转录因子分为BD和AD两个区域 • BD:HTH、zinc finger、bZIP、bHLH等
蛋白质磷酸化与基因表达
• 受cAMP调控的A激酶 • 受Ca2+调控的C激酶 • CaM激酶和MAP激酶酪氨酸蛋白激酶
免疫球蛋白
• 免疫系统:体液免疫和细胞免疫 • B细胞的分化过程 • 免疫球蛋白的结构 • 免疫球蛋白基因重排产生多样性